離子模擬酶檢測葡萄糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及基于Fe3+離子過氧化物模擬酶的催化性質,發(fā)展一種簡便的葡萄糖檢測方法。對葡萄糖的檢出限為6.6×10-6 M,線性范圍為4×10-6到1×10-4 M。本發(fā)明具有高選擇性、高靈敏度、無需合成納米材料、無需復雜儀器等優(yōu)點。
【專利說明】一種基于Fe3+離子模擬酶檢測葡萄糖的方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及基于Fe3+離子模擬酶檢測葡萄糖的方法,屬于分析化學領域。
【背景技術】
[0002] 酶,在生命體中發(fā)揮著重要的作用,也在制藥學、生命分析化學等實際領域中得到 廣泛的應用。但因為在實際使用中天然酶存在容易失活、降解,以及制備和純化的操作繁瑣 等缺陷,尋找各種天然酶的替代物,即人工模擬酶,是解決這些問題的關鍵。其中,過氧化物 模擬酶獲得了廣泛的關注,有被用于過氧化氫和抗壞血酸的檢測。
[0003] 國內外,葡萄糖的檢測方法有多種,包括電化學、熒光法和拉曼光譜法等。基于過 氧化物模擬酶的催化性質進行葡萄糖的檢測,則集中在一些納米材料上。閻錫蘊研究小組 首次發(fā)現Fe304磁性納米粒子具有類似過氧化氫酶的催化性質,可以催化一些底物體系如 3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺〇1?)-11 202發(fā)生氧化還原反應仏.6&〇,丄211皿叩,1^附6, J.Zhang,Y.Zhang,N.Gu,T.Wang,J.Feng,D.Yang,S.PerrettandX.Yan, Nat.Nanotechnol.,2007,2,577-583)。利用這一發(fā)現,汪爾康研究小組將Fe304磁性納 米粒子的催化性質進一步運用于H202和葡萄糖的檢測方面(11.161311(1£.1(.13叩,41^1. Chem.,2008, 80,2250-2254)。不僅如此,其它的一些納米材料如FeS、CuO、CuS和納米氧化 鈰等,也被發(fā)現具有類似的過氧化物模擬酶催化性質,并被應用于H202或葡萄糖的檢測。值 得注意的是,在眾多納米材料模擬酶中,研究最多的是含Fe的納米材料和其絡合物。然而, 這些納米材料作為過氧化物模擬酶存在著嚴重的缺陷,如(1)制備出尺寸單一、穩(wěn)定性好的 納米材料的操作程序復雜;(2)納米材料具有內在的不穩(wěn)定性,在保存過程中表面易被氧 化/聚集,使其催化性能降低,甚至消失。這些缺陷問題,嚴重影響了納米材料模擬酶的實 際應用。
[0004] 本發(fā)明正是基于納米材料模擬酶的不足,利用廉價易得的Fe3+離子作為過氧化物 模擬酶,發(fā)展了一種簡便的葡萄糖檢測方法。
【發(fā)明內容】
[0005] 基于Fe3+離子模擬酶的性質,本發(fā)明的目的是利用Fe3+離子作為過氧化物模擬酶 提供一種新型的葡萄糖檢測方法。該方法具有簡便、靈敏、高選擇性和快速等特點。該方法 對于葡萄糖檢測的線性響應范圍為4剛-100剛。
[0006] 本發(fā)明所涉及的化學反應過程如式(1)和(2)。
【權利要求】
1. 基于Fe 3+離子過氧化物模擬酶的催化性質,發(fā)展一種簡便的葡萄糖檢測方法,其特 征在于,所述方法簡單易行、靈敏度高、選擇性好、所用的過氧化物模擬酶廉價易得、催化 性能好,檢測方法如下:將葡萄糖氧化酶與不同濃度的葡萄糖溶液在37 °C水浴中反應30 min得到葡萄糖反應液,將所得反應液與TMB乙醇溶液、Fe3+離子過氧化物模擬酶、0. 2 M NaOAc-HOAc緩沖液(pH = 4. 2)混合,將上述混合液于37°C水浴中反應10 min后,在652 nm處測量其吸光度。
2. 權利要求1所述的方法,其特征在于,所用Fe 3+離子的濃度為5剛。
3. 權利要求1所述的方法,其特征在于,所用TMB乙醇溶液的濃度為0. 5 mM。
4. 權利要求1所述的方法,其特征在于,樣品中葡萄糖分子的濃度范圍為4 MM-100 剛。
【文檔編號】G01N21/33GK104458628SQ201410764655
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月15日 優(yōu)先權日:2014年12月15日
【發(fā)明者】沈江珊, 吳小瓊, 徐艷, 張洪武, 楊溢 申請人:中國科學院城市環(huán)境研究所