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一種單純皰疹病毒II型lgM抗體的免疫層析檢測(cè)試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):12454021閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種單純皰疹病毒II型lgM抗體的免疫層析檢測(cè)試劑盒,所述試劑盒由試劑條和塑料卡組裝而成,所述試劑條包括底板,所述底板上粘貼有帶有檢測(cè)線和質(zhì)控線的反應(yīng)膜,所述反應(yīng)膜靠近檢測(cè)線的一端依次疊加粘貼有膠體金墊、樣品墊,所述反應(yīng)膜靠近質(zhì)控線的一端疊加粘貼有吸收墊,所述反應(yīng)膜上檢測(cè)線包被了單純皰疹病毒II型抗原,所述反應(yīng)膜上質(zhì)控線包被了羊抗鼠IgG抗體,所述膠體金墊上包被了膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgM單克隆抗體,其特征在于:

所述反應(yīng)膜由以下方法制得:用緩沖液將單純皰疹病毒II型抗原稀釋至包被濃度為0.8~1.2mg/ml,將羊抗鼠IgG抗體稀釋至包被濃度為1.5~1.8mg/ml,在反應(yīng)膜上分別劃線單純皰疹病毒II型抗原檢測(cè)線和羊抗鼠IgG抗體質(zhì)控線,劃線后將反應(yīng)膜置于干燥間,溫度20~25℃,濕度小于30%,干燥4~5小時(shí);

所述膠體金墊由以下方法制得:以氯金酸-檸檬酸三鈉還原法制備直徑為20nm的膠體金溶液,制備完成后取100ml膠體金液放在燒杯內(nèi),用0.2M K2CO3調(diào)至pH8.0,按100ml膠體金溶液加入2.0mg鼠抗人IgM單克隆抗體,再緩慢添加0.2M K2CO3將膠體金溶液調(diào)至pH9.5,添加K2CO3的時(shí)間為5分鐘,然后室溫?cái)嚢?0分鐘,加入終濃度為10mg/ml牛血清白蛋白,1mg/ml聚乙烯吡咯烷酮封閉20~30分鐘,12000r/m離心30分鐘,棄上清,用緩沖液復(fù)溶至50ml,按1ml溶液鋪20cm2的比例均勻地鋪在玻璃纖維膜上,再置于干燥間,溫度20~25℃,濕度小于30%,干燥4~5小時(shí)。

2.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒II型lgM抗體的免疫層析檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述緩沖液由以下方法制得:稱取0.06g的NaH2PO4·2H2O和0.58g的Na2HPO4·12H2O,加純化水80.0mL,攪拌使充分溶解后加入0.80~0.90g的NaCl和0.5~2.0g烷基糖苷,充分混勻,定容至100ml,測(cè)定pH值為7.5~8.0。

3.如權(quán)利要求2所述單純皰疹病毒II型lgM抗體的免疫層析檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述烷基糖苷的碳鏈長(zhǎng)度為C8~C10。

4.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒II型lgM抗體的免疫層析檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述反應(yīng)膜為硝酸纖維素膜。

5.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒II型lgM抗體的免疫層析檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述樣品墊為玻璃纖維膜。

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