一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法及應(yīng)用。屬于新型功能材料與生物傳感檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明具體是采用具有良好電化學催化性能的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料，實現(xiàn)了對人免疫球蛋白的高靈敏檢測，對腫瘤標志物的早期診斷具有重要的意義。
【專利說明】一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法及應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法及應(yīng)用。具體是采用花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料，制備一種檢測人免疫球蛋白的電化學免疫傳感器，屬于新型功能材料與生物傳感檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]電化學免疫傳感器具有選擇性好，靈敏度高，檢測限低，適合聯(lián)機化，操作簡便等優(yōu)點，可實現(xiàn)在線電化學檢測，樣品預處理簡單或不需預處理，檢測不受樣品物理性質(zhì)的影響，所需儀器設(shè)備相對簡單，具有簡便、快速、體積小等特點，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于腫瘤標志物的檢測。因此本發(fā)明制備了一種花狀納米復合材料的生物傳感器，實現(xiàn)了對人免疫球蛋白的檢測。
[0003]本發(fā)明利用花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記檢測抗體，首先，氧化鋅和金鈀合金都是對雙氧水具有良好電化學催化性能的納米材料，其次，花狀結(jié)構(gòu)具有更大的比表面積，增加了檢測抗體的負載量，最后，由于其與雙氧水有更多的接觸面積，花狀納米復合材料比球形納米復合材料對雙氧水顯示出更加良好的電化學催化性能。在檢測人免疫球蛋白的過程中產(chǎn)生了逐步放大的電化學信號，有效地增強了電化學免疫傳感器的靈敏度。該方法具有成本低、靈敏度高、特異性好、檢測快速等優(yōu)點，而且制備過程較為簡單，為目前有效檢測腫瘤標志物提供了新途徑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的之一是基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料，構(gòu)建了一種無酶、快速且超靈敏的夾心型電化學免疫傳感器。
[0005]本發(fā)明的目的之二是將該夾心型電化學免疫傳感器應(yīng)用于人免疫球蛋白的檢測。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
1.一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法
(1)依次用1.0,0.3,0.05 Mm的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，分別在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干；
(2)以質(zhì)量分數(shù)為1%的2mL氯金酸溶液為底液，在-0.2 V電壓下掃描30 s，得到電沉積金納米顆粒修飾的電極；
(3)將6PL濃度為8?12 Pg/mL的人免疫球蛋白捕獲抗體溶液滴加到修飾電極表面，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(4)用3μ L濃度為5?15 mg/mL的牛血清白蛋白溶液封閉非特異性活性位點，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(5)將6μ L濃度為0.00002?5 ng/mL的一系列不同濃度的人免疫球蛋白用于和捕獲抗體的特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈；
(6)將6 yL濃度為1?3 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液滴在電極上與抗原特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈，于4 °C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0007]2.花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
(1)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料的制備
將15?30 mL濃度為0.01 mol/L的硝酸鋅溶液加入到15?30 mL濃度為0.01 mol/L六亞甲基四胺溶液中，攪拌均勻后加入1?2 mL濃度為0.005 mol/L的檸檬酸三鈉溶液，將該混合溶液轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯高壓反應(yīng)釜中，95°C下反應(yīng)1 h，冷卻到室溫，用超純水離心洗滌后真空干燥，得到花狀納米氧化鋅微球，取0.1?0.2 g花狀氧化鋅納米微球，加入到10?20 mL無水乙醇中，加入0.1?0.2 mL的三氨丙基三乙氧基硅烷，將該混合溶液于70°C下反應(yīng)1.5 h，冷卻到室溫，用無水乙醇離心洗滌后真空干燥，得到氨基化的花狀納米氧化鋅微球；
將50?100 mL超純水、0.25?0.5 mL質(zhì)量分數(shù)為1%的氯金酸溶液和2.5?5 mg氯鈀酸鉀在三口燒瓶中混合，加熱煮沸后，快速加入3?6 mL質(zhì)量分數(shù)為2%的檸檬酸鈉水溶液，煮沸10 min，冷卻到室溫，得到金鈀納米花，向20?40 mL的金鈀納米花溶液中加入10?20 mg的氨基化的花狀納米氧化鋅微球，震蕩12 h，離心洗滌，真空干燥后，得到花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料；
(2)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
將1 mL濃度為1?2 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料溶液與1mL濃度為5?15 μ g/mL人免疫球蛋白檢測抗體混合，震蕩12 h，離心洗滌，將得到的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體孵化物分散于1 mL、pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，制得花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0008]3.人免疫球蛋白的檢測方法
(1)使用電化學工作站以三電極體系進行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉬絲電極為輔助電極，所制備的免疫傳感器為工作電極，在10 mL的pH值為6.8的磷酸鹽緩沖溶液中進行測試；
(2)選擇計時電流法對人免疫球蛋白進行檢測，將輸入電壓設(shè)置為-0.4 V，取樣間隔設(shè)置為0.1 S,運行時間設(shè)置為400 S ；
(3)當背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔50s向磷酸鹽緩沖溶液中注入10 yL濃度為5 mol/L的雙氧水溶液，然后記錄電流隨時間的變化，繪制工作曲線；
(4)將待測樣品溶液代替人免疫球蛋白標準溶液進行檢測。
[0009]本發(fā)明的有益成果
(1)本發(fā)明利用花狀納米復合材料做為標記物，花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料具有良好的電化學催化性能，實現(xiàn)了電化學信號的雙重放大，顯著提高了傳感器的靈敏度。
[0010](2)本發(fā)明利用花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料的花狀結(jié)構(gòu)具有更大的比表面積，使檢測抗體得到有效固定，在構(gòu)建電化學免疫傳感器的過程中，顯著提高了傳感器的穩(wěn)定性。
[0011](3)本發(fā)明利用的花狀納米復合材料增加了與雙氧水的有效接觸面積，對雙氧水電化學催化性能顯著優(yōu)于球形納米復合材料。
[0012](4)本發(fā)明將制備的夾心電化學免疫傳感器用于人免疫球蛋白的檢測，檢測限低，線性范圍寬，可以實現(xiàn)簡單、快速、靈敏和特異性檢測，本法發(fā)明用于人免疫球蛋白檢測的線性范圍為0.00002?5 ng/mL，檢測限10 fg/mL。

【具體實施方式】
[0013]實施例1 一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法
(1)依次用1.0,0.3,0.05 Mm的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，分別在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干；
(2)以質(zhì)量分數(shù)為1%的2mL氯金酸溶液為底液，在-0.2 V電壓下掃描30 s，得到電沉積金納米顆粒修飾的電極；
(3)將6PL濃度為8 Pg/mL的人免疫球蛋白捕獲抗體溶液滴加到修飾電極表面，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(4)用3μ L濃度為5 mg/mL的牛血清白蛋白溶液封閉非特異性活性位點，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(5)將6μ L濃度為0.00002?5 ng/mL的一系列不同濃度的人免疫球蛋白用于和捕獲抗體的特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈；
(6)將6μ L濃度為1 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液滴在電極上與抗原特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0014]實施例2 —種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法
(1)依次用1.0,0.3,0.05 Mm的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，分別在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干；
(2)以質(zhì)量分數(shù)為1%的2mL氯金酸溶液為底液，在-0.2 V電壓下掃描30 s，得到電沉積金納米顆粒修飾的電極；
(3)將6μ?濃度為10 Pg/mL的人免疫球蛋白捕獲抗體溶液滴加到修飾電極表面，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(4)用3μ L濃度為10 mg/mL的牛血清白蛋白溶液封閉非特異性活性位點，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(5)將6μ L濃度為0.00002?5 ng/mL的一系列不同濃度的人免疫球蛋白用于和捕獲抗體的特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈；
(6)將6μ L濃度為2 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液滴在電極上與抗原特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0015]實施例3 —種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法
(1)依次用1.0,0.3,0.05 Mm的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，分別在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干；
(2)以質(zhì)量分數(shù)為1%的2mL氯金酸溶液為底液，在-0.2 V電壓下掃描30 s，得到電沉積金納米顆粒修飾的電極；
(3)將6μ?濃度為12 Pg/mL的人免疫球蛋白捕獲抗體溶液滴加到修飾電極表面，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(4)用3μ L濃度為15 mg/mL的牛血清白蛋白溶液封閉非特異性活性位點，于4°C冰箱中孵化1 h，清洗干凈；
(5)將6μ L濃度為0.00002?5 ng/mL的一系列不同濃度的人免疫球蛋白用于和捕獲抗體的特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈；
(6)將6μ L濃度為3 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液滴在電極上與抗原特異性識別，室溫下孵化1 h，清洗干凈，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0016]實施例4花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
(1)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料的制備
將15 mL濃度為0.01 mol/L的硝酸鋅溶液加入到15 mL濃度為0.01 mol/L六亞甲基四胺溶液中，攪拌均勻后加入1 mL濃度為0.005 mol/L的檸檬酸三鈉溶液，將該混合溶液轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯高壓反應(yīng)釜中，95°C下反應(yīng)1 h，冷卻到室溫，用超純水離心洗滌后真空干燥，得到花狀納米氧化鋅微球，取0.1 g花狀氧化鋅納米微球，加入到10 mL無水乙醇中，力口入0.1 mL的三氨丙基三乙氧基硅烷，將該混合溶液于70°C下反應(yīng)1.5 h，冷卻到室溫，用無水乙醇離心洗滌后真空干燥，得到氨基化的花狀納米氧化鋅微球；
將50 mL超純水、0.25 mL質(zhì)量分數(shù)為1%的氯金酸溶液和2.5 mg氯鈀酸鉀在三口燒瓶中混合，加熱煮沸后，快速加入3 mL質(zhì)量分數(shù)為2%的檸檬酸鈉水溶液，煮沸10 min,冷卻到室溫，得到金鈕納米花，向20 mL的金鈕納米花溶液中加入10 mg的氨基化的花狀納米氧化鋅微球，震蕩12 h，離心洗滌，真空干燥后，得到花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料；
(2)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
將1 mL濃度為1 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料溶液與1 mL濃度為5 μ g/mL人免疫球蛋白檢測抗體混合，震蕩12 h，離心洗滌，將得到的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體孵化物分散于1 mL、pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，制得花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0017]實施例5花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備 (1)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料的制備
將28 mL濃度為0.01 mol/L的硝酸鋅溶液加入到28 mL濃度為0.01 mol/L六亞甲基四胺溶液中，攪拌均勻后加入1.5 mL濃度為0.005 mol/L的檸檬酸三鈉溶液，將該混合溶液轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯高壓反應(yīng)釜中，95°C下反應(yīng)1 h，冷卻到室溫，用超純水離心洗滌后真空干燥，得到花狀納米氧化鋅微球，取0.15 g花狀氧化鋅納米微球，加入到15 mL無水乙醇中，加入0.15 mL的三氨丙基三乙氧基硅烷，將該混合溶液于70°C下反應(yīng)1.5 h，冷卻到室溫，用無水乙醇離心洗滌后真空干燥，得到氨基化的花狀納米氧化鋅微球；
將75 mL超純水、0.38 mL質(zhì)量分數(shù)為1%的氯金酸溶液和3.8 mg氯鈀酸鉀在三口燒瓶中混合，加熱煮沸后，快速加入4.5 mL質(zhì)量分數(shù)為2%的檸檬酸鈉水溶液，煮沸10 min，冷卻到室溫，得到金鈕納米花，向30 mL的金鈕納米花溶液中加入15 mg的氨基化的花狀納米氧化鋅微球，震蕩12 h，離心洗滌，真空干燥后，得到花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料；
(2)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
將1 mL濃度為1.5 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料溶液與1 mL濃度為10 μ g/mL人免疫球蛋白檢測抗體混合，震蕩12 h，離心洗滌，將得到的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體孵化物分散于1 mL、pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，制得花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0018]實施例6花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
(1)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料的制備
將30 mL濃度為0.01 mol/L的硝酸鋅溶液加入到30 mL濃度為0.01 mol/L六亞甲基四胺溶液中，攪拌均勻后加入2 mL濃度為0.005 mol/L的檸檬酸三鈉溶液，將該混合溶液轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯高壓反應(yīng)釜中，95°C下反應(yīng)1 h，冷卻到室溫，用超純水離心洗滌后真空干燥，得到花狀納米氧化鋅微球，取0.2 g花狀氧化鋅納米微球，加入到20 mL無水乙醇中，力口Λ 0.2 mL的三氨丙基三乙氧基硅烷，將該混合溶液于70°C下反應(yīng)1.5 h，冷卻到室溫，用無水乙醇離心洗滌后真空干燥，得到氨基化的花狀納米氧化鋅微球；
將100 mL超純水、0.5 mL質(zhì)量分數(shù)為1%的氯金酸溶液和5 mg氯鈀酸鉀在三口燒瓶中混合，加熱煮沸后，快速加入6 mL質(zhì)量分數(shù)為2%的檸檬酸鈉水溶液，煮沸10 min,冷卻到室溫，得到金鈕納米花，向40 mL的金鈕納米花溶液中加入20 mg的氨基化的花狀納米氧化鋅微球，震蕩12 h，離心洗滌，真空干燥后，得到花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料；
(2)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備
將1 mL濃度為2 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料溶液與1 mL濃度為15 μ g/mL人免疫球蛋白檢測抗體混合，震蕩12 h，離心洗滌，將得到的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體孵化物分散于1 mL、pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，制得花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> [0019]實施例7人免疫球蛋白的檢測步驟
(1)使用電化學工作站以三電極體系進行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉬絲電極為輔助電極，所制備的免疫傳感器為工作電極，在10 mL的pH值為6.8的磷酸鹽緩沖溶液中進行測試；
(2)選擇計時電流法對人免疫球蛋白進行檢測，將輸入電壓設(shè)置為-0.4 V，取樣間隔設(shè)置為0.1 S,運行時間設(shè)置為400 S ；
(3)當背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔50s向磷酸鹽緩沖溶液中注入10 yL濃度為5 mol/L的雙氧水溶液，然后記錄電流隨時間的變化，繪制工作曲線；
(4)將待測樣品溶液代替人免疫球蛋白標準溶液進行檢測。
[0020](5)該電化學免疫傳感器人免疫球蛋白檢測線性范圍為0.00002?5 ng/mL，檢測限 10 fg/mL。
【權(quán)利要求】
1.一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)依次用1.0,0.3,0.05 Mffl的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，分別在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干； (2)以質(zhì)量分數(shù)為1%的2mL氯金酸溶液為底液，在-0.2 V電壓下掃描30 S，得到電沉積金納米顆粒修飾的電極； (3)將6PL濃度為8?12 Pg/mL的人免疫球蛋白捕獲抗體溶液滴加到修飾電極表面，于4°C冰箱中孵化I h，清洗干凈； (4)用3μ L濃度為5?15 mg/mL的牛血清白蛋白溶液封閉非特異性活性位點，于4°C冰箱中孵化I h，清洗干凈； (5)將6μ L濃度為0.00002?5 ng/mL的一系列不同濃度的人免疫球蛋白用于和捕獲抗體的特異性識別，室溫下孵化I h，清洗干凈； (6)將6μ L濃度為I?3 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液滴在電極上與抗原特異性識別，室溫下孵化I h，清洗干凈，于4 °C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> 2.如權(quán)利要求1所述的一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器的制備方法，所述花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備，其特征在于，包括以下步驟: (1)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料的制備 將15?30 mL濃度為0.01 mol/L的硝酸鋅溶液加入到15?30 mL濃度為0.01 mol/L六亞甲基四胺溶液中，攪拌均勻后加入I?2 mL濃度為0.005 mol/L的檸檬酸三鈉溶液，將該混合溶液轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯高壓反應(yīng)釜中，95°C下反應(yīng)I h，冷卻到室溫，用超純水離心洗滌后真空干燥，得到花狀納米氧化鋅微球，取0.1?0.2 g花狀氧化鋅納米微球，加入到10?20 mL無水乙醇中，加入0.1?0.2 mL的三氨丙基三乙氧基硅烷，將該混合溶液于70°C下反應(yīng)1.5 h，冷卻到室溫，用無水乙醇離心洗滌后真空干燥，得到氨基化的花狀納米氧化鋅微球； 將50?100 mL超純水、0.25?0.5 mL質(zhì)量分數(shù)為1%的氯金酸溶液和2.5?5 mg氯鈀酸鉀在三口燒瓶中混合，加熱煮沸后，快速加入3?6 mL質(zhì)量分數(shù)為2%的檸檬酸鈉水溶液，煮沸10 min，冷卻到室溫，得到金鈀納米花，向20?40 mL的金鈀納米花溶液中加入10?20 mg的氨基化的花狀納米氧化鋅微球，震蕩12 h，離心洗滌，真空干燥后，得到花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料； (2)花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液的制備 將I mL濃度為I?2 mg/mL的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料溶液與ImL濃度為5?15 μ g/mL人免疫球蛋白檢測抗體混合，震蕩12 h，離心洗滌，將得到的花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體孵化物分散于I mL、pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，制得花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料標記的人免疫球蛋白檢測抗體溶液，于4°C冰箱中儲存?zhèn)溆谩?br> 3.如權(quán)利要求1所述的制備方法制備的一種基于花狀納米氧化鋅微球和金鈀納米花復合材料構(gòu)建的生物傳感器，其特征在于，用于人免疫球蛋白的檢測，檢測步驟如下: (1)使用電化學工作站以三電極體系進行測試，飽和甘汞電極為參比電極，鉬絲電極為輔助電極，所制備的免疫傳感器為工作電極，在10 mL的pH值為6.8的磷酸鹽緩沖溶液中進行測試； (2)選擇計時電流法對人免疫球蛋白進行檢測，將輸入電壓設(shè)置為-0.4 V，取樣間隔設(shè)置為0.1 S,運行時間設(shè)置為400 S ； (3)當背景電流趨于穩(wěn)定后，每隔50s向磷酸鹽緩沖溶液中注入10 yL濃度為5 mol/L的雙氧水溶液，然后記錄電流隨時間的變化，繪制工作曲線； (4)將待測樣品溶液代替人免疫球蛋白標準溶液進行檢測。
【文檔編號】G01N27/327GK104391123SQ201410781167
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年12月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月17日
【發(fā)明者】王玉蘭, 閆濤, 劉振, 馬洪敏, 張勇, 龐雪輝, 杜斌, 吳丹, 魏琴 申請人:濟南大學