本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種阿法替尼原料藥異構(gòu)體的檢測方法。

背景技術(shù)：

馬來酸阿法替尼（Afatinib Dimaleate，CAS:850140-73-7），化學(xué)名稱為：4-二甲氨基-丁-2（E）-烯酸[4-（3-氯-4-氟苯胺基）-7-（四氫呋喃-3（S）-氧基）-喹唑啉-6-基]酰胺二-2（Z）-丁烯二醇，分子式為：C24H25ClFN5O3?2C4H4O4分子量為鹽718.1（dimaleinate）堿486.0，馬來酸阿法替尼為類白色至黃白色固體物質(zhì)；存在可電離基團，因此能觀察到其具有強pH依賴性的親脂特征；具有吸濕性，在相對濕度達70%以上的環(huán)境中可以吸收水分；在pH值高至7水溶性介質(zhì)中，顯示具有很高的溶解度，當介質(zhì) pH值高于8之后，其溶解度顯著性降低；以無水形式存在的，迄今為止，還未發(fā)現(xiàn)它的其它多晶型物質(zhì)；主要用于治療表皮生長因子(EGFR)受體1突變陽性的非小細胞肺癌(NSCLC)。期制備原料中常用到(2E)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(3S)-四氫-3-呋喃基氧]喹唑啉-6-基}-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺馬來酸鹽，但是其具有多種異構(gòu)體，當前還沒有很好的檢測方法。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種阿法替尼原料藥異構(gòu)體的檢測方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：一種阿法替尼原料藥異構(gòu)體的檢測方法，其方案如下：

所述阿法替尼原料藥異構(gòu)體檢測包括(2E)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(3S)-四氫-3-呋喃基氧]喹唑啉-6-基}-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺馬來酸鹽，該方法是采用高效液相色譜法進行的，包括下述步驟：

（1）配制阿法替尼對映異構(gòu)體的系統(tǒng)適用性溶液、對照溶液和供試品溶液；

（2）將步驟（1）所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，以正己烷-無水乙醇-甲醇-二乙胺（80∶8∶7∶0.1）為流動相，并記錄色譜圖；

其中，所述樣品溶液的制備方法包括下述步驟：精密稱取阿法替尼原料藥適量，加無水乙醇溶解并稀釋制成每1ml中含阿法替尼0.1mg的溶液，作為供試品溶液；取阿法替尼對映異構(gòu)體對照品適量，精密稱定，加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中含阿法替尼0.35μg的溶液，作為對照品溶液；另取馬來酸阿法替尼對照品與阿法替尼對映異構(gòu)體對照品適量，加無水乙醇溶解并稀釋制成每1ml中約含阿法替尼0.1mg與阿法替尼對映異構(gòu)體0.35μg的混合溶液作為系統(tǒng)適用性溶液；

所述高效液相色譜法的色譜柱為涂有直鏈淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯) 的硅膠為填充劑；

流動相的配制為正己烷的體積：無水乙醇的體積：甲醇的體積：二乙胺的體積=80∶8∶7∶0.1。

優(yōu)選的，所述高效液相色譜法為等度洗脫。

優(yōu)選的，優(yōu)選流動相的流速為0.9ml/min。

優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為30℃；優(yōu)選地，檢測波長為254nm。

優(yōu)選的，所述阿法替尼樣品溶液還包括系統(tǒng)適用性溶液。

優(yōu)選的，所述馬來酸阿法替尼供試品溶液中阿法替尼的濃度為1.0mg/ml。

優(yōu)選的，所述高效液相色譜法檢測步驟（2）中，首先將系統(tǒng)適用性溶液注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度，使阿法替尼峰與對映異構(gòu)體峰的分離度不小于1.5；再將供試品溶液注入液相色譜儀，采用流動相進行等度洗脫，并記錄色譜圖；優(yōu)選地，注入液相色譜儀中樣品溶液的量均為10ul。

優(yōu)選的，所述系統(tǒng)適用性溶液的制備方法包括下述步驟：分別精密稱取馬來酸阿法替尼對照品14.8mg與阿法替尼對映異構(gòu)體對照品10mg，加無水乙醇溶解并稀釋制成每1ml中約含阿法替尼0.1mg與阿法替尼對映異構(gòu)體0.35μg的混合溶液作為系統(tǒng)適用性溶液。

優(yōu)選的，所述乙醇為溶劑。

本發(fā)明阿法替尼原料藥異構(gòu)體的檢測方法，在液相條件下測定阿法替尼原料藥異構(gòu)體，所述檢測方法操作簡便、分離度高、測定方法專屬性強、檢測結(jié)果準確可信。

實施方式

配制(2E)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(3S)-四氫-3-呋喃基氧]喹唑啉-6-基}-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺馬來酸鹽（1∶2）的系統(tǒng)適用性溶液、對照溶液和供試品溶液；2）將步驟（1）所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，以正己烷-無水乙醇-甲醇-二乙胺（80∶8∶7∶0.1）為流動相，并記錄色譜圖；

其中，所述樣品溶液的制備方法包括下述步驟：精密稱取阿法替尼原料藥適量，加無水乙醇溶解并稀釋制成每1ml中含阿法替尼0.1mg的溶液，作為供試品溶液得到供試品溶液；取阿法替尼對映異構(gòu)體對照品適量，精密稱定，加無水乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中含阿法替尼0.35μg的溶液，作為對照品溶液；另取馬來酸阿法替尼對照品與阿法替尼對映異構(gòu)體對照品適量，加無水乙醇溶解并稀釋制成每1ml中約含阿法替尼0.1mg與阿法替尼對映異構(gòu)體0.35μg的混合溶液作為系統(tǒng)適用性溶液；

所述高效液相色譜法的色譜柱為涂有直鏈淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯) 的硅膠為填充劑（AD-H或效能相當?shù)纳V柱）；

流動相的配制為正己烷的體積：無水乙醇的體積：甲醇的體積：二乙胺的體積=80∶8∶7∶0.1。