的特征峰。2927 · 85cm-1 和2854 · 56cm-1 為多西他賽-油酸前藥中-CH2-的特征峰。
[0037] 采用高分辨質(zhì)譜來確定實施例1中多西他賽-油酸前藥的分子量和分子式。結(jié)果如 圖3。測得分子量為1072.59，分子式為C61H86N1O15。
[0038] 實施例2
[0039]多西他賽-油酸前藥的穩(wěn)定性
[0040]將多西他賽-油酸前藥與多西他賽分別加入到大鼠血漿中，置于37°C振蕩器中，測 定藥物在Oh，2h，4h，6h，8h，12h，24h，48h，72h，96h，120h的含量變化。結(jié)果如圖4所示。在大 鼠血漿中，多西他賽-油酸前藥相比于多西他賽具有更高的穩(wěn)定性。
[0041 ] 實施例3
[0042]乳化超聲法制備基于core-match機理的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體 [0043]制備工藝如下：將一定量的單硬脂酸甘油酯（6.7mg)，油酸（3.3mg)，多西他賽-油 酸前藥(8mg)，PLV 2(xK)(3mg)，溶于適量乙醇中，加熱至80°C，磁力攪拌下使其溶解均勻。將F68 (IOmg)溶于I OmL水中，加熱至80°C，磁力攪拌下使其溶解均勻。將上述乙醇溶液快速加入到 水溶液中，80°C水浴下保持磁力攪拌5min。將上述溶液超聲處理(200W，5min)，迅速冰浴冷 卻，得到淡藍色乳光液體制劑。將上述方法中的多西他賽-油酸前藥分別替換為多西他賽， 香豆素-6和DiR，其他條件不變，制備包載多西他賽，香豆素-6，和DiR的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體。 [0044]通過透射電子顯微鏡測定實施例3中制備的包載多西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu) 脂質(zhì)載體和包載多西他賽的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的粒徑和形態(tài)，結(jié)果如圖5。透射電鏡圖表明 載藥納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體為粒徑均一的球形，粒徑在I OOnm左右。
[0045] 所制備的多西他賽納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的載藥量約為5%，而多西他賽-油酸前藥納 米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的載藥量約為23%，說明core-match機理能顯著提高納米制劑的載藥量。
[0046] 實施例4
[0047] 納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的膠體穩(wěn)定性試驗
[0048]以pHl. 2鹽酸溶液，pH6.8磷酸鹽緩沖液，模擬胃液，模擬腸液為介質(zhì)。將ImL包載多 西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體和ImL包載多西他賽的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體分別加入 至lj30mL不同的介質(zhì)中，置于37°C震蕩器中。在規(guī)定的時間點測定納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的粒徑。 [0049]結(jié)果如圖6,在pHl.2鹽酸溶液，pH6.8磷酸鹽緩沖液中，包載多西他賽-油酸前藥的 納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體和包載多西他賽的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在規(guī)定的時間內(nèi)均能保持粒徑不 變。但在模擬胃液，模擬腸液中，包載多西他賽的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在8小時候后粒徑顯著 增大，相比之下包載多西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體粒徑無明顯變化，表明基于 core-match機理的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體具有更好的膠體穩(wěn)定性。
[0050] 實施例5
[0051 ]納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的體外釋放試驗
[0052]采用透析法考察實施例3制備的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的體外釋藥特征。分別移取包 載多西他賽和多西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體溶液ImL(IOOugAiL)于透析袋中，透 析袋兩端夾緊，分別置于含有30mL pHl. 2鹽酸溶液和PH6.8磷酸鹽緩沖液的錐形瓶中，在37 °C恒溫振蕩器中進行體外釋放度考察。在規(guī)定的時間點取樣2mL，同時補充2mL新鮮的釋放 介質(zhì)到錐形瓶中。樣品經(jīng)0.45μπι微孔濾膜過濾，取20yL進行含量測定。
[0053] 圖7結(jié)果表明包載多西他賽的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在釋放介質(zhì)中快速釋放，但包載 多西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體釋藥緩慢，具有良好的緩控釋效果，說明corematch 效應能顯著提高藥物與載體的親和力 ，提高制劑的緩控釋效果。
[0054] 實施例6
[0055]大鼠原位單向腸灌流試驗
[0056]實驗前，供試液飽和管路Ih，并以0.2mL/min的流速收集出液口流出的藥液，測定 該藥液濃度作為腸道進口灌流液中藥物的濃度，以消除實驗過程中管路對藥物的吸附作 用。將大鼠禁食過夜（自由飲水），用質(zhì)量分數(shù)為20%的烏拉坦腹腔注射麻醉（I .Og/kg)，置 于恒溫手術(shù)臺上以保持體溫。沿腹中線剪開3~4cm的開口，打開腹腔，分離出待考察腸段， 取約IOcm于兩端切口，用預熱至37°C的生理鹽水輕緩的將腸內(nèi)容物沖洗干凈，于切口處插 管，結(jié)扎。將傷口用浸有生理鹽水的脫脂棉覆蓋保濕，于紅外燈下保溫。進口處用已知重量 的裝有供試液的燒杯進行灌流，流速〇. 2mL/min，每隔15min在出口處用另一已知重量的EP 管收集一次（同時迅速更換下一個供試液燒杯和EP管），稱量此時供試液燒杯和EP管的重 量，測定藥物的濃度，實驗持續(xù)時間為120min。實驗最后將大鼠處死，剪下被灌流腸段，用尺 測量其長度（1)和內(nèi)徑（r)。根據(jù)以下公式計算藥物吸收速率常數(shù)(K a)和表觀吸收系數(shù) (Papp) 〇

[0059 ] Cciut為流出管中供試液藥物的濃度;Cin為流入管中供試液中藥物的濃度;Vciut為收 集管中流出液的體積;Vin是流入的供試液的體積。
[0060]圖S(Ka)，圖9(Papp)為大鼠原位單向腸灌流結(jié)果。載藥納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在各個腸 段的吸收均強于溶液組，對于Ka，多西他賽-油酸納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體相對于多西他賽-油酸 溶液組在十二指腸，空腸，回腸，結(jié)腸分別顯著性提高了 1.4倍，2.0倍，1.9倍和1.5倍；多西 他賽納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的Ka相對于多西他賽溶液組僅在空腸，回腸顯著性提高了 1.6倍和 2.0倍。對于Papp，多西他賽-油酸納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體相對于多西他賽-油酸溶液組在十二指 腸，空腸，回腸，結(jié)腸分別顯著性提高了 1.6倍，2.3倍，2.1倍和1.5倍;多西他賽納米結(jié)構(gòu)脂 質(zhì)載體的Papp相對于多西他賽溶液組僅在空腸，回腸分別顯著性提高了 1.7倍和2.1倍。結(jié)果 證明實施例3所構(gòu)建的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體能顯著提高藥物的腸吸收，且基于core-match機 理的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體具有更好的腸吸收。
[0061 ] 實施例7
[0062] 納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在大鼠腸道的吸收分布
[0063] 大鼠禁食（自由飲水）12h后，分別灌胃包載香豆素-6的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體和香豆 素-6溶液劑，50min后，猝死大鼠。分別取出約Icm長的十二指腸、空腸、回腸和結(jié)腸，冰冷的 PBS(pH 7.4)清洗干凈后，外翻，置于包埋劑(OTC)中于-80°C冷凍。將冷凍的腸段切成IOum 厚的薄片，分別置于表面凃有陽離子樹脂的載玻片上，用4%的多聚甲醛室溫固定lOmin。 PBS(pH 7.4)清洗兩次后，用羅丹明鬼筆環(huán)肽于371染色12〇1^11。再次清洗后，用04?1染色 IOmin。最后滴加封片液，加置蓋玻片，進行共聚焦成像。
[0064] 由圖10可以看出，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在整個腸段的熒光強度均明顯強于溶液劑。 由重疊后的圖片可以看出，藍色和綠色熒光的疊加區(qū)域制劑組比溶液組更深?？梢杂^察到 香豆素-6被小腸細胞吸收后，可向更深的部位滲透，說明納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體能夠促進藥物 在小腸的吸收。
[0065] 實施例8
[0066] 納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在小鼠腸道的吸收分布
[0067]小鼠禁食（自由飲水）12h后，分別灌胃包載DiR的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體和DiR溶液劑。 分別于給藥后第2h，4h，8h猝死小鼠，取出除盲腸外的整個腸段。用生理鹽水清洗取出的腸 段，并立即用活體成像儀檢測熒光強度。
[0068] 由圖11可以看出，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在整個腸段的熒光強度均明