本發(fā)明屬于生物技術領域，尤其涉及一種鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法。

背景技術：

選育抗病品種是防治病毒病最經(jīng)濟有效的方法，但常規(guī)育種不能夠很快、有效的育出抗病品種，盲目的使用親本材料，浪費科研單位大量的財力、物力，最后效果也不是很理想，為了使傳統(tǒng)育種和分子生物學育種有效的結(jié)合，育出優(yōu)良的品種組合，田間觀察材料的抗病性和隱性抗病性成為育種不可缺少的步驟。

綜上所述，常規(guī)育種不能夠很快、有效的育出抗病品種，盲目的使用親本材料，浪費科研單位大量的財力、物力，最后效果也不是很理想。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法，旨在解決常規(guī)育種不能夠很快、有效的育出抗病品種，盲目的使用親本材料，浪費科研單位大量的財力、物力，最后效果也不是很理想的問題。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，一種鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法，所述鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法利用手撕番茄葉片和組織培養(yǎng)根系，電鏡觀察葉片表面結(jié)構和根系根毛；在植株生長中期，采集正常葉片嫩葉，進行手撕，觀察葉片表皮細胞、葉片厚度、絨毛、氣孔；利用100％的酒精浸泡通草，葉片加在通草中間，使用2個刀片進行切割，選取兩個刀片之間的葉片進行電鏡觀察；對種子進行消毒，進行培養(yǎng)基發(fā)芽試驗，在生長過程中進行不同階段的電鏡觀察，觀察根系根毛的數(shù)量。

進一步，所述鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法中：

抗病毒病的番茄品種的葉片比感病番茄的葉片厚；

抗病毒病的番茄品種的氣孔數(shù)比感病番茄品種的氣孔數(shù)少；

抗病毒病的番茄品種的絨毛比感病番茄品種的絨毛多，且絨毛有的會有2-3個分叉；

抗病毒病的番茄品種的細胞比感病番茄排列整齊，通過對感病植株葉片和正常植株葉片的觀察，抗病植株葉片的表皮細胞比感病植株的表皮細胞排列整齊，且感病植株的表皮細胞會變大、長、不規(guī)則；

從根系上觀察，抗病品種的根系根毛比感病品種的根系根毛多，發(fā)育繁盛，試驗表明，根系根毛發(fā)育強盛，其植株生長較壯，抗病性要強。

進一步，所述鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法包括以下步驟：

(1)采集葉片正常植株嫩葉，手撕葉片，在載片上滴一滴蒸餾水，將葉片表皮平展在載片上，壓制，進行電鏡觀察不同抗病性品種之間結(jié)構差異；

(2)將通草利用100％的酒精進行浸泡，將葉片加在通草中間，利用2個刀片對通草進行切割，取中間材料，在載片上滴一滴蒸餾水，將葉片表皮平展在載片上，壓制，進行電鏡觀察不同抗病性品種之間結(jié)構差異；

(3)利用培養(yǎng)皿將已消毒的種子進行發(fā)芽試驗，通過電鏡觀察不同抗病性的根系根毛的差異，進行絨毛、葉片厚度、氣孔、細胞排列、根系根毛等的觀察測定；

(4)將番茄種子進行基質(zhì)栽培和培養(yǎng)皿栽培，重復上述步驟，將所得數(shù)據(jù)結(jié)果與感病品種進行比較，綜合評價抗病性。

本發(fā)明提供的鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法，可通過觀察葉片表皮細胞結(jié)構、絨毛和氣孔數(shù)量、根系根毛的多少、葉片的厚度多為判斷是否抗病的一個重要依據(jù)；對番茄田間抗病性育種提供重要依據(jù)，效果直觀、簡單，且投資和成本低；抗病品種的絨毛比感病品種的絨毛少；抗病品種的氣孔數(shù)比感病品種的多，根系壯；抗病植株比感病植株葉片細胞變化較小。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實施例提供的鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法流程圖。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的應用原理作詳細的描述。

如圖1所示，本發(fā)明實施例提供的鑒定葉片結(jié)構和根系根毛是否抗病毒病的方法包括以下步驟：

S101：采集葉片正常植株嫩葉，手撕葉片，在載片上滴一滴蒸餾水，將葉片表皮平展在載片上，壓制，進行電鏡觀察不同抗病性品種之間結(jié)構差異；

S102：將通草利用100％的酒精進行浸泡，將葉片加在通草中間，利用2個刀片對通草進行切割，取中間材料，在載片上滴一滴蒸餾水，將葉片表皮平展在載片上，壓制，進行電鏡觀察不同抗病性品種之間結(jié)構差異；

S103：利用培養(yǎng)皿將已消毒的種子進行發(fā)芽試驗，通過電鏡觀察不同抗病性的根系根毛的差異，進行絨毛、葉片厚度、氣孔、細胞排列、根系根毛等的觀察測定；

S104：將番茄種子進行基質(zhì)栽培和培養(yǎng)皿栽培，重復上述步驟，將所得數(shù)據(jù)結(jié)果與感病品種進行比較，綜合評價抗病性。

本發(fā)明涉及利用手撕番茄葉片和組織培養(yǎng)根系，電鏡觀察葉片表面結(jié)構和根系根毛的技術方法；通過對番茄正常葉片和感病葉片厚度、絨毛、氣孔、細胞及根系根毛的觀察，在生長過程中，從正常植株到感病植株一系列的生理參數(shù)將發(fā)生顯著的變化，同時也觀察正常植株和感病植株的顯著變化和差異。其具體實施過程為:將種子消毒，進行發(fā)芽播種，期間田間管理不噴施任何有關病毒病之類的農(nóng)藥，可噴施灰斑病、晚疫病、早疫病等病害的農(nóng)藥，同時也不噴施殺蟲農(nóng)藥。在植株生長中期，1)采集正常葉片嫩葉，進行手撕，觀察葉片表皮細胞、葉片厚度、絨毛、氣孔。2)利用100％的酒精浸泡通草，葉片加在通草中間，使用2個刀片進行切割，選取兩個刀片之間的葉片進行電鏡觀察。3)對種子進行消毒，進行培養(yǎng)基發(fā)芽試驗，在生長過程中進行不同階段的電鏡觀察，觀察根系根毛的數(shù)量。通過三個方面可有效的反映出以下結(jié)果：(1)抗病毒病的番茄品種的葉片比感病番茄的葉片厚。(2)抗病毒病的番茄品種的氣孔數(shù)比感病番茄品種的氣孔數(shù)少。(3)抗病毒病的番茄品種的絨毛比感病番茄品種的絨毛多，且絨毛有的會有2-3個分叉。(4)抗病毒病的番茄品種的細胞比感病番茄排列整齊，通過對感病植株葉片和正常植株葉片的觀察，抗病植株葉片的表皮細胞比感病植株的表皮細胞排列整齊，且感病植株的表皮細胞會變大、長、不規(guī)則。(5)從根系上觀察，抗病品種的根系根毛比感病品種的根系根毛多，發(fā)育繁盛，試驗表明，根系根毛發(fā)育強盛，其植株生長較壯，抗病性要強。利用該方法，可通過觀察葉片表皮細胞結(jié)構、絨毛和氣孔數(shù)量、根系根毛的多少、葉片的厚度可以多為判斷是否抗病的一個重要依據(jù)。

本發(fā)明對番茄田間抗病性育種提供重要依據(jù)，優(yōu)點是效果直觀、簡單，且投資和成本低。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。