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肝素的定量檢測(cè)方法與流程

文檔序號(hào):11912892閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,包括:

1)以金電極作為工作電極,對(duì)金電極進(jìn)行預(yù)處理;

2)將多肽修飾于所述金電極表面;

3)將巰基己醇修飾于所述金電極表面,用于對(duì)未修飾上多肽的金電極表面進(jìn)行占位;

4)將所述金電極插入待測(cè)液中進(jìn)行反應(yīng),并采集相應(yīng)電化學(xué)阻抗譜,計(jì)算阻抗值;

5)根據(jù)阻抗值與肝素濃度的對(duì)應(yīng)關(guān)系,獲得待測(cè)液中肝素的濃度;

其中,所述多肽序列為CGSGRKRLQVQLSIRT。

2.如權(quán)利要求1所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,對(duì)金電極進(jìn)行預(yù)處理包括:

將金電極在修飾前浸泡于水虎魚洗液中,以除去電極表面吸附的雜質(zhì);其中,以體積比為計(jì),所述水虎魚洗液的組成為98%H2SO4∶30%H2O2=3∶1。

3.如權(quán)利要求2所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,對(duì)金電極進(jìn)行預(yù)處理還包括:將金電極用碳化硅砂紙打磨至呈鏡面光滑,隨后將金電極分別在乙醇和蒸餾水中超聲清洗。

4.如權(quán)利要求3所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,對(duì)金電極進(jìn)行預(yù)處理還包括:將金電極用0.5M H2SO4溶液清洗,隨后用氮?dú)飧稍镆源罄m(xù)的修飾。

5.如權(quán)利要求1所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,將多肽修飾于所述金電極表面具體包括:將經(jīng)預(yù)處理的金電極與100μM多肽溶液在常溫下反應(yīng)16小時(shí);其中,所述多肽溶液中包括有20mM的4-羥乙基哌嗪乙磺酸和10mM的三(2-羧乙基)膦。

6.如權(quán)利要求1所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,將巰基己醇修飾于所述金電極表面具體包括:將已修飾有多肽的金電極在1mM巰基己醇溶液中浸泡30分鐘,隨后用雙蒸水徹底沖洗并在氮?dú)饬髦懈稍锎谩?/p>

7.如權(quán)利要求1所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,所述交流阻抗電化學(xué)法采用三電極系統(tǒng),其中,工作電極為金電極,對(duì)電極為鉑電極,參比電極為飽和甘汞電極;交流阻抗所用緩沖液為含有KCl、[Fe(CN)6]3-和[Fe(CN)6]4-的水溶液。

8.如權(quán)利要求7所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,所述KCl的濃度為1M。

9.如權(quán)利要求7所述的肝素的定量檢測(cè)方法,其特征在于,所述[Fe(CN)6]3-和[Fe(CN)6]4-的濃度之和為5mM。

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