本發(fā)明屬于分析檢測
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及化妝品中糖皮質(zhì)激素的分析方法。技術(shù)背景糖皮質(zhì)激素，又名“腎上腺皮質(zhì)激素”，是由腎上腺皮質(zhì)分泌的一類甾體激素，也可由化學方法人工合成。臨床上糖皮質(zhì)激素作為抗感染藥物，可抑制纖維細胞增生，減少5-羥色胺形成，外用可降低毛細血管的通透性、減少滲出和細胞浸潤，具有抗炎、抗過敏、免疫抑制、抗增生等作用，因此在皮膚科疾病臨床上的應用非常廣泛。糖皮質(zhì)激素的使用必須遵循一定的原則，不能濫用。然而部分不法化妝品商家在化妝品中添加糖皮質(zhì)激素，短期內(nèi)使消費者的皮膚變得白皙、紅潤，達到快速吸引消費者、謀取暴利的目的。然而長期使用則會造成皮膚變薄、毛細管擴張、毛囊萎縮，導致出現(xiàn)干燥脫皮、紅血絲、色素沉著等現(xiàn)象，一旦停用后就會出現(xiàn)瘙癢、紅腫、丘疹等癥狀。輕度受害者只是肌膚問題恢復到使用前的狀態(tài)，中度受害者則出現(xiàn)激素依賴性皮炎，重度受害者則可能會產(chǎn)生眼部并發(fā)癥、類固醇性糖尿病、骨壞死和骨質(zhì)疏松、精神失常、消化性潰瘍等病癥。本發(fā)明中，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素是指以具有17個碳的環(huán)戊烷駢多氫菲基本母核結(jié)構(gòu)，具有C3的羰基、Δ4和17β酮醇側(cè)鏈以及17α-OH和11β-OH。在此結(jié)構(gòu)的基礎上，通過對C-1～2位、C-6位、C-9α位、C-11β位及C-21位等位置進行修飾而得到了種類繁多的糖皮質(zhì)激素藥物。因此這些化合物的結(jié)構(gòu)極為相似，使對多種糖皮質(zhì)激素的同時監(jiān)測、確定質(zhì)譜條件帶來了極大的挑戰(zhàn)。針對上述現(xiàn)象，本發(fā)明提供一種化妝品中糖皮質(zhì)激素的分析方法，更加涉及化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，包括以下步驟：(1)提供未經(jīng)處理的化妝品樣品；(2)提供固定相，采用柱色譜的方法進行環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分離。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素為氟輕松、地索奈德、環(huán)索奈德、鹵甲松、帕拉米松、帕拉米松乙酸酯、戊酸雙氟可龍、異氟潑尼松、去羥米松、鹵貝他索丙酸酯、氟尼縮松和/或依碳氯替潑諾中的一種或多種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素為鹵貝他索丙酸酯、戊酸雙氟可龍、地索奈德和/或帕拉米松乙酸酯中的一種或多種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述固定相的制備原料包含：硅膠(甲基)含氟丙烯酸酯(甲基)非含氟丙烯酸硅烷偶聯(lián)劑交聯(lián)劑引發(fā)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述固定相的制備原料還包含：3,4-乙烯二氧噻吩乙烯基咪唑苯乙烯膦酸辛烯基琥珀酸。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為(0.01-1)：5。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為(0.2-0.8)：5。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述硅烷偶聯(lián)劑選自含有碳碳雙鍵的硅烷偶聯(lián)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述交聯(lián)劑選自含有至少兩個碳碳雙鍵的交聯(lián)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述固定相的制備方法步驟為：(1)硅膠改性：將真空干燥過的硅膠和硅烷偶聯(lián)劑在無水甲苯中，氮氣保護下攪拌、回流反應18-36小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到改性后的硅膠；(2)固定相的合成：將上述制備得到的改性后的硅膠與剩余的反應原料和CAS號為1221908-84-4的式(1)物質(zhì)在溶劑中混合攪拌加熱，加入引發(fā)劑，氮氣保護，60℃下回流36-72小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到產(chǎn)物1，將產(chǎn)物1采用差分脈沖伏安法除去式(1)物質(zhì)，得到最終產(chǎn)物，式(1)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下：具體實施方式除非另有限定，本文使用的所有技術(shù)以及科學術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。當存在矛盾時，以本說明書中的定義為準。質(zhì)量、濃度、溫度、時間，或者其它值或參數(shù)以范圍、優(yōu)選范圍、或一系列上限優(yōu)選值和下限優(yōu)選值限定的范圍表示時，這應當被理解為具體公開了由任何范圍上限或優(yōu)選值與任何范圍下限或優(yōu)選值的任一配對所形成的所有范圍，而不論該范圍是否單獨公開了。例如，1-50的范圍應理解為包括選自1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50的任何數(shù)字、數(shù)字的組合、或子范圍、以及所有介于上述整數(shù)之間的小數(shù)值，例如，1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、和1.9。關(guān)于子范圍，具體考慮從范圍內(nèi)的任意端點開始延伸的“嵌套的子范圍”。例如，示例性范圍1-50的嵌套子范圍可以包括一個方向上的1-10、1-20、1-30和1-40，或在另一方向上的50-40、50-30、50-20和50-10。本發(fā)明的一方面提供一種化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，包括以下步驟：(1)提供未經(jīng)處理的化妝品樣品；(2)提供固定相，采用柱色譜的方法進行環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分離。環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素糖皮質(zhì)激素(Glucocorticoid)，又名“腎上腺皮質(zhì)激素”，是由腎上腺皮質(zhì)分泌的一類甾體激素，也可由化學方法人工合成。由于可用于一般的抗生素或消炎藥所不及的病癥，如SARS、敗血癥等，具有調(diào)節(jié)糖、脂肪、和蛋白質(zhì)的生物合成和代謝的作用。臨床上糖皮質(zhì)激素作為抗感染藥物，可抑制纖維細胞增生，減少5-羥色胺形成，外用可降低毛細血管的通透性、減少滲出和細胞浸潤，具有抗炎、抗過敏、免疫抑制、抗增生等作用，因此在皮膚科疾病臨床上的應用非常廣泛。糖皮質(zhì)激素的使用必須遵循一定的原則，不能濫用。然而部分不法化妝品商家在化妝品中添加糖皮質(zhì)激素，短期內(nèi)使消費者的皮膚變得白皙、紅潤，達到快速吸引消費者、謀取暴利的目的。然而長期使用則會造成皮膚變薄、毛細管擴張、毛囊萎縮，導致出現(xiàn)干燥脫皮、紅血絲、色素沉著等現(xiàn)象，一旦停用后就會出現(xiàn)瘙癢、紅腫、丘疹等癥狀。輕度受害者只是肌膚問題恢復到使用前的狀態(tài)，中度受害者則出現(xiàn)激素依賴性皮炎，重度受害者則可能會產(chǎn)生眼部并發(fā)癥、類固醇性糖尿病、骨壞死和骨質(zhì)疏松、精神失常、消化性潰瘍等病癥。糖皮質(zhì)激素具有17個碳的環(huán)戊烷駢多氫菲基本母核結(jié)構(gòu)，具有C3的羰基、Δ4和17β酮醇側(cè)鏈以及17α-OH和11β-OH。在此結(jié)構(gòu)的基礎上，通過對C-1～2位、C-6位、C-9α位、C-11β位及C-21位等位置進行修飾而得到了種類繁多的糖皮質(zhì)激素藥物。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素為氟輕松、地索奈德、環(huán)索奈德、鹵甲松、帕拉米松、帕拉米松乙酸酯、戊酸雙氟可龍、異氟潑尼松、去羥米松、鹵貝他索丙酸酯、氟尼縮松和依碳氯替潑諾中的一種或多種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素為鹵貝他索丙酸酯、戊酸雙氟可龍、地索奈德和帕拉米松乙酸酯中的一種或多種。氟輕松中文別名游離氟輕松，CAS號為67-73-2，分子式：C24H30F2O6，為外用皮質(zhì)激素，涂于皮膚患處，治療皮膚過敏而引起瘙癢，粘膜的炎癥，神經(jīng)性皮炎、接觸皮炎、日光性皮炎、牛皮癬等，特別適合用于嬰兒濕疹，且療效顯著，副作用少，奏效快，止癢效果好。地索奈德中文別名地索奈德、待索利德、羥潑尼縮松，英文名稱為Desonide，CAS號為638-94-8，分子式：C24H32O6。主要用于治療內(nèi)源性濕疹，總體療效顯著,且不良反應發(fā)生率低，是一種安全有效的外用皮質(zhì)類激素。環(huán)索奈德CAS號為126544-47-6，環(huán)索奈德是一種新型的吸入式糖皮質(zhì)激素類哮喘治療藥，屬于腎上腺皮質(zhì)激素類藥，同類藥物還包括二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸氟替卡松，本品以非活性形式給藥，被氣道的內(nèi)源性酯酶當場活化，達到目標器官肺時轉(zhuǎn)化成活性成分；一旦被活化，就表現(xiàn)出很高的局部抗炎活性，且局部及全身不良反應少。鹵甲松鹵甲松，CAS號為50629-82-8，化學式為C22H27ClF2O5，鹵米松的用途：1.局部用腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，有顯著且快速的抗炎、抗過敏、抗瘙癢、抗?jié)B出及抗增生的作用。2.適用于濕疹性皮膚病及各類輕度濕疹性和亞急性皮炎。帕拉米松帕拉米松，別名帕拉米松、Paramethasone，CAS號為53-33-8，化學式為C22H29FO5，主要用于嚴重的細菌感染和嚴重的過敏性疾病、各種血小板減少性紫癜、粒細胞減少癥、嚴重皮膚病、器官移植的免疫排斥反應、腫瘤的治療及對糖皮質(zhì)激素敏感的眼部炎癥等。帕拉米松乙酸酯中文別名：帕拉米松乙酸酯，帕拉米松醋酸酯；帕拉米松21-醋酸酯。CAS號為1597-82-6。戊酸雙氟可龍戊酸雙氟可龍，英文名稱Diflucortolonevalerate，化學式C27H36F2O5，CAS號為59198-70-8。異氟潑尼松異氟潑尼松，英文名稱：Isoflupredone，CAS號為338-95-4，化學式C21H27FO5。去羥米松去羥米松，別稱脫氧邁大松，去氧米松，去羥米松，分子式：C22H29FO4，英文名稱：Desoximetasone，CAS號382-67-2，可用做皮質(zhì)激素類藥物。鹵貝他索丙酸酯中文別名：鹵貝他索丙酸酯，英文名稱:HalobetasolPropionate，分子式是C25H31ClF2O5，用于緩解對皮質(zhì)激素敏感的皮膚炎性和瘙癢病癥。氟尼縮松中文同義詞：氟尼縮松；6-氟-11,16A,17,21-四羥基孕-1,4-二烯-3,20-二酮-16,17-安奈德，CAS號：3385-03-3，分子式是C24H31FO6。依碳氯替潑諾中文別名：氯替潑諾，英文名稱：LoteprednolEtabonate，CAS：82034-46-6，分子式：C24H31ClO7，為一種新型的糖皮質(zhì)激素類藥物。氯替潑諾眼用混懸液0.2％適用于季節(jié)性過敏性結(jié)膜炎的治療；0.5％適用于眼瞼和球結(jié)膜、角膜和眼球前部的甾體敏感的炎癥的治療，如：過敏性結(jié)膜炎、紅斑性角膜炎、淺層點狀角膜炎、帶狀皰疹性角膜炎、虹膜炎、睫狀體炎、選擇性感染性結(jié)膜炎。柱層析法柱層析法(chromatography)又稱柱色譜技術(shù)，主要原理是根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同，經(jīng)多次反復分配將組分分離開來。柱層析法中較關(guān)鍵的因素在于固定相和流動相。常見的固定相為硅膠固定相、多孔石墨炭固定相、有機聚合物固定相、金屬氧化物色譜固定相(氧化鋁、二氧化鈦、二氧化鋯、氧化鎂)等。硅膠由于具有機械強度高、比表面積大、孔徑結(jié)構(gòu)可進行較好調(diào)變、表面可根據(jù)不同分離目的采用各種有機官能團進行較好的改性等特點，是現(xiàn)今研究較為成熟的一種色譜固定相。和硅膠相比，由于多孔石墨炭是一種可獲得完全非極性的反相固定相，具有pH值適用范圍寬，對堿性化合物的分離無拖尾，對異構(gòu)體化合物的分離具有獨特選擇性等特點；當前，有機聚合物色譜固定相主要包括聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸、聚馬來酸、聚丙烯酸酯和聚乙烯醇等聚合物。其中，聚苯乙烯-二乙烯基苯由于具有良好的剛性、小而均勻的粒徑、適宜的孔徑大小和分布，因此應用最為廣泛；金屬氧化物由于具有較高的機械強度、熱穩(wěn)定性、獨特的分離選擇性、較高的柱效等特點，近年來引起了人們廣泛地關(guān)注。作為本發(fā)明的一種實施方式，本發(fā)明中所述固定相的制備原料包含：硅膠(甲基)含氟丙烯酸酯(甲基)非含氟丙烯酸硅烷偶聯(lián)劑乙烯基咪唑交聯(lián)劑引發(fā)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，按照重量份計，所述固定相的制備原料包含：作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，按照重量份計，所述固定相的制備原料包含：作為本發(fā)明的一種實施方式，所述固定相的制備原料還包含：3,4-乙烯二氧噻吩苯乙烯膦酸辛烯基琥珀酸。作為本發(fā)明的一種實施方式，按照重量份計，所述固定相的制備原料還包含：作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，按照重量份計，所述固定相的制備原料還包含：硅膠硅膠(Silicagel；Silica)別名：硅酸凝膠是一種高活性吸附材料，屬非晶態(tài)物質(zhì)，其化學分子式為mSiO2·nH2O；除強堿、氫氟酸外不與任何物質(zhì)發(fā)生反應，不溶于水和任何溶劑，無毒無味，化學性質(zhì)穩(wěn)定。各種型號的硅膠因其制造方法不同而形成不同的微孔結(jié)構(gòu)。硅膠的化學組份和物理結(jié)構(gòu)，決定了它具有許多其他同類材料難以取代得特點：吸附性能高、熱穩(wěn)定性好、化學性質(zhì)穩(wěn)定、有較高的機械強度等。硅膠根據(jù)其孔徑的大小分為：大孔硅膠、粗孔硅膠、B型硅膠、細孔硅膠等。在用于制作固定相的材料中，硅膠基質(zhì)色譜柱的柱效最高。因硅膠機械強度高，其填充床長時間在很高操作壓力下工作，柱效仍保持恒定；剛性、高強度的微粒還使柱的反壓較低，使用較長；其物理性質(zhì)如粒徑分布、孔結(jié)構(gòu)、比表面積易于控制，表面易改性，因此是最主要的固定相基質(zhì)。分離載體是實現(xiàn)分離分析過程的核心。硅膠基質(zhì)載體具有強度好，多孔結(jié)構(gòu)，比表面積易于人為控制，良好的物理化學穩(wěn)定性、生物相容性，具有足夠的具有反應活性的硅羥基等優(yōu)點，因而是各種分離載體的理想基質(zhì)材料，同時也是眾多復合材料分離介質(zhì)的重要組成部分?；诠枘z基質(zhì)的分離載體己經(jīng)被廣泛應用于催化、環(huán)境科學和色譜等領(lǐng)域，對其進行功能化修飾是至關(guān)重要的。眾多分離難題的解決都與硅膠基質(zhì)分離載體的功能化發(fā)展有著密不可分的聯(lián)系。硅膠的化學成分是二氧化硅，物理化學性質(zhì)極其穩(wěn)定。用作分離載體基質(zhì)的硅膠都是人工合成的。隨著合成方法的逐漸改進和對硅膠基本性質(zhì)研究的深入，目前所合成的硅膠具有機械強度高、比表面積大及表面易于修飾與控制的特點，其優(yōu)異的物理、化學和機械特性使其成為功能化分離載體的一種不可替代的基質(zhì)。硅膠顆?？梢苑譃榍蛐秃蜔o定型兩種。一般而言，球型硅膠由于其可滲透性強，比無定型硅膠更有利于傳質(zhì)，且可減小操作壓力，因而更適合用作高相液相色譜填料。較之硅膠顆粒的外形，粒徑分布顯得更為重要，因為它將直接影響硅膠基質(zhì)填充柱的壓力。在高效液相色譜中，色譜柱所用填料的粒徑分布對其柱效影響很大?？紤]到柱效的問題，硅膠顆粒的孔結(jié)構(gòu)是非常重要的參數(shù)。因為孔結(jié)構(gòu)不僅影響到孔徑的計算，而且影響到孔徑分布、孔容及表面積等重要參數(shù)，正是這些參數(shù)決定著其作為正、反相乃至其它高效液相色譜用填料的性能，且對其作為基質(zhì)進行化學鍵合反應以及分離過程與機理等均有不可忽視的影響。孔結(jié)構(gòu)有幾個重要表征參數(shù):平均孔徑，比表面積，比孔容和孔徑分布等。多孔硅膠可以分為微孔、中孔和大孔硅膠。一般將小于2nm的稱為微孔硅膠，對于大于2nm而小于50nm的稱為中孔硅膠，超過50nm的稱為大孔硅膠。作為一種優(yōu)選的技術(shù)方案，本發(fā)明選用的硅膠為中孔硅膠。此外，孔類型及分布亦是影響硅膠基質(zhì)分離載體的重要參數(shù)。以硅膠為基質(zhì)制備的液相色譜固定相具有機械強度高、化學性質(zhì)和熱穩(wěn)定性好等優(yōu)點，現(xiàn)己廣泛應用于化學、工業(yè)和催化等領(lǐng)域。其在化學方面主要應用于含量的測定和化合物的分離分析。硅膠表面含有豐富的硅輕基(Si-OH)，這些硅輕基是硅膠表而的主要吸附位點和最具反應活性的官能基團，是進行表而化學鍵合和改性的基礎。一般來說，可通過3種途徑對硅膠表而進行修飾，即涂層法、整體修飾和表面硅羥基的化學修飾。(甲基)含氟丙烯酸酯作為本發(fā)明的一種實施方式，本發(fā)明中所述(甲基)含氟丙烯酸酯單體選自甲基丙烯酸三氟甲酯、丙烯酸三氟甲酯、甲基丙烯酸三氟乙酯、丙烯酸三氟乙酯、甲基丙烯酸六氟丁酯、丙烯酸六氟丁酯、甲基丙烯酸八氟丙酯、丙烯酸八氟丙酯、甲基丙烯酸十二氟庚酯、丙烯酸十二氟庚酯、甲基丙烯酸十三氟辛酯、丙烯酸十三氟辛酯、甲基丙烯酸十七氟辛酯和丙烯酸十七氟辛酯中的一種或多種的組合。作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，所述含氟丙烯酸酯單體選自丙烯酸十三氟辛酯、丙烯酸十七氟辛酯、甲基丙烯酸十二氟庚酯和甲基丙烯酸三氟甲酯中的一種多種的組合。(甲基)非含氟丙烯酸作為本發(fā)明的一種實施方式，所述(甲基)非含氟丙烯酸優(yōu)選為直鏈丙烯酸。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述(甲基)非含氟丙烯酸選自丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸-4-羥丁酯、甲基丙烯酸-4-羥丁酯、丙烯酸-6-羥己酯、甲基丙烯酸-6-羥己酯、丙烯酸-8-羥辛酯、甲基丙烯酸-8-羥辛酯、丙烯酸-10-羥癸酯、甲基丙烯酸-10-羥癸酯、丙烯酸磺丙酯、甲基丙烯酸磺丙酯、丙烯酸二甲氨基乙酯和甲基丙烯酸二甲氨基乙酯中的一種或多種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述固定相制備原料還包含(甲基)非含氟丙烯酸酯單體，所述非含氟丙烯酸酯單體選自丙烯酸烷基酯、甲基丙烯酸烷基酯，具體可以列舉(甲基)丙烯酸甲酯、(甲基)丙烯酸乙酯、(甲基)丙烯酸丙酯、(甲基)丙烯酸異丙酯、(甲基)丙烯酸丁酯、(甲基)丙烯酸異丁酯、(甲基)丙烯酸仲丁酯、(甲基)丙烯酸叔丁酯、(甲基)丙烯酸戊酯、(甲基)丙烯酸異戊酯、(甲基)丙烯酸己酯、(甲基)丙烯酸庚酯、(甲基)丙烯酸辛酯、(甲基)丙烯酸-2-乙基己酯、(甲基)丙烯酸異辛酯、(甲基)丙烯酸壬酯、(甲基)丙烯酸異壬酯、(甲基)丙烯酸癸酯、(甲基)丙烯酸異癸酯、(甲基)丙烯酸十一烷基酯、(甲基)丙烯酸十二烷基酯、(甲基)丙烯酸十三烷基酯、(甲基)丙烯酸十四烷基酯、(甲基)丙烯酸十五烷基酯、(甲基)丙烯酸十六烷基酯、(甲基)丙烯酸十七烷基酯、(甲基)丙烯酸十八烷基酯、(甲基)丙烯酸十九烷基酯、(甲基)丙烯酸二十烷基酯等碳數(shù)1～20(C1-20)的烷基(甲基)丙烯酸酯等。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述(甲基)含氟丙烯酸酯的重量份為0.01-1份，所述(甲基)非含氟丙烯酸的重量份為4-6份；作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，所述(甲基)含氟丙烯酸酯的重量份為0.2-0.8份，所述(甲基)非含氟丙烯酸的重量份為5份。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為(0.01-1)：5；更加進一步的，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為(0.2-0.8)：5。硅烷偶聯(lián)劑硅烷偶聯(lián)劑是一類在分子中同時含有兩種不同化學性質(zhì)基團的有機硅化合物。本發(fā)明中，所述硅烷偶聯(lián)劑選自A-151、A-171、A-172、KH-540、KH-550、KH-551、KH-560、KH-570、KH-580、KH-602、KH-791、KH-901、KH-902中的一種或多種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述硅烷偶聯(lián)劑選自含有至少兩個甲氧基的硅烷偶聯(lián)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述硅烷偶聯(lián)劑選自含有雙鍵的硅烷偶聯(lián)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述硅烷偶聯(lián)劑選自乙烯基三甲氧基硅烷、甲基乙烯基二甲氧基硅烷、甲基苯基二甲氧基硅烷、乙烯基苯基二甲氧基硅烷、乙烯基苯基二甲氧基硅烷、丙基三甲氧基硅烷、乙烯基三(2-甲氧基乙氧基)硅烷、丁基三甲氧基硅烷、十二氟庚基丙基三甲氧基硅烷、二甲基二甲氧基硅烷、異丁基異丙基二甲氧基硅烷、3-(丙烯酰氧基)丙基二甲基甲氧基硅烷、3-甲氧基-2-(三甲基硅烷基)-吡啶、3-甲氧基-4-(三甲基硅烷基)-吡啶、甲基三甲氧基硅烷、叔丁基(乙基)二甲氧基硅烷、3-氨基丙基三甲氧基硅烷、十二烷基(甲基)二甲氧基硅烷、十六烷基三甲氧基硅烷、乙烯基甲氧基二甲基硅烷、甲基乙烯基二甲氧基硅烷、(乙烯基二甲氧基硅烷基)-苯、甲基乙烯基二甲氧基硅烷、乙烯基甲氧基二甲基硅烷、苯乙烯乙基三甲氧基硅烷、乙烯基三(2-甲氧基乙氧基)硅烷、巰丙基三甲氧基硅烷、巰基三甲基硅烷、巰基三甲氧基硅烷、二異丙烯氧基二甲基硅烷、3-(三甲基硅烷基)-4-戊烯酸、二甲氧基二乙烯基硅烷、四(丙-2-烯氧基)硅烷、四乙烯硅烷、二烯丙基二甲基硅烷中的一種。作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，所述硅烷偶聯(lián)劑選自甲基乙烯基二甲氧基硅烷、甲基苯基二甲氧基硅烷、乙烯基苯基二甲氧基硅烷、二甲基二甲氧基硅烷、3-甲氧基-2-(三甲基硅烷基)-吡啶、甲基三甲氧基硅烷、十二烷基(甲基)二甲氧基硅烷、十六烷基三甲氧基硅烷、甲基乙烯基二甲氧基硅烷、巰丙基三甲氧基硅烷、巰基三甲基硅烷、巰基三甲氧基硅烷中的一種。作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，所述硅烷偶聯(lián)劑選自二異丙烯氧基二甲基硅烷、二甲氧基二乙烯基硅烷、四(丙-2-烯氧基)硅烷、四(丙-2-烯氧基)硅烷、四乙烯硅烷、二烯丙基二甲基硅烷中的一種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述硅烷偶聯(lián)劑的重量份為1-10份；作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式，所述硅烷偶聯(lián)劑的重量份為2-8份。乙烯基咪唑為1-乙烯基咪唑，CAS號為1072-63-5。所述乙烯基咪唑的重量份為0.1-5份，更加優(yōu)選為0.1-3份。3,4-乙烯二氧噻吩的CAS號為126213-50-1。所述3,4-乙烯二氧噻吩的重量份為0.1-5份，更加優(yōu)選為0.1-3份。所述苯乙烯膦酸的重量份為0.01-5份，更加優(yōu)選為0.01-3份。辛烯基琥珀酸的CAS號為28805-58-5。所述辛烯基琥珀酸的重量份為3-8份，更加優(yōu)選為4份。交聯(lián)劑：交聯(lián)劑的作用是使得單體之間形成高度交聯(lián)、剛性的聚合物。本發(fā)明中，所述交聯(lián)劑選自含有乙烯基的交聯(lián)劑。同時，根據(jù)含有乙烯基的數(shù)目，可將它們分為二元交聯(lián)劑(如乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯)、三元交聯(lián)劑(三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、季戊四醇三丙烯酸酯)和四元交聯(lián)劑。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述交聯(lián)劑優(yōu)選三元交聯(lián)劑，例如三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、季戊四醇三丙烯酸酯。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述交聯(lián)劑的重量份為0.01-5份，更加進一步為0.01-3份。引發(fā)劑：在一些實施方式中，所述引發(fā)劑選自過氧化二酰、過氧化酯、過氧化酮、過氧化二烷烴、過氧化碳酸酯以及氫過氧化物中的至少一種。所述引發(fā)劑選自2，5-二甲基-2，5-雙(叔丁過氧基)己烷、2，5-二甲基-2，5-雙(叔丁過氧基)己炔-3、α，α-雙(叔丁過氧基)二異丙苯，1，4-雙(叔丁過氧基)二異丙苯、二叔丁基過氧化物、過氧化二異丙苯、過氧化苯甲酰、過氧化月桂酰、過氧化醋酸叔丁酯、叔丁基過氧化苯甲酸酯、過氧化(2-乙基己酸)叔丁酯、2，5-二甲基-2，5-雙(過氧化苯甲酰)己烷、1，1-雙(過氧化叔丁基)環(huán)己烷、1，1-雙(過氧化叔丁基)-3，3，5-三甲基環(huán)己烷、4，4-雙(過氧化叔丁基)戊酸正丁酯、過氧化二碳酸雙(4-叔丁基環(huán)己酯)、過氧化叔丁基碳酸異丙酯、二過氧化鄰苯二甲酸二叔丁酯、叔丁基過氧化氫、對烷基過氧化氫、2，2-雙(過氧化叔丁基)丁烷、過氧化甲乙酮、過氧環(huán)己酮、甲基異丁基酮過氧化物、過氧化丁二酸、2，2-雙(4，4-二叔丁過氧環(huán)己基)丙烷、過氧化月桂酸叔丁酯、過氧化硬脂酰、1，3-雙(2-叔丁過氧基異丙基)苯、過氧化對氯苯甲酰、過氧化2，4-二氯苯甲酰、叔丁基枯茗過氧化物、過氧化氫異丙苯中的一種。作為本發(fā)明的一種實施方式，所述引發(fā)劑的重量份為0.01-5份，更加優(yōu)選為0.01-3份。本發(fā)明中，所述固定相的制備方法如下：(1)硅膠改性：將真空干燥過的硅膠和硅烷偶聯(lián)劑在無水甲苯中，氮氣保護下攪拌、回流反應18-36小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到改性后的硅膠；(2)固定相的合成：將上述制備得到的改性后的硅膠與剩余的反應原料和CAS號為1221908-84-4的式(1)物質(zhì)在溶劑中混合攪拌加熱，加入引發(fā)劑，氮氣保護，60℃下回流36-72小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到產(chǎn)物1，將產(chǎn)物1采用差分脈沖伏安法除去式(1)物質(zhì)，得到最終產(chǎn)物，式(1)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下：發(fā)明人在完成本發(fā)明的過程中發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明可以很好的采用柱層次分離的方法分離化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素，并為后續(xù)的定性定量分析做好了前期的準備。同時，本發(fā)明所提供的化妝品無需經(jīng)過前期處理，可直接進行分析，并同時達到很好的分離效果。(甲基)含氟丙烯酸酯、(甲基)非含氟丙烯酸、3,4-乙烯二氧噻吩、乙烯基咪唑、苯乙烯膦酸和辛烯基琥珀酸按一定重量比制備得到的固定相，對化妝品中的環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素具有不同的分離效果，尤其對鹵貝他索丙酸酯、戊酸雙氟可龍、地索奈德和帕拉米松乙酸酯的分離效果特別明顯。實施方式1：本實施方式提供一種化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，包括以下步驟：(1)提供未經(jīng)處理的化妝品樣品；(2)提供固定相，采用柱色譜的方法進行環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分離。實施方式2：實施方式1所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素為氟輕松、地索奈德、環(huán)索奈德、鹵甲松、帕拉米松、帕拉米松乙酸酯、戊酸雙氟可龍、異氟潑尼松、去羥米松、鹵貝他索丙酸酯、氟尼縮松和/或依碳氯替潑諾中的一種或多種。實施方式3：實施方式1所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素為鹵貝他索丙酸酯、戊酸雙氟可龍、地索奈德和/或帕拉米松乙酸酯中的一種或多種。實施方式4：實施方式1所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述固定相的制備原料包含：硅膠(甲基)含氟丙烯酸酯(甲基)非含氟丙烯酸硅烷偶聯(lián)劑交聯(lián)劑引發(fā)劑。實施方式5：實施方式4所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述固定相的制備原料還包含：3,4-乙烯二氧噻吩乙烯基咪唑苯乙烯膦酸辛烯基琥珀酸。實施方式6：實施方式4所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為(0.01-1)：5。實施方式7：實施方式4所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為(0.2-0.8)：5。實施方式8：實施方式4所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述硅烷偶聯(lián)劑選自含有碳碳雙鍵的硅烷偶聯(lián)劑。實施方式9：實施方式4所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述交聯(lián)劑選自含有至少兩個碳碳雙鍵的交聯(lián)劑。實施方式10：實施方式1所述的化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，所述固定相的制備方法步驟為：(1)硅膠改性：將真空干燥過的硅膠和硅烷偶聯(lián)劑在無水甲苯中，氮氣保護下攪拌、回流反應18-36小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到改性后的硅膠；(2)固定相的合成：將上述制備得到的改性后的硅膠與剩余的反應原料和CAS號為1221908-84-4的式(1)物質(zhì)在溶劑中混合攪拌加熱，加入引發(fā)劑，氮氣保護，60℃下回流36-72小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到產(chǎn)物1，將產(chǎn)物1采用差分脈沖伏安法除去式(1)物質(zhì)，得到最終產(chǎn)物，式(1)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下：下面通過實施例對本發(fā)明進行具體描述。有必要在此指出的是，以下實施例只用于對本發(fā)明作進一步說明，不能理解為對本發(fā)明保護范圍的限制，該領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員根據(jù)上述本發(fā)明的內(nèi)容做出的一些非本質(zhì)的改進和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。另外，如果沒有其它說明，所用原料都是市售的，且以下物料所用份數(shù)均為重量份。實施例1：本實施例提供一種化妝品中環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分析方法，包括以下步驟：(1)提供未經(jīng)處理的化妝品樣品；(2)提供固定相，采用柱色譜的方法進行環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素的分離。所述固定相的制備原料為：所述硅膠的粒徑5um，孔徑孔容0.62cm3/g，比表面積270m2/g，蘭州化物所。所述(甲基)含氟丙烯酸酯為甲基丙烯酸三氟甲酯。所述(甲基)非含氟丙烯酸為丙烯酸-4-羥丁酯和丙烯酸-2-乙基己酯按照重量比為1：0.5的混合物。且所述(甲基)含氟丙烯酸酯和所述(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為0.5：5。所述硅烷偶聯(lián)劑為二甲氧基二乙烯基硅烷。所述交聯(lián)劑為三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯。所述引發(fā)劑為過氧環(huán)己酮。物質(zhì)均購買于上海國藥集團化學試劑有限公司。所述固定相的制備方法為：(1)硅膠改性：按照重量份比，將真空干燥過的硅膠和硅烷偶聯(lián)劑在50重量份的無水甲苯中，氮氣保護下攪拌、60℃下回流反應24小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到改性后的硅膠；(2)固定相的合成：將上述制備得到的改性后的硅膠與剩余的反應原料和5重量份的CAS號為1221908-84-4的式(1)物質(zhì)在80重量份的無水甲苯中混合攪拌加熱，加入引發(fā)劑，氮氣保護，60℃下回流48小時，冷卻，抽濾，洗滌，干燥，得到產(chǎn)物1，將產(chǎn)物1采用差分脈沖伏安法除去式(1)物質(zhì)，得到最終產(chǎn)物，式(1)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下：差分脈沖伏安法：以pH＝7.0的0.2M磷酸鹽緩沖液為支持電解質(zhì)。實施例2：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無乙烯基咪唑。實施例3：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無3,4-乙烯二氧噻吩。實施例4：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無苯乙烯膦酸。實施例5：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無辛烯基琥珀酸。實施例6：與實施例1的區(qū)別在于，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為2：5。實施例7：與實施例1的區(qū)別在于，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為0.1：5。實施例8：與實施例1的區(qū)別在于，所述(甲基)含氟丙烯酸酯和(甲基)非含氟丙烯酸的重量比為0.7：5。實施例9：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無(甲基)含氟丙烯酸酯。實施例10：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無(甲基)非含氟丙烯酸。實施例11：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備過程未加入式(1)物質(zhì)。實施例12：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無乙烯基咪唑和3,4-乙烯二氧噻吩。實施例13：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無苯乙烯膦酸和辛烯基琥珀酸。實施例14：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無乙烯基咪唑、苯乙烯膦酸和3,4-乙烯二氧噻吩。實施例15：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相的制備原料無乙烯基咪唑、苯乙烯膦酸、辛烯基琥珀酸和3,4-乙烯二氧噻吩。實施例16：與實施例1的區(qū)別在于，所述固定相為常規(guī)硅膠，為安捷倫的7890A。性能測試：色譜柱的填裝：制備的固定相采用勻漿法進行裝柱。以四氯化碳作為勻漿液，甲醇作為頂替液，裝柱壓力為45MPa。稱取3g固定相置于燒杯中，加入四氯化碳后超聲至顆粒在四氯化碳中均勻分布，然后將混合物倒入裝柱機勻漿罐中，擰緊上蓋，啟動泵并調(diào)節(jié)其頻率，使壓力迅速上升并維持在45MPa，35min后停泵，緩慢降壓至零，卸下色譜柱，此時固定相已裝入150×4.6mmi.d.清洗干凈的不銹鋼管柱中，用干凈光滑的刀片削平色譜柱管開口端填料，裝上篩板，擰緊柱接頭。標上裝柱是流動相方向、柱子名稱、柱尺寸和裝柱日期。在逐漸升高的流速下，將新裝色譜柱在色譜儀上用0.2-1mL/min的用甲醇沖洗一天后備用。色譜方法：Agilent1260高效液相色譜儀，使用固定相填裝的色譜柱，流動相為甲醇-水；樣品為流動相溶解并過0.45μm微孔濾膜，儲于冰箱中待用；流速為1mL/min；柱溫為30℃；檢測器為紫外檢測器；進樣量為20μL。分離化妝品中的環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素：以甲醇和水作為流動相，在C18色譜柱上對化妝品中的環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素進行了分離。流動相：甲醇/水＝35：65；流速：1mL/min；檢測波長：254nm；柱溫：30℃。待測樣品：選取娥佩蘭Naturie薏苡仁化妝水，在其中加入環(huán)戊烷駢多氫菲類糖皮質(zhì)激素：鹵貝他索丙酸酯、戊酸雙氟可龍、地索奈德和帕拉米松乙酸酯。實施例1的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.492帕拉米松乙酸酯1.356戊酸雙氟可龍9.472鹵貝他索丙酸酯16.823實施例2的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.526帕拉米松乙酸酯1.134戊酸雙氟可龍5.982鹵貝他索丙酸酯8.018實施例3的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.510帕拉米松乙酸酯1.204戊酸雙氟可龍6.718鹵貝他索丙酸酯8.915實施例4的測試結(jié)果：實施例5的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.510帕拉米松乙酸酯1.304戊酸雙氟可龍7.183鹵貝他索丙酸酯10.416實施例6的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.613帕拉米松乙酸酯0.853戊酸雙氟可龍8.163鹵貝他索丙酸酯8.453實施例7的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.613帕拉米松乙酸酯1.131戊酸雙氟可龍8.053鹵貝他索丙酸酯9.153實施例8的測試結(jié)果：實施例9的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.545帕拉米松乙酸酯1.115戊酸雙氟可龍2.982鹵貝他索丙酸酯3.154實施例10的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.546帕拉米松乙酸酯0.754戊酸雙氟可龍5.854鹵貝他索丙酸酯8.156實施例11的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.658帕拉米松乙酸酯0.715戊酸雙氟可龍0.758鹵貝他索丙酸酯0.803實施例12的測試結(jié)果：實施例13的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.681帕拉米松乙酸酯0.750戊酸雙氟可龍1.985鹵貝他索丙酸酯3.754實施例14的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.691帕拉米松乙酸酯0.996戊酸雙氟可龍1.316鹵貝他索丙酸酯1.758實施例15的測試結(jié)果：分析物質(zhì)色譜柱保留因子地索奈德0.655帕拉米松乙酸酯0.913戊酸雙氟可龍1.253鹵貝他索丙酸酯1.598實施例16的測試結(jié)果：前述的實例僅是說明性的，用于解釋本公開的特征的一些特征。所附的權(quán)利要求旨在要求可以設想的盡可能廣的范圍，且本文所呈現(xiàn)的實施例僅是根據(jù)所有可能的實施例的組合的選擇的實施方式的說明。因此，申請人的用意是所附的權(quán)利要求不被說明本發(fā)明的特征的示例的選擇限制。而且在科技上的進步將形成由于語言表達的不準確的原因而未被目前考慮的可能的等同物或子替換，且這些變化也應在可能的情況下被解釋為被所附的權(quán)利要求覆蓋。當前第1頁1 2 3