專利名稱：一種雞血藤提取物及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種植物提取物，特別涉及一種雞血藤提取物及其制備方 法和用途。
背景技術：
螨類，特別是植食性害螨，是嚴重為害我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一類重要生物。
它具有個體小、繁殖快、種群密度高、危害重等特點，可危害150余種作物。 據(jù)不完全統(tǒng)計，我國每年用于柑橘、蘋果、梨、杉夂、棉花、蔬菜、小麥、茶 等8類主要作物的殺螨劑防治費用就達90多億元，而且隨著螨類對化學藥 劑抗藥性的逐年增加，防治費用也逐年加大。鑒于化學農(nóng)藥所產(chǎn)生的種種問 題以及常規(guī)研發(fā)途徑研發(fā)新的殺螨劑變得日益艱難，天然生物活性產(chǎn)物將成 為植物保護的新手段。植物源殺螨劑不但具有選擇性高、低毒、易降解、害 螨不易產(chǎn)生抗性等優(yōu)點，而且它對目標害螨的天敵昆蟲傷害較小。近年來從 植物中篩選出高活性的物質(zhì)，直接開發(fā)新的植物源殺螨劑，或以其為先導化 合物合成新的更安全高效的農(nóng)藥，已成為國內(nèi)外農(nóng)藥研究開發(fā)領域的一個熱 點。
朱砂葉螨(Tetranychus cinnabarinus)是一種世界范圍的重要經(jīng)濟害 蟲，嚴重影響作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。朱砂葉螨在中國分布廣泛，因其具有繁殖 力強、世代周期短、近親交配率高等特點，它比其他害螨更易對常規(guī)化學殺 螨劑產(chǎn)生抗性。因此，尋找更加安全的高效殺螨劑勢在必行。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于公開一種雞血藤(Herba Polygoni Avicularis， A^^W7^^e)提取物，本發(fā)明的目的還在于公開該提取物的制備方法， 本發(fā)明的目的還在于公開該提取物的用途。
本發(fā)明目的是通過如下方案實現(xiàn)的
本發(fā)明雞血藤提取物由如下方法中的一種制備而成
A.將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入2—8體積倍的石油醚，溫浸或冷浸3—5天，過濾，重復2-4次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞 血藤提取物；
B.將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入2—8體積倍的石油醚，滲 漉提取2-5次，或連續(xù)回流提取4-10小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞 血藤提取物。
本發(fā)明雞血藤提取物優(yōu)選如下方法中的一種制備而成
A. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，溫浸 或冷浸4天，過濾，重復3次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取 物；
B. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，滲漉 提取3次，或連續(xù)回流提取7小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取 物。
還可以將上述本發(fā)明雞血藤提取物制備為雞血藤提取液，具體方法為 取雞血藤提取物，用總體積的10 20 %的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石油醚，待 大部分石油醚揮發(fā)后加入總體積0. 5—2 %的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā)干 后，用蒸餾水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
還可以將上述本發(fā)明雞血藤提取物制備為雞血藤提取液，優(yōu)選方法為 取雞血藤提取物，用總體積的15%的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石油醚，待大部 分石油醚揮發(fā)后加入總體積1%的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā)干后，用蒸餾 水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
本發(fā)明提供了一種高效、低毒、低殘留、與環(huán)境及與其它生物和諧的新 型的雞血藤提取物農(nóng)藥，它對環(huán)境保護與解決害螨的抗藥性都具有深遠意 義。與化學制備的農(nóng)藥相比，本發(fā)明具有以下的特點和優(yōu)點
(1) 由于雞血藤為自然界中的植物，因此其提取物在自然條件下易于分 解，對環(huán)境和周圍的生態(tài)系統(tǒng)安全，沒有環(huán)境污染問題。
(2) 雞血藤提取物是一種多成分的混合物，對朱砂葉螨有多個作用位點， 因此不易產(chǎn)生抗藥性。
(3) 實驗證明，雞血藤提取物有顯著的殺螨效果，具有化學農(nóng)藥高效的特點。
5(4)雞血藤中活性成分的提取簡單易行，十分有利于進行工業(yè)化生產(chǎn)。 下面實驗例或?qū)嵤├糜谶M一步說明但不限于本發(fā)明。 實驗例l雞血藤提取物的殺朱砂葉螨活性測定實驗
1、 實驗材料
(1) 雞血藤提取物的制備按實施例l所述方法得到不同溶劑(石油醚、 氯仿和甲醇)雞血藤提取物；
(2) 將上述三種雞血藤提取物按照實施例2所述方法制備得到2 mg/mL 的雞血藤提取液；
(3) 朱砂葉螨的準備在如下條件下室內(nèi)飼養(yǎng)朱砂葉螨溫度25 ± rC， 相對濕度50 ± 10%，光照18 : 6 h (L : D)。
2、 成螨觸殺活性的測試
將雙面膠帶粘貼于玻片一端，揭去上面的紙片。用零號毛筆挑取大小一 致、顏色鮮艷的活潑雌成螨，將其背部粘在雙面膠帶上，不可粘住螨足、口 器及須肢，保證螨足自由活動，每片粘30頭。用雙目解剖鏡檢査粘好的玻片， 剔除不活動、受傷和粘的不合格的螨。隨后將供試螨浸入待測雞血藤提取液 中，輕輕搖動5s后取出，用吸水紙條小心吸去螨體周圍的多余雞血藤提取液。 每個處理設3個重復，以蒸餾水加l %吐溫_80為空白對照。48 h后在雙目解 剖鏡下檢査螨蟲的死亡情況，用毛筆輕觸螨體，以螨足不動者認定為死亡。 測定毒力時，雞血藤提取液樣品設置5個濃度梯度。每個處理設3個重復，以 蒸餾水加l %吐溫-80為空白對照。
3、 處理數(shù)據(jù)
采用SPSS軟件按幾率值分析法進行線性回歸分析，計算毒力回歸方程、 致死中濃度(LC5。)和LCs。值的95 9()置信限。采用Duncan's法進行方差分析，用 abbott公式計算校正死亡率。
4、 實驗結果
(1)三種雞血藤提取液對朱砂葉螨成螨的觸殺活性 采用玻片浸漬法測定了三種雞血藤提取液對朱砂葉螨的觸殺活性，結果 見表l。當雞血藤提取液濃度為2mg/mL時，雞血藤石油醚提取液對試蟲表現(xiàn) 出較高的觸殺活性，此外，從表中可以看出三種雞血藤提取液對朱砂葉螨24h的校正死亡率普遍較低，48 h的校正死亡率大大提高。
表1三種雞血藤提取液對朱砂葉螨成螨的觸殺活性
中草藥提取溶劑提取率％24 h校正死亡率/X48 h校正死亡率/ %
雞血藤甲醇16.712. 40土1.533gh31.68±5. 764ij
氯仿0. 3914. 78±3. 044cdefgh38. 57 ±6. 378fgh
石油醚0. 1834. 32土5.801b88. 86±9. 373ab
注表中同列數(shù)據(jù)中相同字母表示為5%水平的不顯著。
(2)根據(jù)三種雞血藤提取液對朱砂葉螨的觸殺活性的初篩結果 選取雞血藤石油醚提取液進行進一步研究，進一步確定雞血藤石油醚提 取液對朱砂葉螨的觸殺活性。采用玻片浸漬法測定了活性較高的雞血藤石油
醚提取液的致死中濃度LC5。和相對毒力，結果見表2。
表2雞血藤石油醚提取液對朱砂葉螨的觸殺毒力
中草藥溶劑毒力回歸方程相關系數(shù)LC5095%置信限相對毒力
r/ (mg ml/1)/ (mg ral/》
雞血藤石油醚Y-4. 9059 +1. 4858x0. 97441. 1569±0. 13140. 9260 1. 44541.08
注以具有最大LC5。值的藥劑的相對毒力為1，其他各藥劑的相對毒力用
最大LC5。有誤值除以該藥劑的LCs。值。 5、實驗結論
實驗結果表明雞血藤石油醚提取液對朱砂葉螨表現(xiàn)出較高的觸殺活性。 在雞血藤提取液濃度達到2mg/mL時，雞血藤石油醚提取液表現(xiàn)出較理想的殺 螨效果。
本發(fā)明下面實施例均能實現(xiàn)上述效果。
具體實施例方式
實施例l:本發(fā)明雞血藤提取物的制備
將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，溫浸或冷 浸4天，過濾，重復3次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取物。 實施例2:本發(fā)明雞血藤提取液的制備
取將實施例l中的提取物，用總體積的15 %的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石 油醚，待大部分石油醚揮發(fā)后加入總體積1%的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā) 干后，用蒸餾水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
7實施例3:本發(fā)明雞血藤提取物的制備
將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，滲漉提取3 次，或連續(xù)回流提取7小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取物。
權利要求
1、一種雞血藤提取物，其特征在于該提取物由如下方法中的一種方法制備A.將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入2-8體積倍的石油醚，溫浸或冷浸3-5天，過濾，重復2-4次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取物；B.將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入2-8體積倍的石油醚，滲漉提取2-5次，或連續(xù)回流提取4-10小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取物。
2、 如權利要求1所述的雞血藤提取物，其特征在于該提取物由如下 方法中的一種方法制備A. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，溫浸 或冷浸4天，過濾，重復3次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取 物；B. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，滲漉 提取3次，或連續(xù)回流提取7小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取 物。
3、 如權利要求1或2所述的提取物，其特征在于該提取物的制備方 法還包括如下步驟取雞血藤提取物，用總體積的10—20%的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石油醚， 待大部分石油醚揮發(fā)后加入總體積0. 5—2 %的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā) 干后，用蒸餾水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
4、 如權利要求3所述的提取物，其特征在于該提取物的制備方法還 包括的步驟為取雞血藤提取物，用總體積的15%的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石油醚，待 大部分石油醚揮發(fā)后加入總體積1%的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā)干后，用 蒸餾水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
5、 如權利要求l一4任一所述的提取物的制備方法，其特征在于該方法為如下方法中的一種A. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入2—8體積倍的石油醚，溫 浸或冷浸3—5天，過濾，重復2-4次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞 血藤提取物；B. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入2—8體積倍的石油醚，滲 漉提取2-5次，或連續(xù)回流提取4-10小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞 血藤提取物。
6、 如權利要求5所述的提取物的制備方法，其特征在于該方法為如下 方法中的一種A. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，溫浸 或冷浸4天，過濾，重復3次，合并濾液，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取 物；B. 將雞血藤粉碎，置入多功能提取罐，加入5體積倍的石油醚，滲漉 提取3次，或連續(xù)回流提取7小時，過濾，低壓濃縮，得本發(fā)明雞血藤提取 物。
7、 如權利要求5所述的提取物的制備方法，其特征在于該方法還包括 如下步驟取雞血藤提取物，用總體積的10—20%的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石油醚， 待大部分石油醚揮發(fā)后加入總體積0. 5—2 %的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā) 干后，用蒸餾水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
8、 如權利要求7所述的提取物的制備方法，其特征在于該方法還包括 的步驟為取雞血藤提取物，用總體積的15%的石油醚溶解，揮發(fā)溶劑石油醚，待 大部分石油醚揮發(fā)后加入總體積1%的吐溫-80混勻，等石油醚揮發(fā)干后，用 蒸餾水稀釋所得溶液，配成濃度為2 mg/mL的雞血藤提取液。
9、 如權利要求l一4任一所述的雞血藤提取物在制備殺螨藥物中的 應用。
10、 如權利要求9所述的應用，其中所述的殺螨是指朱砂葉螨。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高效、低毒、低殘留、與環(huán)境及與其它生物和諧的雞血藤提取物農(nóng)藥，在提取過程中采取浸提、滲漉或回流提取等步驟，它對環(huán)境保護與解決害螨的抗藥性都具有深遠意義。與化學制備的農(nóng)藥相比，本發(fā)明具有以下的特點和優(yōu)點由于雞血藤為自然界中的植物，因此其提取物在自然條件下易于分解，對環(huán)境和周圍的生態(tài)系統(tǒng)安全，沒有環(huán)境污染問題；雞血藤提取物是一種多成分的混合物，對朱砂葉螨有多個作用位點，因此不易產(chǎn)生抗藥性；實驗證明，雞血藤提取物有顯著的殺螨效果，具有化學農(nóng)藥高效的特點；雞血藤中活性成分的提取簡單易行，十分有利于進行工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A01N65/20GK101578999SQ200910087359
公開日2009年11月18日 申請日期2009年6月23日 優(yōu)先權日2009年6月23日
發(fā)明者師光祿, 王有年 申請人:北京農(nóng)學院