本發(fā)明涉及一種果膠中甲氧基含量的測定方法，具體說是一種利用相轉(zhuǎn)化技術(shù)結(jié)合頂空氣相色譜法測定果膠中甲氧基的含量，屬于分析檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

果膠是由植物果實中提取的天然添加劑，是一種以半乳糖醛酸為基本單位的多聚高分子化合物，分子量約為1000～40000。果膠存在于一切綠色植物組織之中，具有良好的膠凝化和乳化穩(wěn)定作用，廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)，化妝品和醫(yī)藥中。果膠作為食品的凝膠劑、乳化劑與穩(wěn)定劑，主要取決于分子結(jié)構(gòu)中多聚半乳糖醛酸與甲氧基的含量。果膠中甲氧基的絕對理論值16.3％。因此，甲氧基的含量也是衡量果膠溶液及其凝膠特性的一個極為重要的參數(shù)。為鑒別與了解果膠的特性，必需精確的分析果膠中甲氧基的含量。

傳統(tǒng)測定果膠甲氧基的方法有容量法(滴定法)和分光光度法(比色法)。容量法是先將少量乙醇潤濕后的果膠溶于不含二氧化碳的水中，滴加數(shù)滴酚酞，用濃氫氧化鈉滴定后得到初始滴定值。然后用定量的濃氫氧化鈉與果膠發(fā)生皂化反應(yīng)，放置一定時間后，加入與氫氧化鈉等量的鹽酸，劇烈震搖直至粉紅色消失。最后用氫氧化鈉滴定，得到終點滴定值。雖然容量法廣泛用于實驗室和工業(yè)，但是也存在操作繁瑣，誤差較大的缺點。比色法是將果膠脫甲酯后生成甲醇，加氧化劑反應(yīng)得到甲醛，由于甲醛與許多物質(zhì)能反應(yīng)顯色，且其吸光度與甲醛的含量成正比，故可以測定果膠甲氧基的含量。比色法由于需添加特殊試劑且測定結(jié)果不穩(wěn)定、重復(fù)性差，現(xiàn)在很少使用。因此建立一種操作簡便、成本低、快速、準(zhǔn)確測定果膠中甲氧基含量的方法具有現(xiàn)實意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種測定果膠中甲氧基含量的方法，克服目前分析果膠中甲氧基含量的方法所存在的弊端。根據(jù)該方法可以實現(xiàn)快速、準(zhǔn)確檢測，操作簡單且易掌握，其分析結(jié)果準(zhǔn)確度高。本發(fā)明的目的通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)。

一種測定果膠中甲氧基含量的方法，包括如下步驟：

(1)甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：量取適量的甲醇(氣相色譜標(biāo)準(zhǔn)品)于容量瓶中，加蒸餾水定容至容量瓶刻度得到甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液；

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：依次往不同的已密封的頂空樣品瓶中加入不同量的步驟(1)所述甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，將準(zhǔn)備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進(jìn)行頂空-氣相色譜檢測，根據(jù)氣相色譜信號峰面積與加入甲醇的量之間的對應(yīng)關(guān)系得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)樣品預(yù)處理：準(zhǔn)確稱取樣品，然后加入氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液在超聲條件下進(jìn)行處理，處理結(jié)束后用蒸餾水定容得到預(yù)處理后樣品；

(4)樣品檢測：取適量預(yù)處理后樣品，將其用微量進(jìn)樣器加入至已密封的頂空樣品瓶中，將準(zhǔn)備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進(jìn)行頂空-氣相色譜檢測，記錄下樣品的氣相色譜峰面積；

(5)結(jié)果計算：將步驟(4)所得氣相色譜峰面積與步驟(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，通過計算得到果膠樣品中甲氧基的含量。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(1)中所述甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為0.20～5.00g/L。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(2)中所述加入的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液體積為0～0.05mL。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(3)中所述加入的氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液的濃度為0.5～5.0mol/L。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(3)中所述超聲處理溫度為20～50℃，處理時間為5～120min，超聲功率為200～500W。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(2)和(4)中頂空進(jìn)樣的操作條件為：進(jìn)樣器加熱爐溫度100～130℃；頂空瓶在烘箱中的平衡時間1.0～10.0min。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(2)和(4)中所述的氣相色譜操作條件為：柱溫為35-90℃；載氣為氦氣，其流速為6.0～10.0mL/min；檢測器為火焰離子化檢測器(FID)，檢測器溫度為190～250℃。

進(jìn)一步優(yōu)化的，步驟(4)中所述的取適量的待測樣品，其體積為0.01～0.04mL。

步驟(5)中所述甲氧基含量的計算公式為：

公式中，C為由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的預(yù)處理后樣品中甲醇的含量；V為步驟(3)樣品處理定容后的溶液總體積；m為待測樣品絕干重量，31為甲氧基的分子量；32為甲醇的分子量。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果為：

(1)操作簡便且易掌握；

(2)該方法的靈敏度較高；

(3)反應(yīng)體系簡單，測定結(jié)果準(zhǔn)確，測定誤差可減少70％；

(4)測定過程時間短。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。本發(fā)明并不局限于以下實施方式。實施例僅用于解釋本發(fā)明，而非限制本發(fā)明，對于涉及本發(fā)明的簡單變化均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

實施例1測定高甲氧基果膠中甲氧基的含量

(1)甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確量取0.800g的甲醇(氣相色譜標(biāo)準(zhǔn)品)于容量瓶中，加蒸餾水定容至1000mL得到甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液；

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：依次往不同的已密封的頂空樣品瓶中加入0、0.005、0.01、0.015、0.02、0.03、0.04mL的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，將準(zhǔn)備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進(jìn)行頂空-氣相色譜檢測，其中頂空進(jìn)樣器的操作條件為：加熱爐溫度110℃；頂空瓶在烘箱中的平衡時間5.0min，氣相色譜操作條件為：柱溫為35℃；載氣為氦氣，其流速為6.0mL/min，檢測器溫度為250℃。然后根據(jù)氣相色譜信號峰面積與加入甲醇的量之間的對應(yīng)關(guān)系得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)樣品預(yù)處理：準(zhǔn)確稱取五份樣品，然后加入濃度為1.0mol/L氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液在30℃和500W功率的超聲條件下處理20min，處理結(jié)束后用蒸餾水定容得到預(yù)處理后樣品；

(4)樣品檢測：準(zhǔn)確量取0.02mL的預(yù)處理后樣品，將其用微量進(jìn)樣器加入至已密封的頂空樣品瓶中，將準(zhǔn)備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進(jìn)行頂空-氣相色譜檢測，記錄下樣品的氣相色譜峰面積；

(5)結(jié)果計算：將步驟(4)所得氣相色譜峰面積與步驟(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，通過計算得到果膠樣品中甲氧基的含量，其測定結(jié)果如表1所示。

表1

實施例2測定低甲氧基果膠中甲氧基的含量

(1)甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確量取0.200g的甲醇(氣相色譜標(biāo)準(zhǔn)品)于容量瓶中，加蒸餾水定容至1000mL得到甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液；

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：依次往不同的已密封的頂空樣品瓶中加入0、0.005、0.01、0.015、0.02、0.03、0.04mL的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，將準(zhǔn)備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進(jìn)行頂空-氣相色譜檢測，頂空進(jìn)樣器的操作條件為：加熱爐溫度110℃；頂空瓶在烘箱中的平衡時間5.0min，氣相色譜操作條件為：柱溫為35℃；載氣為氦氣，其流速為6.0mL/min，檢測器溫度為250℃。然后根據(jù)氣相色譜信號峰面積與加入甲醇的量之間的對應(yīng)關(guān)系得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)樣品預(yù)處理：準(zhǔn)確稱取樣品，然后加入濃度為0.5mol/L氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液在30℃和300W功率的超聲條件下處理10min，處理結(jié)束后用蒸餾水定容得到預(yù)處理后樣品；

(4)樣品檢測：準(zhǔn)確量取0.04mL的預(yù)處理后樣品，將其用微量進(jìn)樣器加入至已密封的頂空樣品瓶中，將準(zhǔn)備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進(jìn)行頂空-氣相色譜檢測，記錄下樣品的氣相色譜峰面積；

(5)結(jié)果計算：將步驟(4)所得氣相色譜峰面積與步驟(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，通過計算得到果膠樣品中甲氧基的含量，其測定結(jié)果如表2所示。

表2