本發(fā)明涉及一種α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查方法,屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

鹽酸托烷司瓊是一種外周神經(jīng)元及中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-羥色胺3(5-ht3)受體的高效、高選擇性競爭拮抗劑，用于預(yù)防和治療癌癥化療引起的惡心和嘔吐。目前國內(nèi)上市的劑型有片劑，膠囊劑和注射劑。

托品醇是合成托烷司瓊的一個(gè)起始物料，其質(zhì)量控制中異構(gòu)體β-托品醇和有關(guān)物質(zhì)托品酮被作為重要控制對象，以保證鹽酸托烷司瓊的藥效。但是，托品醇及其類似物分子量小，堿性大，極性強(qiáng)，無紫外吸收，在氣相方法開發(fā)中以db-1對異構(gòu)體和主成分之間的分離度雖好，但峰面積和峰形重現(xiàn)性很差。薄層層析顯色劑廣泛，可以作為一種半定量測定手段，開發(fā)其對托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查有較好的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)不足，本發(fā)明要解決的問題是，開發(fā)一種α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查方法，以適當(dāng)濃度的加樣對照品作為測試溶液，以薄層色譜法進(jìn)行檢測，得到分離度符合要求的結(jié)果。

本發(fā)明涉及的一種α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查方法，包括以下步驟。

（1）供試品溶液配制：取α-托品醇適量，用二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成1mg/ml~2mg/ml的溶液，優(yōu)選2mg/ml。

（2）混合對照品溶液配制：取β-托品醇和托品酮適量，用二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成5μg/ml~10μg/ml的溶液，優(yōu)選β-托品醇和托品酮的濃度都為10μg/ml。

（3）展開：取上述供試品溶液和混合對照品溶液適量，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，在層析缸展開后，取出，冷風(fēng)吹干；展開劑比例為二氯甲烷:甲醇:水:有機(jī)胺=40~60:30~50:1~10:1~10，優(yōu)選展開比例為50~60:35~45:4~6:2~5。

（4）顯色：將碘鉍酸鉀試液均勻噴灑于薄層板上，冷風(fēng)吹干后，繼續(xù)均勻噴灑亞硝酸鈉試液；碘化鉍鉀試液配制方法：a液：取次硝酸鉍/堿式硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10ml與水40ml溶解，作為貯備液；b液：40%碘化鉀（新制）；用時(shí)，取a液與b液各5ml，加10%硫酸稀釋至50ml，即得；亞硝酸鈉試液配制方法：取亞硝酸鈉適量，用60%乙醇溶解并稀釋成10mg/ml的溶液。

（5）結(jié)果判斷：樣品中如顯示β-托品醇和托品酮對應(yīng)位置斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，不得更深。

供試品樣品上樣量需在20μg以下，優(yōu)選樣品濃度2mg/ml，上樣量10μl；展開在硅膠板上進(jìn)行，優(yōu)選高效硅膠薄層板；展開劑中需加入一定量的極性質(zhì)子性溶劑，對異構(gòu)體分離度才有影響，否則無區(qū)分效應(yīng)；但是，若展開劑中只有質(zhì)子性溶劑，異構(gòu)體被主點(diǎn)掩蓋，調(diào)節(jié)展開劑比例不能達(dá)到異構(gòu)體分離目的；加入適當(dāng)比例的水可以調(diào)節(jié)托品酮與β-托品醇之間的分離度；加入有機(jī)胺作為防拖尾試劑使雜質(zhì)斑點(diǎn)展開后成線狀，使雜質(zhì)斑點(diǎn)易于在較低濃度下被檢出。展開劑比例為二氯甲烷:甲醇:水:有機(jī)胺=40~60:30~50:1~10:1~10，優(yōu)選展開劑比例為50~60:35~45:4~6:2~5；有機(jī)胺為異丙胺、三乙胺、二乙胺等一種，優(yōu)選異丙胺；顯色劑為碘化鉍鉀試液和亞硝酸鈉試液，其中碘化鉍鉀試液優(yōu)選硫酸改良碘化鉍鉀試液，亞硝酸鈉試液優(yōu)選60%乙醇溶液作溶劑。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明通過對托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查tlc方法進(jìn)行摸索，可以有效的控制起始物料托品醇的質(zhì)量；本方法操作簡單，方便，快捷，不需要專用檢測儀器，為托品醇的快速檢測提供一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用的有效方法。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例1的α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查結(jié)果圖。

圖2是本發(fā)明實(shí)施例2的α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查結(jié)果圖。

圖3是本發(fā)明實(shí)施例3的α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體檢查結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

結(jié)合以下實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步描述。

實(shí)施例1

取α-托品醇適量，精密稱定，加二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成濃度為2mg/ml的溶液，作為供試品溶液。

取β-托品醇和托品酮適量，精密稱定，加二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成濃度都為10μg/ml的溶液，作為對照品溶液。

取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠hsgf254板上，用二氯甲烷:甲醇:水:異丙胺=55:40:5:3的展開劑展開，冷風(fēng)吹干。

顯色時(shí)先均勻噴灑硫酸改良碘化鉍鉀試液于薄層板上，冷風(fēng)吹干，繼續(xù)噴灑亞硝酸鈉試液；碘化鉍鉀試液配制方法：a液：取次硝酸鉍/堿式硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10ml與水40ml溶解，作為貯備液；b液：40%碘化鉀（新制）；使用時(shí)，取a液與b液各5ml，加10%硫酸稀釋至50ml，即得；亞硝酸鈉試液配制方法：取亞硝酸鈉適量，用60%乙醇溶解并稀釋成10mg/ml的溶液。

結(jié)果判斷：樣品中如顯示β-托品醇和托品酮對應(yīng)位置斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，不得更深。

α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體的檢查結(jié)果見圖1，檢視結(jié)果發(fā)現(xiàn)，供試品在rf值約0.78的位置有斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，沒有更深，表明托品酮?dú)埩袅坎坏眠^0.5%；在rf值約0.71的位置有斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，沒有更深，表明β-托品醇?xì)埩袅坎坏眠^0.5%。

實(shí)施例2

取α-托品醇適量，精密稱定，加二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成濃度為1mg/ml的溶液，作為供試品溶液。

取β-托品醇和托品酮適量，精密稱定，加二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成濃度都為5μg/ml的溶液，作為對照品溶液。

分別取上述供試品溶液和對照品溶液各5μl點(diǎn)于同一硅膠hsgf254板上，用二氯甲烷:甲醇:水:二乙胺=50:35:4:2的展開劑展開，冷風(fēng)吹干。

顯色時(shí)先均勻噴灑硫酸改良碘化鉍鉀試液于薄層板上，冷風(fēng)吹干，繼續(xù)噴灑亞硝酸鈉試液；碘化鉍鉀試液配制方法：a液：取次硝酸鉍/堿式硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10ml與水40ml溶解，作為貯備液；b液：40%碘化鉀（新制）；用時(shí)，取a液與b液各5ml，加10%硫酸稀釋至50ml，即得；亞硝酸鈉試液配制方法：取亞硝酸鈉適量，用60%乙醇溶解并稀釋成10mg/ml的溶液。

結(jié)果判斷：樣品中如顯示β-托品醇和托品酮對應(yīng)位置斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，不得更深。

α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體的檢查結(jié)果見圖2，檢視結(jié)果發(fā)現(xiàn)，供試品在rf值約0.78的位置有斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，沒有更深，表明托品酮?dú)埩袅坎坏眠^0.5%；在rf值約0.71的位置有斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，沒有更深，表明β-托品醇?xì)埩袅坎坏眠^0.5%。

實(shí)施例3

取α-托品醇適量，精密稱定，加二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成濃度為2mg/ml的溶液，作為供試品溶液。

取β-托品醇和托品酮適量，精密稱定，加二氯甲烷-甲醇（1:1）溶解并稀釋成濃度都為8μg/ml的溶液，作為對照品溶液。

分別取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl點(diǎn)于同一硅膠hsgf254板上，用二氯甲烷:甲醇:水:異丙胺=58:45:5:5的展開劑展開，冷風(fēng)吹干。

顯色時(shí)先均勻噴灑硫酸改良碘化鉍鉀試液于薄層板上，冷風(fēng)吹干，繼續(xù)噴灑亞硝酸鈉試液；碘化鉍鉀試液配制方法：a液：取次硝酸鉍/堿式硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10ml與水40ml溶解，作為貯備液；b液：40%碘化鉀（新制）；用時(shí)，取a液與b液各5ml，加10%硫酸稀釋至50ml，即得；亞硝酸鈉試液配制方法：取亞硝酸鈉適量，用60%乙醇溶解并稀釋成10mg/ml的溶液。

結(jié)果判斷：樣品中如顯示β-托品醇和托品酮對應(yīng)位置斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，不得更深。

α-托品醇有關(guān)物質(zhì)與異構(gòu)體的檢查結(jié)果見圖3，檢視結(jié)果發(fā)現(xiàn)，供試品在rf值約0.78的位置有斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，沒有更深，表明托品酮?dú)埩袅坎坏眠^0.5%；在rf值約0.71的位置有斑點(diǎn)，與對照品斑點(diǎn)顏色比較，沒有更深，表明β-托品醇?xì)埩袅坎坏眠^0.5%。