)。定喘止咳糖衆(zhòng)（湖 北端正藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號121201、121202、121203)，鹽酸麻黃堿對照品（中國藥品生 物制品檢定所，批號171237-201208,供含量測定用）；鹽酸偽麻黃堿對照品（中國藥品生物 制品檢定所，批號171241-201007,供含量測定用），HPLC用水為雙蒸水（實驗室自制），甲 醇為色譜純，鹽酸（開封東大化工有限公司試劑廠）、乙醚（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、 甲醇（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）等均為分析純。
[0029] I. 1對照品溶液的制備
[0030] 取鹽酸麻黃堿對照品、鹽酸偽麻黃堿對照品適量，精密稱定，加流動相制成每ImL 各含20yg的混合溶液，即得鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿對照品溶液。
[0031] 1. 2對照品儲備液的制備
[0032] 精稱取鹽酸麻黃堿對照品3. 095mg至IOmL容量瓶，用流動相定容，得鹽酸麻黃堿 對照品儲備液；稱取鹽酸偽麻黃堿對照品3. 970mg至IOmL容量瓶，用流動相定容，得鹽酸偽 麻黃堿對照品儲備液。
[0033] 1. 3供試品溶液的制備
[0034] 供試品溶液的制備：精密量取定喘止咳糖漿5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇至刻 度，搖勻，用濾紙過濾，精密吸取續(xù)濾液2ml，置IOml容量瓶中，加入Iml稀鹽酸，加流動相至 l〇ml，搖勻，用0. 45ym濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。
[0035] 1. 4陰性對照溶液的制備
[0036] 現(xiàn)行定喘止咳糖漿現(xiàn)行制法（《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十三冊）：
[0037] 麻黃300g，杏仁400g，厚樸300g，陳皮300g，柴胡200g，紫蘇葉300g，甘草200g，以 上七味，麻黃、陳皮、厚樸、紫胡、紫蘇葉提取揮發(fā)油，藥渣與甘草、苦杏仁加水煎煮二次，第 一次2小時，第二次1小時，合并煎液，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 10~ 1. 22的清膏；另取鹿糖1333g制成糖衆(zhòng)，加入清膏，揮發(fā)油及防腐劑適量，約制成3000ml，即 得。
[0038] 按上述處方及工藝制成不含麻黃的陰性對照品，按1. 3項下的方法制成陰性對照 溶液。
[0039] 2.方法和結(jié)果
[0040] 2. 1色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗
[0041] MltimateXB-C18 柱（250mmX4.6mm，5ym);以甲醇一pH3.0 的 0.02mol/L磷酸 二氫鈉緩沖液（含〇? 4%的三乙胺）（4 :96)為流動相；流速：0? 9mL/min;柱溫：30°C;檢 測波長：210nm;分別取制備好的對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液進(jìn)樣，進(jìn)樣量都為 20yL，結(jié)果如圖1至3,其中圖1鹽酸麻黃堿保留時間在30. 617min，鹽酸偽麻黃堿保留時 間為35. 983min;與圖1對照品色譜峰保留時間相對應(yīng)，圖2中的鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃 堿色譜峰與其他雜質(zhì)峰完全分離，分離效果好，因此說明實驗所采用的色譜柱、流動相及配 比、保留時間的選擇恰當(dāng)，色譜條件良好；圖3中陰性對照溶液在與對照品溶液和供試品溶 液相同保留時間處未顯色譜峰，故認(rèn)為對測定無干擾。
[0042] 2. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0043] 將鹽酸麻黃堿對照品儲備液、鹽酸偽麻黃堿對照品儲備液分別稀釋為系列濃度， 精密吸取上述不同濃度的對照品溶液各20y1，注入高效液相色譜儀，照2. 1條件測定色譜 峰面積，結(jié)果見表1，以對照品溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖 4和圖5,結(jié)果表明鹽酸麻黃堿在1. 9344~30. 9500yg/mL線性關(guān)系良好，鹽酸偽麻黃堿在 2. 4813~39. 7000yg/mL線性關(guān)系良好。
[0044] 表1線性關(guān)系
[0045]
【主權(quán)項】
1. 測定定喘止咳糖漿中活性成分鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿含量的方法，其特征在 于，包括以下步驟： 步驟一：對照品溶液的制備：取鹽酸麻黃堿對照品、鹽酸偽麻黃堿對照品適量，精密稱 定，加流動相制成每ImL各含20yg的混合溶液，即得鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿對照品溶 液； 步驟二：供試品溶液的制備：精密量取定喘止咳糖漿5ml，置25ml容量瓶中，加甲醇至 刻度，搖勻，用濾紙過濾，精密吸取續(xù)濾液2ml，置IOml容量瓶中，加入Iml稀鹽酸，加流動相 至IOml，搖勻，用0. 45ym濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； 步驟三：用高效液相色譜測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，其中流動相流速 為0. 9mL/min，柱溫為30°C，檢測波長為210nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算不低于3000， 分別吸取對照品溶液與供試品溶液各20yL，注入液相色譜儀，測定，得供試品溶液每ImL 含鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的總量計，不少于〇. 50mg為合格； 其中流動相中各成分的體積比為：甲醇：pH3. 0的0. 02mol/L磷酸二氫鈉緩沖液溶液= 4 :96,所述磷酸二氫鈉緩沖液溶液含0. 4%的三乙胺。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定定喘止咳糖漿中活性成分鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃 堿含量的方法，其特征在于所述步驟三中，使用高效液相色譜測定時，所用色譜柱的柱高 250mm，內(nèi)徑4. 6mm，填充劑粒徑為5ym。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種測定定喘止咳糖漿中活性成分鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿含量的方法，它包括對照品溶液的制備步驟、供試品溶液的制備步驟和高效液相色譜測定步驟，確定產(chǎn)品每1mL含鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的總量計，不少于0.50mg為合格，本發(fā)明使用高效液相色譜法對控制定喘止咳糖漿產(chǎn)品質(zhì)量的鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿含量進(jìn)行測定，相比于現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)中無含量測定項的檢測，能直接通過檢測鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量來控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量，而且本測定方法中，鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿分離效果好，穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，這樣能更好地控制定喘止咳糖漿產(chǎn)品的質(zhì)量。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104764821
【申請?zhí)枴緾N201510161636
【發(fā)明人】余國斌
【申請人】湖北端正藥業(yè)股份有限公司
【公開日】2015年7月8日
【申請日】2015年4月7日