多西他賽-油酸前藥及其納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑新輔料和新劑型領(lǐng)域，包括多西他賽-油酸前藥(DTX-OA)及 基于core-match機(jī)理包載的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(NLC)，以及其在口服給藥中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002 ]多西他賽(DTX)是臨床應(yīng)用廣泛的抗癌藥。但極低的水溶性導(dǎo)致市售制劑中含有 大量的吐溫80和乙醇作為增溶劑，易產(chǎn)生毒副作用，進(jìn)而限制了其臨床應(yīng)用。同時(shí)，注射給 藥不可避免的面臨諸多弊端，例如易發(fā)生感染，患者依從性低，副作用大等。與注射給藥相 比，口服給藥具有方便，經(jīng)濟(jì)，患者有較高的順應(yīng)性等特點(diǎn)。但由于多西他賽水溶性極低，滲 透性差，且本身為P-gp底物，導(dǎo)致多西他賽口服生物利用度很低。
[0003] 納米載體由于能夠提高抗癌藥物的療效并且減少藥物副作用而被廣泛用于靶向 藥物傳遞系統(tǒng)。其中，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體作為新一代的脂質(zhì)納米粒在口服藥物傳遞中備受 矚目，因其具有很好的生物相容性和穩(wěn)定的緩控釋效果。但包載多西他賽的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì) 載體存在載藥量低的問(wèn)題(5%，w/w)，限制了其臨床應(yīng)用。根據(jù)core-match理論，當(dāng)經(jīng)過(guò)化 學(xué)修飾的藥物與納米載體含有相同的成分時(shí)，修飾后的藥物與載體之間會(huì)產(chǎn)生極高的親和 力，可以顯著提高納米載體的載藥量。因此，設(shè)計(jì)合成了多西他賽-油酸前藥，將其包載于含 有油酸(OA)作為液態(tài)脂質(zhì)的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體中（DTX-OA-NLC)，通過(guò)core-match機(jī)制提高 藥物的載藥量，并進(jìn)一步提高多西他賽的口服生物利用度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的第一個(gè)目的旨在提供多西他賽-油酸前藥。
[0005] 本發(fā)明的第二個(gè)目的旨在提供基于core-match機(jī)理包載多西他賽-油酸前藥的納 米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的第三個(gè)目的旨在提供基于core-match機(jī)理包載多西他賽-油酸前藥的納 米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在口服給藥中的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的：
[0008] 該多西他賽-油酸前藥以多西他賽為母藥，以酯鍵鏈接一分子油酸而形成前藥，是 一種穩(wěn)定性好、功能性強(qiáng)的脂肪酸前藥。
[0009] 所述的多西他賽-油酸前藥的結(jié)構(gòu)式如下：
[0010]
[0011]所述的多西他賽-油酸前藥，其特征在于，油酸與多西他賽側(cè)鏈2'位相連。其制備 過(guò)程如下：油酸（OA)溶于少量二氯甲烷中，在雙環(huán)己基碳酰亞胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化作用下，N 2保護(hù)下冰浴2-3h，然后與多西他賽在25-30°CN2保護(hù)下反應(yīng)24-36h，經(jīng) 分離純化得到白色粉末狀前藥。反應(yīng)式如下：
[0013] 所述的基于core-match機(jī)理的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體可采用乳化超聲法制備，以單硬 脂酸甘油酯為固體脂質(zhì)，以油酸為液體脂質(zhì)，以多西他賽-油酸前藥為主藥，以泊洛沙姆188 (F 68)為表面活性劑，以賴氨酸橋連的聚乙二醇2000二維生素 E琥珀酸酯(PLV2qqq)為表面修 飾材料，其中，各組分間的重量百分組成為：1:〇.3~0.5:0.5~1.0:0.3~0.5:0.8~1.2(單 硬脂酸甘油酯：油酸:F 68: PLV2k : DTX-0A)，優(yōu)選為：7:3:5:3:8。表面活性劑可以脫氧膽酸鈉 替代，表面修飾材料可以賴氨酸橋連的聚乙二醇5000二維生素 E琥珀酸酯(PLV5qqq)替代。
[0014] 制備工藝如下：將一定量的單硬脂酸甘油酯，油酸，多西他賽-油酸前藥，PLV2000 , 溶于適量乙醇中，加熱至70_80°C，磁力攪拌下使其溶解均勻。將F68溶于一定量水中，加熱至 70-80°C，磁力攪拌下使其溶解均勻。將上述乙醇溶液快速加入到水溶液中，70-80°C水浴下 保持磁力攪拌5-10min。將上述溶液超聲處理(200-400W，5-10min)，迅速冰浴冷卻，得到淡 藍(lán)色乳光液體制劑。
[0015] 本發(fā)明具有以下有益效果:制備的多西他賽-油酸前藥穩(wěn)定性好，在大鼠血漿中相 對(duì)于多西他賽有更高的穩(wěn)定性。制備的基于core-match機(jī)理的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體粒徑較小 且均一(90nm)，載藥量高(23%，w/w)，物理穩(wěn)定性好，體外腸灌流試驗(yàn)和體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)證 實(shí)基于core-match機(jī)理包載多西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體能顯著提高多西他賽 的口服生物利用度。
【附圖說(shuō)明】
[0016] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例1的多西他賽-油酸前藥的1HNMR譜圖。
[0017] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例1的多西他賽-油酸前藥的高分辨質(zhì)譜譜圖。
[0018]圖3為本發(fā)明實(shí)施例1的多西他賽-油酸前藥的FT-IR譜圖。
[0019 ]圖4為本發(fā)明實(shí)施例1的多西他賽-油酸前藥與多西他賽在大鼠血漿中的穩(wěn)定性對(duì) 比圖。
[0020] 圖5為本發(fā)明實(shí)施例3的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的透射電子顯微鏡圖。A:多西他賽-油 酸納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體;B:多西他賽納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體。
[0021] 圖6為本發(fā)明實(shí)施例3的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在不同模擬介質(zhì)中的膠體穩(wěn)定性。A:多 西他賽-油酸納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體;B:多西他賽納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體。
[0022]圖7為本發(fā)明實(shí)施例3的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體在不同模擬介質(zhì)中的體外釋放實(shí)驗(yàn)。 [0023]圖8為本發(fā)明實(shí)施例3的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的原位單向腸灌流的吸收速率常數(shù) (Ka)圖。
[0024]圖9為本發(fā)明實(shí)施例3的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的原位單向腸灌流的表觀吸收系數(shù) (Papip)圖。
[0025] 圖10為本發(fā)明實(shí)施例3的包載香豆素 -6的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的大鼠腸道吸收分布 圖。
[0026] 圖11為本發(fā)明實(shí)施例3的包載DiR的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的小鼠腸道吸收分布圖。
[0027] 圖12為本發(fā)明實(shí)施例3的包載多西他賽-油酸前藥的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體大鼠腸道 攝取機(jī)制圖。
[0028] 圖13為本發(fā)明實(shí)施例3包載香豆素 -6的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的MDCK細(xì)胞攝取圖。 [0029]圖14為本發(fā)明實(shí)施例3的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體口服給藥藥時(shí)曲線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0030] 下面通過(guò)實(shí)施例的方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但并不因此將發(fā)明限制在所述的實(shí)施 例范圍之中。
[0031] 實(shí)施例1
[0032]多西他賽-油酸前藥的合成。
[0033] 油酸（OA)溶于少量二氯甲烷中，在雙環(huán)己基碳酰亞胺（DCC)和4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化作用下，N2保護(hù)下冰浴2h，然后與多西他賽在25°CN2保護(hù)下反應(yīng)24h，經(jīng)分離純化 得到白色粉末狀前藥。反應(yīng)式如下：
[0034]
[0035] 采用核磁共振測(cè)定1H-NMR氫譜來(lái)確定實(shí)施例1中前藥的結(jié)構(gòu)，選用的溶劑為CDCl3, 結(jié)果如圖 1。1 · 158ppm，1 · 783ppm，5 · 229ppm，8 · 13Ippm為多西他賽H7, -9,，，H2q，H25,29的特征 峰。0·886ppm，1·271ppm，1·290ppm，1·334ppm，1·657ppm，2·041ppm，2·372ppm，5·368ppm為 油酸-CH 3，CH3-(CH2)5-CH2-，CH 3-(CH2)5_CH2-，-CH2-(CH2) 3-CH2-，-CH2-CH2CH2CO-，-CH 2CH2CO-，-CH2CH=CHCH2-，-CH 2CO-和-CH=CH-的特征峰。
[0036] 采用FT-IR圖譜來(lái)確定實(shí)施例1中前藥相對(duì)于母藥在化學(xué)基團(tuán)上的變化，結(jié)果如圖 2。2978 · 00cm-1 和2939 · 43cm-1 為多西他賽結(jié)構(gòu)中-CH3