專利名稱：：一種復(fù)方雞血藤片劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬中藥制藥領(lǐng)域，涉及一種復(fù)方雞血藤片劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：復(fù)方雞血藤膏為傳統(tǒng)中藥，收載于《中國藥典》(2005年版一部)，由滇雞血藤膏粉、川牛膝、續(xù)斷、紅花和黑豆等藥加工而成，功能補血、活血、調(diào)經(jīng)，用于血虛、手足麻木、關(guān)節(jié)酸痛和月經(jīng)不調(diào)。該制劑療效確切、應(yīng)用歷史悠久，但成品質(zhì)地堅硬，服用時需先將整塊膏敲碎后再用酒、水各半燉化沖服，服用者非常不方便，每次服用劑量(610g)也難以準確掌握，而且輔料糯米、飴糖的用量超過總量的70%，加大了用藥劑量。目前文獻中尚未見對復(fù)方雞血藤膏的質(zhì)量控制研究報道，2005年版《中國藥典》復(fù)方雞血藤膏項下缺乏含量測定方法，而且定性鑒別僅規(guī)定了制劑性狀和香豆素類、酚類化合物的顯色反應(yīng)，專屬性差。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種服用方便，用藥劑量小，有確切療效的復(fù)方雞血藤片劑。本發(fā)明以減小用量、方便服用、提高質(zhì)量可控性為目的，對復(fù)方雞血藤膏傳統(tǒng)工藝進行改革，其中建立了君藥主要成分的高效液相色譜(RP-HPIX)含量測定方法及復(fù)方中三味主藥的薄層色譜(TLC)鑒別方法，制成本發(fā)明復(fù)方雞血藤片劑。本發(fā)明的質(zhì)量控制采用RP-HPLC方法對指標成分進行定量；采用TLC方法對本片劑中主藥滇雞血藤、川牛膝和續(xù)斷進行定性鑒別。本發(fā)明所述的的復(fù)方雞血藤制劑是以中藥滇雞血藤膏粉、川牛膝、續(xù)斷、紅花和黑豆為原料加輔料制成的片劑，其中各原料藥的重量份配比為滇雞血藤膏粉(滇雞血藤的水提干浸膏粉)218.75份，川牛膝59.5份，續(xù)斷53份，紅花5份，黑豆12.5份。本發(fā)明復(fù)方雞血藤片劑能治療血虛、手足麻木、關(guān)節(jié)酸痛和月經(jīng)不調(diào)。本發(fā)明的進一步目的是提供上述復(fù)方雞血藤片劑的制備方法。本發(fā)明復(fù)方雞血藤片劑通過下述方法和步驟制備(1)取滇雞血藤，加4-6倍量水煎煮3次，每次2-4小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏，8crc以下干燥，粉碎，過篩，得滇雞血藤膏粉；(2)川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆加4-6倍量水煎煮2-3次，每次1-2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，加入滇雞血藤膏粉，充分拌勻，8(TC以下干燥，粉碎，過篩，得中間體干浸膏粉；(3)取上述干浸膏粉8份，加入輔料l-2份，混勻，制粒，干燥，整粒，加入崩解劑，壓片；(4)通過RP-HPLC測定滇雞血藤膏粉中的異型南五味子丁素和南五味子素的含量；(5)通過TLC定性鑒別滇雞血藤、川牛膝和續(xù)斷。上述片劑所述的輔料是藥學領(lǐng)域制備片劑的常用輔料，包括稀釋劑乳糖、可壓性淀粉、羧甲基纖維素鈉、糊精、微晶纖維素等；潤濕劑乙醇、糖漿等；崩解劑羧甲基淀粉鈉、polyplasdoneXL等以及潤滑劑硬脂酸鎂、滑石粉等，選用上述輔料中任意一種單獨使用或幾種按不同比例組合使用。按復(fù)方雞血藤膏單次服用10g計，相當于每次服用中間體2.7g，依此計算，本發(fā)明所提供的復(fù)方雞血藤片劑每次只需服用3g左右，在療效確切的前提下，明顯減小了用藥劑量，為服用者提供了方便。圖1是混合對照品、復(fù)方雞血藤片劑及其陰性對照樣品的HPLC色譜圖，其中，A:混合對照品；B:復(fù)方雞血藤片；C:缺滇雞血藤陰性樣品。圖2是復(fù)方雞血藤片劑中滇雞血藤的鑒別，其中，+:復(fù)方雞血藤片劑；-缺滇雞血藤陰性對照；Sl:異型南五味子丁素；S2:南五味子素；極性石油醚-乙酸乙酯(1:1)。圖3是復(fù)方雞血藤片劑中川牛膝的鑒別，其中，+:復(fù)方雞血藤片劑；-缺川牛膝陰性對照；S:川牛膝對照藥材；極性石油醚-氯仿-丙酮(8:1:1)。圖4是復(fù)方雞血藤片劑中續(xù)斷的鑒別，其中，+:復(fù)方雞血藤片劑；-:缺續(xù)斷陰性對照；S:續(xù)斷對照藥材；極性:氯仿-甲醇(5:1)。具體實施方式實施例1取滇雞血藤，加水煎煮三次，第一次6倍量水4h,第二次4倍量水3h，第三次4倍量水2h，濾過，濾液濃縮至1.30g/ml，6(TC真空干燥，粉碎，過六號篩，備用；川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆加水煎煮三次，每次4倍量水2h,合并煎液，濾過，濾液濃縮至0.73g/ml，加入滇雞血藤膏粉，充分拌勻，6(TC真空干燥，粉碎，過五號篩。將得到的干膏粉與羧甲基纖維素鈉、淀粉、微晶纖維素和polyplasdoneXL按8:0.5:0.5:0.3:0.4比例均勻混合，噴50%乙醇(用量30%)制軟材，擠壓過22目篩網(wǎng)，60。C烘干，通過22目和30目篩整粒，得22目~30目大小的顆粒，外加3%崩解劑polyplasdoneXL，混合均勻，壓片。實施例2取滇雞血藤，加水煎煮三次，第一次6倍量水4h，第二次4倍量水3h，第三次4倍量水2h，濾過，濾液濃縮至1.27g/ml，6(TC真空干燥，粉碎，過六號篩，備用；川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆加水煎煮三次，每次4倍量水2h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至0.70g/ml，加入滇雞血藤膏粉，充分拌勻，6(TC真空干燥，粉碎，過五號篩。將得到的干膏粉與羧甲基纖維素鈉、淀粉、微晶纖維素按8:0.5:0,5:i的比例均勻混合，噴50%乙醇(用量30%)制軟材，擠壓過22目篩網(wǎng)制粒，6CTC烘干，通過22目和30目篩整粒，得22~30目大小的顆粒，壓片。實施例3取滇雞血藤，加水煎煮三次，第一次6倍量水4h，第二次4倍量水3h，第三次4倍量水2h,濾過，濾液濃縮至1.28g/ml，6CTC真空干燥，粉碎，過六號篩，備用；川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆加水煎煮三次，每次4倍量水2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至0.73g/ml，加入滇雞血藤膏粉，充分拌勻，6(TC真空干燥，粉碎，過五號篩。將得到的干膏粉與乳糖、淀粉和微晶纖維素按8:0.5:0.5:1的比例均勻混合，噴50%乙醇(用量30%)制軟材，擠壓過22目篩網(wǎng)制粒，6CTC干燥，通過22目和30目篩整粒，得2230目大小的顆粒，壓片。按《中華人民共和國藥典》(2005年版一部)規(guī)定對上述實施例所制片劑進行片劑制劑學檢查，總量差異、崩解時限以及水分檢查均符合要求。實施例4本發(fā)明發(fā)現(xiàn)木脂素類化合物是本發(fā)明所提供的復(fù)方雞血藤片劑君藥滇雞血藤膏粉的主要活性成分，其中又以異型南五味子丁素(HD)和南五味子素(KA)含量較高、活性較強。本發(fā)明按前述實施例1方法制備三批復(fù)方雞血藤片劑，并采用RP-HPLC方法分別測定了其中HD和KA的含量。色譜條件和測定結(jié)果如下-色譜條件色譜柱Phe畫enexLunaC18(250X4.6mm，5iim);預(yù)柱SecurityG離dCartridgesC18(3.0X4.0咖)；柱溫35°C;流動相甲醇-乙腈-水連續(xù)梯度洗脫，10:40:50(Omin)—10:47:43(23rain)—10:50:40(35min)—10:80:10(59min)，共65min;流速1ml/min;檢測波長230nm?；旌蠈φ掌?、復(fù)方雞血藤片劑和缺滇雞血藤的片劑陰性對照樣品色譜圖顯示(圖l)，其中HD保留時間約為37.5min,KA保留時間約為43.5min。表1是三批復(fù)方雞血藤片劑中HD、KA含量測定結(jié)果(ug/g)(n=3)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本發(fā)明對前述實施例1中所制備的復(fù)方雞血藤片劑中滇雞血藤、川牛膝、續(xù)斷三個主要組分進行了TLC鑒定，方法和結(jié)果如下述1、滇雞血藤的TLC鑒別取復(fù)方雞血藤片劑l片(研成細粉)，加環(huán)己垸20ml，超聲提取30min，濾過，濾液濃縮至0.2ml，作為供試品溶液。同法制備缺滇雞血藤的片劑陰性對照溶液。另取異型南五味子丁素和南五味子素對照品，分別加環(huán)己烷制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照品溶液、陰性對照溶液和供試品溶液各5nl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(609(TC)-氯仿-丙酮(8:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下觀察。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗斑；陰性對照色譜中，無明顯斑點(圖12)。另以環(huán)己烷-乙酸乙酯(8:2)或甲苯-乙酸乙酯(6:1)為展開劑進行驗證，得到相似的結(jié)果。2、川牛膝的TLC鑒別取復(fù)方雞血藤片劑1片(研成細粉)，加甲醇20tnl，超聲提取30min，濾過，濾液減壓回收溶劑，殘渣加氯仿0.5ml溶解，作為供試品溶液。同法制成缺川牛膝的片劑陰性對照溶液。另取川牛膝對照藥材O.lg，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液、陰性對照溶液和供試品溶液各5u1，分別點于同一硅膠GFw薄層板上，以石油醚(6090°C)-乙酸乙酯(1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的亮藍色斑點；陰性對照色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上無斑點(圖3)。另以環(huán)己垸-乙酸乙酯(8:2)或石油醚-氯仿-甲醇(10:9:i)為展開劑進行驗證，得到相似的結(jié)果。3、續(xù)斷的TLC鑒別取復(fù)方雞血藤片劑1片(研成細粉)，加水lOml混懸，用正丁醇萃取三次，每次10ml，合并正丁醇層，濾液減壓回收溶劑，殘渣加氯仿0.5ml溶解，作為供試品溶液。同法制成缺續(xù)斷的片劑陰性對照溶液。另取續(xù)斷對照藥材O.lg，加正丁醇10ml超聲提取30min，濾過，濾液減壓回收溶劑，殘渣加氯仿0.5ml溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液、陰性對照溶液和供試品溶液各5yl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇-甲醇-水(6:1:5)的上層為展開劑，展開，取出，晾千，噴香蘭素-濃硫酸顯色液，105'C烘至顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍紫色斑點，斑點顏色漸漸變?yōu)楹谏?；陰性對照色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上無斑點(圖4)。另以氯仿-甲醇(5:1)為展開劑進行驗證，得到相似的結(jié)果。權(quán)利要求1、一種復(fù)方雞血藤片劑，其特征在于以中藥滇雞血藤膏粉、川牛膝、續(xù)斷、紅花和黑豆為原料加輔料制成片劑，其中各原料藥的重量份配比為滇雞血藤膏粉218.75份，川牛膝59.5份，續(xù)斷53份，紅花5份，黑豆12.5份，通過下述方法制備(1)取滇雞血藤，加4-6倍量水煎煮3次，每次2-4小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏，80℃以下干燥，粉碎，過篩，得滇雞血藤膏粉；(2)川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆加4-6倍量水煎煮2-3次，每次1-2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，加入滇雞血藤膏粉，拌勻，80℃以下干燥，粉碎，過篩，得中間體干浸膏粉；(3)取上述干浸膏粉8份，加入輔料1-2份，混勻，制粒，干燥，整粒，加入崩解劑，壓片；(4)采用高效液相色譜法測定滇雞血藤膏粉中的異型南五味子丁素和南五味子素的含量；(5)采用薄層色譜法定性鑒別滇雞血藤、川牛膝和續(xù)斷。2、按權(quán)利要求1所述的復(fù)方雞血藤片劑，其特征在于所述的輔料選自下述輔料的一種或幾種的組合稀釋劑、潤濕劑、崩解劑和/或潤滑劑；其中，稀釋劑選自乳糖、可壓性淀粉、羧甲基纖維素鈉、糊精或微晶纖維素；潤濕劑選自乙醇或糖漿；崩解劑選自羧甲基淀粉鈉或polyplasdoneXL;潤滑劑選自硬脂酸鎂或滑石粉。3、按權(quán)利要求1所述的復(fù)方雞血藤片劑，其特征在于所述的高效液相色譜法的測定色譜條件為用十八垸基鍵合相硅膠為填充劑，加乙腈-甲醇-水為流動相，梯度洗脫10:40:500min，10)47:4323min，10:50:4035min，10:80:10(59min)，共65min;流速lml/min;檢測波長230nm。4、按權(quán)利要求1所述的復(fù)方雞血藤片劑，其特征在于所述的薄層色譜法定性鑒定滇雞血藤條件為以異型南五味子丁素或南五味子素為對照品，以石油醚6090°C-氯仿-丙酮8:i:i、環(huán)己烷-乙酸乙酯8:2或甲苯-乙酸乙酯6:i為展開劑。5、按權(quán)利要求1所述的復(fù)方雞血藤片劑，其特征在于所述的薄層色譜法定性鑒定川牛膝條件為以川牛膝對照藥材為對照，以石油醚6090°C-乙酸乙酯1:1、環(huán)己烷-乙酸乙酯8:2或石油醚-氯仿-甲醇io:9:i為展開劑。6、按權(quán)利要求i所述的復(fù)方雞血藤片劑，其特征在于所述的薄層色譜法定性鑒定續(xù)斷條件為以續(xù)斷對照藥材為對照，以正丁醇-甲醇-水6:i:5的上層溶液或氯仿-甲醇5:i為展開劑。全文摘要本發(fā)明屬中藥制藥領(lǐng)域，涉及一種復(fù)方雞血藤片劑及其制備方法。本發(fā)明以減小用量、方便服用、提高質(zhì)量可控性為目的，對復(fù)方雞血藤膏傳統(tǒng)工藝進行改革，建立了君藥主要成分的高效液相色譜含量測定方法及復(fù)方中主藥的薄層色譜鑒別方法，制成本發(fā)明復(fù)方雞血藤片劑。用于治療血虛、手足麻木、關(guān)節(jié)酸痛和月經(jīng)不調(diào)。與傳統(tǒng)的復(fù)方雞血藤膏相比，本發(fā)明的給藥方便、服用劑量??；主藥能定性鑒別，專屬性強；主要活性成分能含量測定，提高了質(zhì)量的可控性。文檔編號A61P19/00GK101112415SQ20071004345公開日2008年1月30日申請日期2007年7月5日優(yōu)先權(quán)日2007年7月5日發(fā)明者燕盧,燁孫,陳道峰申請人:復(fù)旦大學