專(zhuān)利名稱(chēng)：冰七制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種冰七制劑的質(zhì)量控制方法，屬于對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
冰七制劑具有活血理氣，開(kāi)竅止痛的功能，用于氣滯血瘀的胸痹，癥見(jiàn)胸痛、胸悶、憋氣等；冠心病見(jiàn)上述癥狀者。經(jīng)多年的臨床應(yīng)用表明，冰七制劑對(duì)冠心病、心絞痛的療效顯著，深受廣大患者的喜愛(ài)，這就要求我們生產(chǎn)出高質(zhì)量的產(chǎn)品，以確?；颊叩睦婧徒】怠５?jīng)研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有冰七片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)較為簡(jiǎn)單，不能對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行全面有效地控制，從而將影響其臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種冰七制劑的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，對(duì)本制劑的質(zhì)量控制方法進(jìn)行了研究，擬訂了三七中人參皂苷Rg1、Rb1的含量測(cè)定和冰片、三七的薄層色譜鑒別，提高了冰七制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而保證了該制劑的臨床療效。
本發(fā)明所述的冰七制劑是由三七10-50g、冰片1-10g及輔料制備而成。其制備方法為三七粉碎成細(xì)粉，用10％淀粉漿制粒，烘干；冰片用5ml乙醇溶解，噴入顆粒內(nèi)并混勻，然后加入輔料制成不同的制劑。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中冰片和三七的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中三七所含人參皂苷Rg1、Rb1的含量測(cè)定。
冰片的鑒別方法是以冰片對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2-5∶14-20為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
三七的鑒別方法是以三七對(duì)照藥材為對(duì)照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶水＝10-20∶30-50∶10-35∶5-20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取本制劑或其內(nèi)容物0.5-3g，加乙醚10-50ml，超聲處理3-20分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1-10mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2-5∶14-20為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑或其內(nèi)容物0.1-3g，加水2-10滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇2-10ml，密塞，振搖約5-30分鐘，放置0.5-5小時(shí)，離心，取上清液，加1-5倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶水＝10-20∶30-50∶10-35∶5-20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
三七中人參皂苷Rg1、Rb1的含量測(cè)定方法是以人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
具體的含量測(cè)定方法為照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.05-0.5mg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本制劑或其內(nèi)容物0.1-0.5g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取10-60分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本膠囊劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1C54H92O23的總量計(jì)，不得少于18mg/g；片劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1C54H92O23的總量計(jì)，不得少于10mg/g；顆粒劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1C54H92O23的總量計(jì)，不得少于2mg/g。
所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰白色顆粒或粉末；
對(duì)于片劑藥物顯灰白色；對(duì)于顆粒劑藥物為灰白色顆粒；鑒別(1)取本制劑或其內(nèi)容物0.5-3g，加乙醚10-50ml，超聲處理3-20分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1-10mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2-5∶14-20為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑或其內(nèi)容物0.1-3g，加水2-10滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇2-10ml，密塞，振搖約5-30分鐘，放置0.5-5小時(shí)，離心，取上清液，加1-5倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶水＝10-20∶30-50∶10-35∶5-20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典膠囊劑、片劑或顆粒項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.05-0.5mg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本制劑或其內(nèi)容物0.1-0.5g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取10-60分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本膠囊劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1C54H92O23的總量計(jì)，不得少于18mg/g；片劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1C54H92O23的總量計(jì)，不得少于10mg/g；顆粒劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1C54H92O23的總量計(jì)，不得少于2mg/g。
為了確保本發(fā)明質(zhì)量控制方法科學(xué)、合理、可行，申請(qǐng)人對(duì)方中各成分的鑒別和含量測(cè)定方法進(jìn)行了研究，具體試驗(yàn)資料如下一、人參皂苷Rg1、Rb1含量測(cè)定方法研究1、供試品溶液制備方法研究取本品內(nèi)容物0.25g，置50ml量瓶中，分別加入30ml甲醇、乙醇超聲提取30分鐘，放冷，稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，測(cè)定其人參皂苷含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表。
不同提取溶劑對(duì)人參皂苷含量測(cè)定的影響(n＝3)

試驗(yàn)結(jié)果表明，用甲醇超聲提取，即可將人參皂苷提取完全。
2、流動(dòng)相的選擇流動(dòng)相1以甲醇、0.05％磷酸溶液不同比例的混合溶液為流動(dòng)相；流動(dòng)相2以乙腈、0.05％磷酸溶液不同比例的混合溶液為流動(dòng)相；流動(dòng)相3以乙腈、水不同比例的混合溶液為流動(dòng)相。
結(jié)果以甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相，陰性樣品色譜圖在人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1峰位置處無(wú)假陽(yáng)性峰；人參皂苷Rg1峰、人參皂苷Rb1峰和相近的雜質(zhì)峰分離完全(分離度＞1.5)，且人參皂苷Rg1與人參皂苷Rb1白果內(nèi)酯銀杏內(nèi)酯C的分離度大于1.5。最佳流動(dòng)相為乙腈∶0.05％磷酸溶液＝30∶70。
3、重現(xiàn)性試驗(yàn)取本品內(nèi)容物，按本發(fā)明中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法，分別制備5份供試液，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，人參皂苷Rg1的平均含量為39.5150mg/g，RSD為0.24％；人參皂苷Rb1的平均含量為35.4534mg/g，RSD為0.79％。表明重復(fù)性良好，結(jié)果見(jiàn)下表。
制劑供試品中人參皂苷的重復(fù)性試驗(yàn)

4、精密度試驗(yàn)精密吸取人參皂苷Rg1對(duì)照品溶液(0.1818mg/ml)10μl，注入液相色<p>試驗(yàn)4、抗代謝藥物和抗代謝藥物增效劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細(xì)胞包括CNS-1、C6、9L、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將抗代謝藥物和抗代謝藥物增效劑按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時(shí)的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制效果見(jiàn)表2所示。
表2

以上結(jié)果表明，所用抗代謝藥物(雷替曲塞)及抗代謝藥物增效劑-抗有絲分裂藥物(吉拉達(dá)唑、砒霜、諾考達(dá)唑)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，以瘤內(nèi)給藥效果明顯。當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
SPA-3型PPP血小板聚集儀(上海科達(dá)測(cè)試儀器廠)。
3.試驗(yàn)方法及結(jié)果家兔頸動(dòng)脈放血，3.8％枸櫞酸鈉抗凝，全血與抗凝劑之比為9∶1，800rpm離心10min，制備富血小板血漿(PRP)，3000rpm離心10min制備貧血小板血漿(PPP)。取受試樣品，加至PRP中，混勻，37℃溫孵10min。以PPP調(diào)零，PRP調(diào)100％，以ADP為誘導(dǎo)劑(終濃度為2μM)，按比濁法用SPA-3型PPP血小板聚集儀測(cè)定血小板聚集百分?jǐn)?shù)，計(jì)算抑制率，按logit法回歸求各受試樣品的半數(shù)抑制濃度(IC50)，結(jié)果見(jiàn)表1、2。
結(jié)果表明，當(dāng)歸注射液能濃度依賴(lài)性抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，3種工藝的抑制作用強(qiáng)度依次為樣品2(050428)＞樣品3(050429)＞樣品1(050403)，其中樣品2比樣品1和樣品3約強(qiáng)2倍。
表9 不同濃度的當(dāng)歸注射液對(duì)兔離體血小板聚集抑制率(x±s)

表10 三種不同工藝提取物對(duì)兔離體血小板聚集抑制作用的比較

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明的當(dāng)歸水溶性提取物采用大孔樹(shù)脂吸附提取，雜質(zhì)含量低，有效成分含量高，提高了藥效。經(jīng)測(cè)定(采用高效液相色譜法)，提取物中主要有效成分阿魏酸的含量大于25％。
2、本發(fā)明的注射用制劑采用超濾法除菌，保證了藥品的穩(wěn)定性。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性好，回收率高，測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確，提高了冰七制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可全面有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，從而確保其療效。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
本發(fā)明的實(shí)施例1所述膠囊劑質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰白色顆?；蚍勰?；鑒別(1)取藥物內(nèi)容物1.7g，加乙醚20ml，超聲處理5分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝5∶14為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取藥物內(nèi)容物0.5g，加水約5滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇5ml，密塞，振搖約10分鐘，放置2小時(shí)，離心，取上清液，加3倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶40∶22∶10、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝30∶70為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；
對(duì)照品溶液的制備 取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.15mg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項(xiàng)下藥物內(nèi)容物0.25g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本膠囊劑含三七以人參皂苷Rg1C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于18mg/g。
本發(fā)明的實(shí)施例2所述片劑質(zhì)量控制方法包括性狀藥物顯灰白色；鑒別(1)取本制劑3g，加乙醚50ml，超聲處理20分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含10mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝3∶18為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑3g，加水10滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇10ml，密塞，振搖約30分鐘，放置5小時(shí)，離心，取上清液，加5倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝20∶30∶10∶20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10∶90為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本制劑0.5g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取60分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本片劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于10mg/g。
本發(fā)明的實(shí)施例3所述顆粒劑質(zhì)量控制方法包括性狀藥物為灰白色顆粒；鑒別(1)取本制劑0.5g，加乙醚10ml，超聲處理3分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2∶20為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑0.1g，加水2滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇2ml，密塞，振搖約5分鐘，放置0.5小時(shí)，離心，取上清液，加1倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各25μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶乙腈∶水＝10∶50∶35∶5、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典顆粒項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇∶0.05％磷酸溶液＝20∶80為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.05mg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本制劑0.1g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取10分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本顆粒劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于2mg/g。
權(quán)利要求
1.一種冰七制劑的質(zhì)量控制方法，所述制劑包括膠囊劑、片劑和顆粒劑，其特征在于所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中冰片和三七的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中三七所含人參皂苷Rg1、Rb1的含量測(cè)定。
2.按照權(quán)利要求1所述冰七制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于冰片的鑒別方法是以冰片對(duì)照品為對(duì)照，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2-5∶14-20為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
3.按照權(quán)利要求1所述冰七制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于三七的鑒別方法是以三七對(duì)照藥材為對(duì)照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶水＝10-20∶30-50∶10-35∶5-20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑的薄層色譜法。
4.按照權(quán)利要求1、2或3所述冰七制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部(1)取本制劑或其內(nèi)容物0.5-3g，加乙醚10-50ml，超聲處理3-20分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1-10mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2-5∶14-20為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑或其內(nèi)容物0.1-3g，加水2-10滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇2-10ml，密塞，振搖約5-30分鐘，放置0.5-5小時(shí)，離心，取上清液，加1-5倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶水＝10-20∶30-50∶10-35∶5-20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5.按照權(quán)利要求1所述冰七制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于三七中人參皂苷Rg1、Rb1的含量測(cè)定方法是以人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
6.按照權(quán)利要求1或5所述冰七制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的含量測(cè)定方法為照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.05-0.5mg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本制劑或其內(nèi)容物0.1-0.5g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取10-60分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本膠囊劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于18mg/g；片劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于10mg/g；顆粒劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于2mg/g。
7.按照權(quán)利要求1所述冰七制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對(duì)于膠囊劑內(nèi)容物為灰白色顆?；蚍勰?；對(duì)于片劑藥物顯灰白色；對(duì)于顆粒劑藥物為灰白色顆粒；鑒別(1)取本制劑或其內(nèi)容物0.5-3g，加乙醚10-50ml，超聲處理3-20分鐘，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1-10mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-20μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶環(huán)己烷＝2-5∶14-20為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以硫酸，在70℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)取本制劑或其內(nèi)容物0.1-3g，加水2-10滴，攪勻，再加以水飽和的正丁醇2-10ml，密塞，振搖約5-30分鐘，放置0.5-5小時(shí)，離心，取上清液，加1-5倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置或離心使分層，取正丁醇層，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對(duì)照藥材，同法制得對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇或乙腈∶水＝10-20∶30-50∶10-35∶5-20、10℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以1→10硫酸溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；檢查應(yīng)符合中國(guó)藥典膠囊劑、片劑或顆粒項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照中國(guó)藥典高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇或乙腈∶0.05％磷酸溶液＝10-30∶90-70為流動(dòng)相；流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃；理論板數(shù)以人參皂苷Rg1峰計(jì)算不得低于4000；對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1、Rb1對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1ml各含0.05-0.5mg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本制劑或其內(nèi)容物0.1-0.5g，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超聲提取10-60分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，0.45μm濾過(guò)，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本膠囊劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于18mg/g；片劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于10mg/g；顆粒劑含三七以人參皂苷Rg1 C42H72O14和人參皂苷Rb1 C54H92O23的總量計(jì)，不得少于2mg/g。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種冰七制劑的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測(cè)定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對(duì)制劑中冰片和三七的薄層色譜鑒別；含量測(cè)定是對(duì)制劑中三七所含人參皂苷Rg
文檔編號(hào)G01N33/15GK1857353SQ20061020029
公開(kāi)日2006年11月8日 申請(qǐng)日期2006年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月30日
發(fā)明者葉湘武, 安崇惠, 田淑華, 徐裕彬, 江帆, 潘婷 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司