1.一種面粉中偶氮甲酰胺的比色檢測方法,其特征在于:具體步驟如下:
(1)樣品前處理:稱取0.1g面粉于50 mL離心管中,加入10mL丙酮,搖床30oC,200rpm振揺20分鐘,然后超聲15分鐘,離心,取上清液5 mL,40 oC氮吹近干后加入H2O定容成5 mL,用0.45μm濾膜將溶液進(jìn)行過濾,在濾液中加入三價砷溶液,振揺20 min;
(2)制備樣品檢測液:在1.5 mL 的離心管中,加入100μL 15μM的谷胱甘肽溶液,然后加入100μL步驟(1)樣品溶液,混合均勻,置于50 oC恒溫振蕩器振蕩1 小時;接著加入100μL 濃度為20 mmol/L 的Britton-Robison緩沖溶液,混合均勻;最后,加入300μL納米金溶液,40分鐘后通過目視觀測溶液顏色,同時,用紫外-可見分光光度計在400-800 nm范圍內(nèi)掃描溶液的吸光度;
(3)建立定性和定量分析模型:取8個1.5 mL 的離心管中,分別加入100μL 15μM的谷胱甘肽溶液,然后分別加入100μL不同濃度的偶氮甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液,混合均勻,置于50 oC恒溫振蕩器振蕩1 小時;接著分別加入100μL 濃度為20 mmol/L 的Britton-Robison緩沖溶液,混合均勻;最后,分別加入300μL納米金溶液,40分鐘后目視觀測不同濃度的偶氮甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的顏色,同時用紫外-可見分光光度計在400-800 nm范圍內(nèi)掃描溶液的吸光度,計算溶液在520nm和668nm處吸光度的比值(A520/A668),以濃度為橫坐標(biāo),A520/A668做出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線;
(4)進(jìn)行定性和定量分析:通過目視觀測溶液顏色,對比不同濃度偶氮甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的顏色,目視檢測步驟(2)樣品溶液中偶氮甲酰胺的含量;同時,利用步驟(2)的樣品溶液在520nm和668nm處吸光度的比值(A520/A668),對照標(biāo)準(zhǔn)工作曲線求出溶液中偶氮甲酰胺的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種面粉中偶氮甲酰胺的比色檢測方法,其特征在于:
步驟(1)中的離心速度3000 rpm,離心5 min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種面粉中偶氮甲酰胺的比色檢測方法,其特征在于:步驟(1)中濾液中加入的三價砷的終濃度為5ppm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種面粉中偶氮甲酰胺的比色檢測方法,其特征在于:
步驟(2)中Britton-Robison緩沖溶液的pH=2.9。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種面粉中偶氮甲酰胺的比色檢測方法,其特征在于:
步驟(2)和步驟(3)所述的納米金溶液為:以檸檬酸為穩(wěn)定劑的納米金溶液,納米金粒徑為15-20nm。