，該種納米顆粒在目的組織例如腫瘤中的貶庫形成取決于納米顆粒的濃度，即增加納 米顆粒濃度導致貶庫形成增加。該結(jié)果是不期望的，因為人們可合理地假設(shè)注射納米顆粒 的濃度在組織中快速平衡為不同濃度，使得不同濃度的相同納米顆粒沒有不同表現(xiàn)。
[0049] 本發(fā)明的另一個方面是磁性燒氧基娃燒涂覆的金屬納米顆粒團聚體的懸液，其可 通過上述方法得到。如W下實施例所示，該懸液可W W日常慣例注射到腫瘤中，停留在腫瘤 組織中并因此可用于過熱療法和熱消融。出乎意料地發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的燒氧基娃燒涂覆 導致了納米顆粒團聚的性質(zhì)，W該種方式使得在注射到組織中之后團聚體主要停留在靠近 注射位點處而仍然容易操作。該使得該些團聚體尤其適合于注射到腫瘤組織中例如用于過 熱療法和/或熱消融。
[0化0] 本發(fā)明的另一個方面是包含磁性燒氧基娃燒涂覆的金屬納米顆粒團聚體的組 合物，其中所述團聚體的如通過光散射所測定的平均尺寸為30nm至450nm，優(yōu)選50nm至 350nm并且尤其是70nm至300nm。例如，實施例3描述了根據(jù)本發(fā)明的團聚納米顆粒的尺 寸測量。
[0051] 優(yōu)選地，該包括團聚體的組合物基本不含有機溶劑。"基本不含有機溶劑"在本上 下文中優(yōu)選地意指可存在痕量的有機溶劑，例如有機溶劑的量小于5體積％，優(yōu)選小于1體 積％，更優(yōu)選小于0. 5體積％，尤其是小于0. 1體積％。在一個尤其優(yōu)選的實施方案中，通 過常規(guī)方法在納米顆粒制備物中檢測不到有機溶劑。
[0052] 該種組合物的金屬納米顆粒優(yōu)選是具有金屬核的納米顆粒，所述金屬核的如通過 電子顯微鏡所測定的尺寸為5皿至25皿，優(yōu)選尺寸為7皿至20皿并且尤其是尺寸為9皿至 15皿。如在透射電子顯微鏡法（TEM)中所測定的，懸液的團聚體優(yōu)選由幾十個至幾百個該 種單個納米顆粒構(gòu)成，而任意或僅非常少數(shù)的是少于10個納米顆粒的小團聚體，優(yōu)選在W 700X700nm和至少1000個納米顆粒展示的代表性TEM圖片中10個或更少納米顆粒的團聚 體小于3個。例如，實施例6描述了根據(jù)本發(fā)明的透射電子顯微鏡法。
[0化引進而，在W700X700nm和至少1000個納米顆粒展示的代表性TEM圖片中，可檢測 到小于10個的單個納米顆粒，優(yōu)選小于5個的單個納米顆粒，尤其是一個或沒有單個納米 顆粒。納米顆粒在本上下文中是在透射電子顯微圖中可見的一種基本為球形或立方體的高 電子密度的納米顆粒。單個納米顆粒是不與至少一個其它納米顆粒連接的納米顆粒。
[0化4] 優(yōu)選地，單個納米顆粒的形狀是球形或立方體的?？赏ㄟ^調(diào)節(jié)pH、離子強度、溫度、 鹽的性質(zhì)（高氯酸鹽、氯化物、硫酸鹽和硝酸鹽）、或化(II) / Fe (III)濃度比來修改納米 顆粒的尺寸和形狀（如Mohapatra和Anand2010所綜述）。
[0055] 優(yōu)選地，所述金屬納米顆粒包括鐵、鐵絡(luò)合化合物、幾基鐵化合物或鐵鹽，優(yōu)選鐵 鹽。鐵鹽優(yōu)選是氧化鐵，尤其是磁鐵礦。優(yōu)選的納米顆?？赏ㄟ^如上所述方法得到，優(yōu)選地 通過用氨氧化鋼使包含氯化鐵（III)和氯化鐵（II)混合物的溶液沉淀來提供氧化鐵納米 顆粒的懸液而得到。
[0化6] 在一個優(yōu)選實施方案中，包含本發(fā)明磁性燒氧基娃燒涂覆的金屬納米顆粒團聚體 的組合物的C電勢為25mV至80mV，優(yōu)選35mV至70mV，尤其是45mV至60mV。組合物的C 電勢如實施例4所描述在抑5. 2和導電率2. OmS / cmC各自在25°C下測定）下測定。C 電勢依賴于納米顆粒的成功涂覆，因為其依賴于燒氧基娃燒的氨基。較低的c電勢指示納 米顆粒的不充分涂覆。在所提供范圍內(nèi)的正確C電勢有助于納米顆粒在注射到組織中之 后的性質(zhì)，即所注射的納米顆粒停留在例如腫瘤中的注射位點處或注射位點附近，并且不 擴散到周圍組織，該將限制可施加的磁場并從而進行治療。此外，所提供范圍中的C電勢 確保了最佳的膠體穩(wěn)定性，并因此延長了納米顆粒組合物的貶藏壽命。
[0化7] 本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方案是包含磁性燒氧基娃燒涂覆的金屬納米顆粒團聚 體的組合物，其中所述團聚體懸于基于水的可生理接受的緩沖液中?？缮斫邮艿木彌_液 在本領(lǐng)域中是已知的并且包括例如己酸鹽、巧樣酸鹽、碳酸鹽或磯酸鹽，其抑(25°C下）為 5至8、優(yōu)選5至6并且尤其是5. 1至5.8,并且導電率（25°C下）為1.5至2. 5mS / cm、 優(yōu)選為1. 7至2. 3mS / cm。合適懸液的滲透壓為0. 01至0. 05化mol / kg、優(yōu)選0. 02至 0.04化mol / kg。該樣的懸液優(yōu)選備用用作用于全身治療的輸液或用于組織間質(zhì)或瘤內(nèi)施 用的注射液。
[0化引本發(fā)明組合物的如通過其金屬含量所測定的納米顆粒濃度優(yōu)選為至少約2M、優(yōu)選 至少約3M、更優(yōu)選至少約4M、更優(yōu)選至少約5M并且尤其是至少約6M。優(yōu)選地，納米顆粒濃 度為約8M W下，因為太高濃度對于某些應(yīng)用可導致注射期間由于分散體的高粘度而造成 的困難。關(guān)于鐵，2M等于112mg / ml?？赏ㄟ^光度測定某些金屬絡(luò)合物來測定金屬濃度， 例如，可如實施例2所描述在轉(zhuǎn)化為鐵（II)鄰二氮雜菲絡(luò)合物之后測定鐵。
[0化9] 出乎意料地發(fā)現(xiàn)，可使根據(jù)本發(fā)明的組合物中的納米顆粒濃縮至2M金屬含量及 W上的高濃度，而不損失其作為醫(yī)療裝置或藥劑的可用性。該些高度濃縮的懸液可仍然W 日常慣例灌輸或注射，并且重要的是可貶庫幾個月。在將懸液高壓滅菌之后，可觀察到一些 凝膠化，但是其可通過強烈禍旋（例如約12小時）逆轉(zhuǎn)。與具有較低金屬濃度的懸液相比， 該些懸液具有基于體積的較高SAR和高粘度。出乎意料地，本發(fā)明的納米顆粒顯示出，該種 納米顆粒在目的組織例如腫瘤中的貶庫形成取決于納米顆粒的濃度，即增加納米顆粒濃度 導致貶庫形成增加。該結(jié)果是不期望的，因為人們可合理地假設(shè)注射納米顆粒的濃度在組 織中快速平衡為不同濃度，使得不同濃度的相同納米顆粒沒有不同表現(xiàn)。
[0060] 如可由實施例9看到的，對于高度濃縮的組合物在腫瘤中可沉積更多的納米顆粒 (例如，在第0天，對于6M懸液為95%注射鐵，而對于2M懸液為90% )。該發(fā)現(xiàn)與W下結(jié) 果相一致：與2M懸液相比，對于6M懸液，在肺、肝和脾中發(fā)現(xiàn)了較少的鐵（例如，在第0天 為14%和3% )。因此，推斷出濃度越高，則越少的納米顆粒進入循環(huán)并且到達其他器官。
[0061] 此外，發(fā)現(xiàn)較高度濃縮的本發(fā)明納米顆粒在7天的時間范圍中完全保留在腫瘤中 (對于6M懸液在第0天為95%而在第7天為96% )，而對于較低濃縮的懸液在相同時間范 圍中可觀察到一些鐵含量的損失（對于2M懸液在第0天為90%而在第7天為86% )。該 發(fā)現(xiàn)是特別出乎意料的，因為人們預(yù)期納米顆粒在注射到腫瘤組織中之后快速稀釋并且在 較長時間段中不表現(xiàn)出不同的行為。
[0062] 如通過旋轉(zhuǎn)流變測定所測定的，本發(fā)明組合物優(yōu)選在100 / S剪切速率下的粘度 等于或大于〇.〇〇5Pa S，優(yōu)選等于或大于O.OlPa S，更優(yōu)選等于或大于0,1Pa S并且尤其是 等于或大于IPa S。例如，實施例8舉例說明了根據(jù)本發(fā)明的旋轉(zhuǎn)流變測定。根據(jù)本發(fā)明的 懸液的粘度隨著納米顆?；蜩F濃度增加而增加。
[0063] 在一個優(yōu)選實施方案中，如根據(jù)化rdan等（1993)所描述的方法在3. 5kA / m磁 場強度和100曲z頻率下所測定的，本發(fā)明組合物中納米顆粒的比吸收率（SAR)大于或等于 2W/g各金屬（例如，鐵），優(yōu)選大于或等于3W / g各金屬，并且尤其是4至50W / g各金屬。 一般地，因為最終在暴露于交變磁場期間可實現(xiàn)較高的溫度，所W高SAR值是優(yōu)選的。如果 納米顆粒的SAR值太低（即低于所提供數(shù)值），則可在暴露于交變磁場之后在整個腫瘤中實 現(xiàn)的溫度太低而不能達到治療效果。
[0064] 本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方案是根據(jù)本發(fā)明的組合物，其中將組合物注射到同基 因腫瘤模型中之后，在注射后第7天或7天之后，至少90%、優(yōu)選至少93%、更優(yōu)選至少 95%并且尤其是至少98%的所施用金屬停留在注射腫瘤中。根據(jù)本發(fā)明的同基因腫瘤模 型是其中用于誘導腫瘤的腫瘤細胞與宿主動物從基因方面匹配的腫瘤模型。例如，C3H RS1 乳腺癌細胞系用于在小鼠株C3H-HeN中生成腫瘤?？赏ㄟ^使用光譜儀（例如，通過Tecan Infinite M200光譜儀）測量金屬回收來測定腫瘤中剩余的金屬。
[00化]本發(fā)明的另一個實施方案是可通過本發(fā)明任一種方法得到的組合物。
[0066] 本發(fā)明的另一個方面是包括根據(jù)本發(fā)明的懸液或組合物的醫(yī)療裝置。因為磁性納 米顆粒在暴露于交變磁場之后通過生成熱作為物理作用方式發(fā)揮其治療作用并且不直接 與患者的代謝直接相互作用，所W該些納米顆粒被在多個管轄區(qū)中被歸類為醫(yī)療裝置。另 夕F，它們可被用作用于通過過熱療法和/或熱消融治療或預(yù)防腫瘤疾病和其他疾病的有力 工具，其中使細胞在身體的某些區(qū)域中功能失常。
[0067] 可根據(jù)本發(fā)明治療的該些其他疾病的實例是風濕病、關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)病和細菌感染。 可用根據(jù)本發(fā)明的納米顆粒治療的腫瘤疾病優(yōu)選是實體腫瘤，尤其是局部腫瘤或局部晚期 腫瘤或者可造成局部問題的全身腫瘤疾病例如不能動手術(shù)的轉(zhuǎn)移。實例是腦腫瘤，例如成 膠質(zhì)細胞瘤和星形細