非特異性反應(yīng)抑制劑、非特異性反應(yīng)抑制方法及試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供非特異性反應(yīng)抑制劑，該抑制劑用于簡便且有效地抑制免疫學(xué)測定法中伴隨著測定的非特異性反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)樣本中的微量成分(目標(biāo)物質(zhì))的準(zhǔn)確的檢測及定量。所述非特異性反應(yīng)抑制劑包含式I所示的物質(zhì)：式中，R1和R2一起在它們各自直接鍵合的碳之間形成雙鍵，或者R1是氫原子，且R2是從含SH基的化合物中除去H而得的基團(tuán)，B是支承體，L是間隔臂部分。
【專利說明】非特異性反應(yīng)抑制劑、非特異性反應(yīng)抑制方法及試劑盒
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及非特異性反應(yīng)抑制劑、使用該抑制劑的非特異性反應(yīng)抑制方法以及包含該抑制劑的免疫測定試劑盒，該抑制劑在免疫學(xué)測定法中使用，用于抑制非特異性反應(yīng)，該非特異性反應(yīng)是對微量的目標(biāo)物質(zhì)準(zhǔn)確地進(jìn)行檢測、定量的障礙。
【背景技術(shù)】
[0002]利用抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)測定法能特異性地檢測或者以良好的精度測定作為測定對象的微量成分，因此被廣泛應(yīng)用于臨床檢查。人們逐漸認(rèn)識到，在這些免疫學(xué)測定法中，由于作為本來目的的目標(biāo)物質(zhì)的特異性的抗原抗體反應(yīng)以外的非特異性反應(yīng)，測定值的可靠性受損。該現(xiàn)象是由于樣本中所含的目標(biāo)物質(zhì)(抗原)以外的成分與測定體系的成分反應(yīng)而引起的。
[0003]一直以來，為了抑制非特異性反應(yīng)、得到正確的測定值，進(jìn)行了各種各樣的嘗試。例如，通常通過加熱或用合適的試劑對欲測定的樣本進(jìn)行預(yù)處理，或是在測定體系中添加各種動物血清、免疫球蛋白組分、白蛋白、脫脂牛奶、明膠、表面活性劑等。為了避免通過像類風(fēng)濕因子那樣與抗體的Fe部位結(jié)合而引起的非特異性反應(yīng)，也將？&13、？(&13’)2等抗體片段用于特異性反應(yīng)。此外，也在測定體系中添加單克隆抗體，該單克隆抗體與測定體系中使用的單克隆抗體的反應(yīng)特異性不同，并且不阻礙測定體系的反應(yīng)。
[0004]此外，也已知如專利文獻(xiàn)I所述采用使用馬來酰亞胺等使鏈霉親和素(streptavidin)交聯(lián)/聚合而得的產(chǎn)物的技術(shù)方案、如專利文獻(xiàn)2所述采用?；鞍踪|(zhì)凝集體的技術(shù)方案。此外，也已知在N取代馬來酰亞胺化合物的存在下使被能檢測的物質(zhì)標(biāo)記的一抗、二抗和試樣反應(yīng)，由此抑制能檢測的物質(zhì)與試樣中所含的硫醇基(即SH基)的非特異性的結(jié)合的技術(shù)方案(專利文獻(xiàn)3)。此外，公開了如下內(nèi)容:在阻礙機(jī)體相關(guān)分子對載體的非特異性吸附的方法中，對表面具有選自N-羥基琥珀酰亞胺酯基、羧基、馬來酰亞胺基和氨基的化學(xué)修飾基團(tuán)的載體使用包含聚環(huán)氧烷的封閉劑，該聚環(huán)氧烷的末端具有能與上述載體上的化學(xué)修飾基團(tuán)反應(yīng)的、選自N-羥基琥珀酰亞胺酯基、巰基和氨基的官能團(tuán)(專利文獻(xiàn)4)。
[0005]但是，這些方法雖然在非特異性反應(yīng)的抑制方面有一定程度的效果，但在一部分樣本中，其效果還有所不足，在誤診可能會招致嚴(yán)重后果的臨床檢查的現(xiàn)場尚不能令人滿
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[0006]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)1:日本專利第3027770號說明書 專利文獻(xiàn)2:日本特表平8-506907號公報(bào) 專利文獻(xiàn)3:日本專利第4571999號說明書 專利文獻(xiàn)4:日本特開2006-308307號公報(bào)。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]發(fā)明所要解決的課題
鑒于這樣的狀況，本發(fā)明的目的是提供非特異性反應(yīng)抑制劑、其使用方法及測定試劑盒，該抑制劑用于在免疫學(xué)測定法中簡便且有效地抑制伴隨著測定的非特異性反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)樣本中的微量成分(目標(biāo)物質(zhì))的準(zhǔn)確的檢測及定量。
[0008]用于解決課題的手段
本發(fā)明人為了解決上述問題，對非特異性反應(yīng)進(jìn)行了認(rèn)真研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過在反應(yīng)液中添加鍵合有具有馬來酰亞胺基的物質(zhì)(Sulfo-SMCC:磺基琥珀酰亞胺基-4-(N-馬來酰亞胺甲基)環(huán)己烷-1-甲酸酯或Sulfo-HMCS:N-(8-馬來酰亞胺辛氧基)磺基琥珀酰亞胺)的擔(dān)載體^ 'J 7—)蛋白，能避免樣本中的干擾物質(zhì)(非特異性反應(yīng)物質(zhì))的影響，從而完成了本發(fā)明。即，如下述實(shí)施例中所詳述的，作為非特異性反應(yīng)物質(zhì)，已知在樣本中存在與鍵合有馬來酰亞胺基的擔(dān)載體蛋白反應(yīng)的物質(zhì)。本發(fā)明基于該發(fā)現(xiàn)，完成了一種用于準(zhǔn)確地測定樣本中的目標(biāo)物質(zhì)的非特異性反應(yīng)抑制劑以及使用該非特異性反應(yīng)抑制劑的測定方法及測定試劑。
[0009]即，本發(fā)明涉及:
[I]免疫學(xué)測定用的非特異性反應(yīng)抑制劑，其包含式I所示的物質(zhì):
[化I]
【權(quán)利要求】
1.免疫學(xué)測定用的非特異性反應(yīng)抑制劑，其包含式I所示的物質(zhì): [化1]
2.權(quán)利要求1所述的非特異性反應(yīng)抑制劑，其中，支承體是擔(dān)載體蛋白或擔(dān)載體固相載體。
3.權(quán)利要求2所述的非特異性反應(yīng)抑制劑，其中，擔(dān)載體蛋白是白蛋白。
4.權(quán)利要求2所述的非特異性反應(yīng)抑制劑，其中，擔(dān)載體固相載體是粒子。
5.免疫學(xué)測定方法，其使用權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的非特異性反應(yīng)抑制劑。
6.權(quán)利要求5所述的免疫學(xué)測定方法，其中，免疫學(xué)測定方法是膠乳凝集光學(xué)測定法、酶免疫分析法、免疫比濁法、酶免疫測定法、熒光免疫測定法或放射免疫測定法。
7.權(quán)利要求5或6所述的免疫學(xué)測定方法，其中，在進(jìn)行與樣本中所含的目標(biāo)物質(zhì)的特異性的免疫反應(yīng)工序之前，使該樣本與非特異性反應(yīng)抑制劑反應(yīng)。
8.權(quán)利要求5或6所述的免疫學(xué)測定方法，其中，在非特異性反應(yīng)抑制劑的共存下進(jìn)行與樣本中所含的目標(biāo)物質(zhì)的特異性的免疫反應(yīng)工序。
9.權(quán)利要求5或6所述的免疫學(xué)測定方法，其中，免疫測定是采用夾心法的測定，在非特異性反應(yīng)抑制劑的共存下進(jìn)行與樣本中所含的目標(biāo)物質(zhì)的特異性的的免疫反應(yīng)工序中的一道以上的工序。
10.免疫學(xué)測定試劑盒，其含有權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的非特異性反應(yīng)抑制劑。
【文檔編號】G01N33/543GK103620407SQ201280032103
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日:2011年6月29日
【發(fā)明者】岡村佳和, 田代茂 申請人:三菱化學(xué)美迪恩斯株式會社