本發(fā)明涉及一種膠體金檢測試劑板，具體是一種檢測土豆中龍葵堿的試紙板。

背景技術：

土豆又名馬鈴薯、洋芋，是繼水稻、小麥、玉米的第四大糧食作物。由于馬鈴薯植株和塊莖中普遍含有一類甾體糖苷生物堿,稱為茄堿，又叫龍葵堿（目前已知的龍葵堿有α、β、γ-茄堿或α、β、γ-卡茄堿）具有一定毒性，在馬鈴薯食用過程中存在一定安全隱患。馬鈴薯在儲存過程中，很容易變綠發(fā)芽，綠皮與芽中龍葵素含量會迅速上升，過多攝入（發(fā)綠馬鈴薯30g左右）會引起舌頭發(fā)麻、惡心嘔吐、腹瀉、頭痛、暈眩等不良反應，甚至導致中毒者抽搐、昏迷、呼吸中樞麻痹而死亡。英國就曾經(jīng)發(fā)生過78個學生因為食用龍葵堿含量過高的土豆而中毒的事件。口服時大鼠的半數(shù)致死量為每千克體重590毫克。砒霜的大鼠口服實驗的半數(shù)致死量是每公斤體重15毫克。龍葵堿讓人體產(chǎn)生中毒癥狀的劑量比動物毒理實驗得出的數(shù)據(jù)還要低得多。有病例分析認為，人體對糖苷生物堿的中毒劑量可以低到每千克體重2～5毫克，而每千克體重3～6毫克的劑量就可能致命。需要注意的是，這個糖苷生物堿很難通過烹飪破壞。以龍葵堿為例，冷凍、干燥、微波加熱、蒸煮等對它的破壞都很有限，甚至沒有影響。要170℃以上的深度油炸處理才能顯著降低其含量。

目前，對土豆中龍葵堿中毒尚無特效藥治療，龍葵堿對胃腸道黏膜有較強的刺激性和腐蝕性，對中樞神經(jīng)有麻痹作用，尤其對呼吸和運動中樞作用顯著；對紅細胞有溶血作用，可引起急性腦水腫、胃腸炎等；中毒的主要癥狀為胃痛加劇，惡心、嘔吐，呼吸困難、急促，伴隨全身虛弱和衰竭，嚴重者可導致死亡；龍葵堿主要是通過抑制膽堿酯酶的活性造成乙酰膽堿不能被清除而引起中毒的；為了控制龍葵堿對人和動物產(chǎn)生的危害，必須對土豆中龍葵堿含量進行檢測，確定是否含有龍葵堿。目前，比較常用的龍葵堿檢測方法有薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法-質(zhì)譜法(GC-MS)、生物檢測法和免疫學檢測法等。薄層色譜分析法是較早用于龍葵堿檢測的一種方法，操作人員無需經(jīng)過專門培訓，且成本低，無需價格昂貴的儀器。但此方法所需試劑繁多，檢測周期長，靈敏度不高等，已遠不能滿足現(xiàn)代檢測要求。高效液相色譜法、氣相色譜法-質(zhì)譜法等儀器分析方法具有準確度高、靈敏性強、可微量測定等優(yōu)點，且氣相色譜法-質(zhì)譜法可同時檢測不同的龍葵堿，適合于土豆中龍葵堿的定量分析。但設備昂貴、對樣品中龍葵堿純度的要求較高，導致檢測成本高、周期長，無法滿足大批量樣品快速篩選的需要，所以使用受到限制。微生物檢測法雖然待檢樣品不需很純，但方法專一性差，靈敏度低，主要用于定性，一般只作為化學分析法的佐證。

ELISA法是免疫學檢測方法之一，具有特異、快速、靈敏度高和成本低的特點，適用于基層機構(gòu)大量樣品的篩選和普查。但此方法需接觸龍葵堿標準品，不利于保護操作者的健康，且酶的活性易受溫度影響，因此試劑需要低溫保藏、壽命短，并易造成測定結(jié)果重復性較差。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種靈敏度高、操作簡單的檢測土豆中龍葵堿的試紙板，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：

一種檢測土豆中龍葵堿的試紙板，包括基板、襯板、保護膜，所述襯板上依次附著金標墊、吸水墊、樣品墊、醋酸纖維素膜，所述金標墊、吸水墊、樣品墊、醋酸纖維素膜的相鄰各部分之間有0.5-0.8mm的重疊，所述金標墊中設有與膠體金偶聯(lián)的單克隆抗體，所述醋酸纖維素膜上設有檢測線、質(zhì)控線、假陽性標線，所述樣品墊上設置過濾膜層。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述基板采用有機玻璃制成。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述基板、襯板和保護膜為壓制的整體式結(jié)構(gòu)。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述單克隆抗體為龍葵堿單克隆抗體。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述金標墊、吸水墊和樣品墊采用聚酯樹脂制成。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述檢測線包被龍葵堿-BSA特異性結(jié)合抗原，所述質(zhì)控線包被兔抗鼠多克隆抗體，所述假陽性標線包被脫脂奶粉封閉的龍葵堿單克隆抗體。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述醋酸纖維素膜的厚度為0.2-0.4mm。

作為本發(fā)明進一步的方案：通過以下步驟制備：

1）制備噴涂有單克隆抗體的金標墊；

2）制備具有包被龍葵堿-BSA特異性結(jié)合抗原的檢測線、包被兔抗鼠多克隆抗體的質(zhì)控線及包被脫脂奶粉封閉的龍葵堿單克隆抗體的假陽性標線的醋酸纖維素膜；

3）將制備好的金標墊、醋酸纖維素膜與樣品墊、吸水墊、基板、襯板和保護膜組裝成試紙板。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明的試紙板具有靈敏度高、特異性強、成本低、操作簡單、檢測時間短、適合各種單位使用、儲存簡單、保質(zhì)期長的優(yōu)點，操作簡單、快速、安全，將反應所需的大部分原料整合到PVC背襯中，滴樣后，抗原抗體反應在固相膜上快速進行，大大縮短檢樣時間，且樣品無需特殊處理，成本低，易推廣，生產(chǎn)成本低廉，投資少，收效快。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖中：1-襯板、2-金標墊、3-吸水墊、4-樣品墊、5-醋酸纖維素膜、6-檢測線、7-質(zhì)控線、8-假陽性標線。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本專利的技術方案作進一步詳細地說明。

請參閱圖1，一種檢測土豆中龍葵堿的試紙板，包括基板、襯板1、保護膜，所述襯板1上依次附著金標墊2、吸水墊3、樣品墊4、醋酸纖維素膜5，所述金標墊2、吸水墊3、樣品墊4、醋酸纖維素膜5的相鄰各部分之間有0.5-0.8mm的重疊，所述金標墊2中設有與膠體金偶聯(lián)的單克隆抗體，所述醋酸纖維素膜5上設有檢測線6、質(zhì)控線7、假陽性標線8，所述樣品墊4上設置過濾膜層；所述基板采用有機玻璃制成；所述基板、襯板1和保護膜為壓制的整體式結(jié)構(gòu)；所述單克隆抗體為龍葵堿單克隆抗體；所述金標墊2、吸水墊3和樣品墊4采用聚酯樹脂制成；所述檢測線6包被龍葵堿-BSA特異性結(jié)合抗原，所述質(zhì)控線7包被兔抗鼠多克隆抗體，所述假陽性標線8包被脫脂奶粉封閉的龍葵堿單克隆抗體；所述醋酸纖維素膜5的厚度為0.2-0.4mm；通過以下步驟制備：

1）制備噴涂有單克隆抗體的金標墊2；

2）制備具有包被龍葵堿-BSA特異性結(jié)合抗原的檢測線6、包被兔抗鼠多克隆抗體的質(zhì)控線7及包被脫脂奶粉封閉的龍葵堿單克隆抗體的假陽性標線8的醋酸纖維素膜5；

3）將制備好的金標墊2、醋酸纖維素膜5與樣品墊4、吸水墊3、基板、襯板1和保護膜組裝成試紙板。

本發(fā)明中試紙板的組裝：

將醋酸纖維素膜5、金標墊2、樣品墊4、吸水墊3依次按順序粘貼在襯板1上；金標墊從起始端有1/2區(qū)域被樣品墊1覆蓋，金標墊2的末端與醋酸纖維素膜5的始端連接，醋酸纖維素膜5的末端與吸水墊3的始端相連；所述醋酸纖維素膜5上有檢測線6和質(zhì)控線7及假陽性標線8，檢測線6和質(zhì)控線7均為與所述試紙板垂直的條狀帶，假陽性標線8為與所述試紙板相交的橢圓條狀帶；檢測線6位于靠近吸水墊3的起始端的一側(cè)；質(zhì)控線7位于靠近金標墊2的末端的一側(cè)；將試紙板用機器切成6mm寬的小條，使用保護膜進行包覆，4～30℃條件下可保存24個月。

本發(fā)明的試紙板具有靈敏度高、特異性強、成本低、操作簡單、檢測時間短、適合各種單位使用、儲存簡單、保質(zhì)期長的優(yōu)點，操作簡單、快速、安全， 將反應所需的大部分原料整合到PVC背襯中，滴樣后，抗原抗體反應在固相膜上快速進行，大大縮短檢樣時間，且樣品無需特殊處理，成本低，易推廣，生產(chǎn)成本低廉，投資少，收效快。

上面對本專利的較佳實施方式作了詳細說明，但是本專利并不限于上述實施方式，在本領域的普通技術人員所具備的知識范圍內(nèi)，還可以在不脫離本專利宗旨的前提下作出各種變化。