專利名稱:頭花蓼藥材、提取物及其質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及頭花蓼藥材及其提取物和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù):
頭花蓼為蓼科植物頭花蓼(Polygonum capitatum Buch.-Han.ex D.Don)的干燥全草或地上部分。頭花蓼作為藥用,最早收載于1963年版《廣西中藥志》稱其為石莽草、石辣蓼,“味辛,微澀,性溫,散瘀止痛,治風(fēng)濕,跌打。”《廣西中草藥》記載其味“苦,辛,性平”,解毒消炎,治痢疾,皮膚潰瘍,無(wú)名腫毒。《云南中草藥》稱其為太陽(yáng)草,味酸,性涼。清熱利尿,通淋,治血尿,膀胱炎?!段纳街胁菟帯贩Q其為滿地紅、火溜草,治療布疹、黃水瘡。《貴州中草藥名錄》稱其為省丁草、四季紅,其味酸,性涼,清熱解毒,利水消腫,治腎炎水腫、腮腺炎、跌打腫痛、無(wú)名腫毒?!度珖?guó)中草藥匯編》治“泌尿系統(tǒng)感染、痢疾、腹瀉、血尿;尿布疹、黃水瘡”?!顿F州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》味苦,辛,性涼,清熱利濕,解毒止痛,活血散瘀,利尿通淋。用于痢疾、腎盂腎炎、膀胱炎、尿路結(jié)石、盆腔炎、前列腺炎、風(fēng)濕痛、跌打損傷、瘡瘍濕疹。近年來(lái),以頭花蓼為原料已成功地開(kāi)發(fā)出泌感靈干糖漿,熱淋清顆粒,熱淋清膠囊,熱淋清滴丸,熱淋清糖漿,泌淋膠囊,泌淋顆粒,寧泌泰膠囊,通淋舒顆粒,泌淋清膠囊等一系列苗藥制劑,在臨床上發(fā)揮了較好的治療作用。
經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),同科同屬同組植物尼泊爾蓼(頭狀蓼)Polygonum nepalense Meisn易被認(rèn)作頭花蓼。頭狀蓼具有清熱解毒,收斂固腸,祛濕的功效,與頭花蓼功效不同,兩者不可混用。但兩種藥材在性狀上很難區(qū)別,粉末顯微鑒別也難區(qū)別。在2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中是以槲皮素作為質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)。對(duì)于成分復(fù)雜的頭花蓼僅以槲皮素作為質(zhì)量控制指標(biāo)是不全面的。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種質(zhì)量穩(wěn)定、均一、可控性強(qiáng)的頭花蓼藥材,本發(fā)明所述解決的另一技術(shù)問(wèn)題是提供了該藥材的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明提供了一種頭花蓼藥材,它具有如圖1D所示的HPLC指紋圖譜,含有13個(gè)特征峰,其中,色譜條件為色譜柱依利特Hypersil ODS色譜柱(4.6mm×150mm,5μm);柱溫25℃;流動(dòng)相乙腈(A)-0.4%磷酸(B)溶液二元梯度洗脫,重量百分比為0-30%∶100-70%;流速0.8mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)310nm;進(jìn)樣量20μl。
其中,所述的13個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰0.083±0.001、2號(hào)峰0.178±0.001、3號(hào)峰0.357±0.001、4號(hào)峰0.388±0.001、5號(hào)峰0.460±0.001、6號(hào)峰0.520±0.001、7號(hào)峰0.544±0.002、8號(hào)峰0.792±0.002、9號(hào)峰0.848±0.002、10號(hào)峰0.888±0.001、11號(hào)峰1、12號(hào)峰1.266±0.002、13號(hào)峰1.296±0.002。
本發(fā)明還提供了一種頭花蓼提取物,它是由頭花蓼藥材為原料,經(jīng)水或有機(jī)溶劑提取制備而成。
本發(fā)明提供了一種藥物組合物,它是由所述的頭花蓼原生藥材或所述的頭花蓼提取物為活性成分,加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
所述的藥劑是口服制劑、注射制劑。
本發(fā)明還提供了一種控制頭花蓼藥材的質(zhì)量控制方法,它包括如下步驟a、制備沒(méi)食子酸參照物溶液取沒(méi)食子酸加50%甲醇溶解制成0.0204mg·mL-1的溶液;b、制備槲皮素參照物溶液取槲皮素對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成0.0216mg·mL-1的溶液;c、制備槲皮苷參照物溶液取槲皮苷對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成0.0992mg·mL-1的溶液;d、供試品溶液的制備取頭花蓼細(xì)粉,加100ml80%乙醇,置水浴中加熱回流,濾過(guò),殘?jiān)偃胗?0%乙醇回流提取,濾過(guò),合并濾液。濾液置蒸發(fā)皿中揮干,殘?jiān)?0%乙醇定容,用微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得;e、色譜條件色譜條件為色譜柱依利特Hypersil ODS色譜柱(4.6mm×150mm,5μm);柱溫25℃;流動(dòng)相乙腈(A)-0.4%磷酸(B)溶液二元梯度洗脫,重量百分比為0-30%100-70%;流速0.8mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)310nm;進(jìn)樣量20μl。
f、測(cè)定法取對(duì)照品和供試品溶液各15ul,注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖。
本發(fā)明所建立的方法及其得出的指紋圖譜,指紋圖譜中有三個(gè)色譜峰進(jìn)行了歸屬,同時(shí)指紋圖譜中有十三個(gè)峰是穩(wěn)定的,可作為頭花蓼的指紋特征峰。色譜指紋圖譜具有整體性、模糊性和可以量化的特點(diǎn),可以充分地、全面地反映中藥的整體質(zhì)量,是目前最佳的控制中藥質(zhì)量的模式,也是比較科學(xué)的評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的方法。為了彌補(bǔ)頭花蓼質(zhì)量控制技術(shù)的不足,使其更加完善、科學(xué)。本發(fā)明質(zhì)量控制方法對(duì)不同產(chǎn)地頭花蓼進(jìn)行了考察比較,構(gòu)建了頭花蓼HPLC的指紋圖譜,利用HPLC指紋特征可全面監(jiān)控頭花蓼藥材的質(zhì)量,保證其穩(wěn)定、均一、可控,建立的HPLC指紋圖譜可以明顯的區(qū)別合格與不合格藥材。同時(shí),該質(zhì)量控制方法能有效地控制藥材的質(zhì)量,達(dá)到控制整個(gè)藥物制劑的目的。
顯然,根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容,按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段,在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下,還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
,對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
圖1頭花蓼和頭狀蓼的HPLC指紋圖譜(其中,圖1A-沒(méi)食子酸 圖1B-槲皮苷 圖1C-槲皮素 圖1D-頭花蓼 圖1E-頭狀蓼)圖2穩(wěn)定性試驗(yàn)相似度評(píng)價(jià)結(jié)果圖3精密度試驗(yàn)相似度評(píng)價(jià)結(jié)果圖4重復(fù)性試驗(yàn)相似度評(píng)價(jià)結(jié)果5頭狀蓼與頭花蓼藥材對(duì)照指紋圖譜的比較圖(S1-頭花蓼S2-頭狀蓼)圖6不同產(chǎn)地頭花蓼的HPLC指紋圖譜(S1-貴州貴陽(yáng) S2-貴州劍河 S3-貴州錦屏 S4-貴州安順 S5-貴州施秉 S6-四川米易 S7-四川峨眉(向陽(yáng)處) S8-四川峨眉(陰暗處) S9-四川成都 S10-云南昆明 S11-云南大理 S12-西藏墨脫)圖7不同采收期頭花蓼的HPLC指紋圖譜圖8有機(jī)溶劑回流提取色譜圖(其中,圖8A、甲醇超聲提取色譜圖;圖8B、80%乙醇超聲提取色譜圖;圖8C、80%甲醇超聲提取色譜圖;圖8D、甲醇回流提取色譜圖;圖8E、80%乙醇回流提取色譜圖;圖8F、80%甲醇回流提取色譜圖)圖9甲醇-0.4%磷酸梯度洗脫頭花蓼HPLC色譜10乙腈-0.4%磷酸梯度洗脫頭花蓼HPLC色譜圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1本發(fā)明藥物的制備制法取頭花蓼切段,加水煮二次,每次1.5小時(shí),合并煎液,靜置,濾過(guò),濾液濃縮成稠膏,干燥,粉碎,加輔料適量,混勻,裝膠囊,即得。
性狀本品為膠囊劑,內(nèi)容物為棕褐色粉末;氣微,味微澀。
鑒別取本品3g加甲醇20ml,水浴回流1小時(shí),濾過(guò),濾液濃縮至約2ml,上氧化鋁柱(中性氧化鋁3g,100~200目,105℃干燥30分鐘,柱內(nèi)徑1cm),用甲醇50ml洗脫,收集脫液,水浴上濃縮至約1ml,作為供試品溶液。另取頭花蓼對(duì)照藥材1.5g,加水20ml,煮沸30分鐘,濾過(guò),濾液濃縮至干,加甲醇2ml溶解,同法制成對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)。試驗(yàn),吸取上述兩種溶液各5μl,分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄層板上,以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,氨氣中薰1分鐘,置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(附錄I L)。
功能與主治清熱瀉火,利水通淋。主治熱淋。
用法與用量口服,一次4~6粒,一日3次。
實(shí)施例2本發(fā)明藥物顆粒劑的制備制法取頭花蓼1000g加水煎煮二次,每次1.5小時(shí),合并煎液,濾過(guò),濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38(80℃)的稠膏,干燥,粉碎,制成顆粒,干燥,制成400g,或加入適量的蔗糖粉,混勻,制成顆粒,干燥,制成800g,即得。
性狀本品為棕褐色至深褐色的顆粒;氣香,味甜、略澀。
鑒別取本品3g(無(wú)糖型)或6g(含糖型),加甲醇20ml,水浴回流1小時(shí),濾過(guò),濾液濃縮至約2ml,加在氧化鋁柱(中性氧化鋁3g,100~200目,105℃干燥30分鐘;柱內(nèi)徑為1cm)上,用甲醇50ml洗脫,收集洗脫液,置水浴上濃縮至干,殘?jiān)蛹状?ml使溶解,作為供試品溶液。
另取頭花蓼對(duì)照藥材1.5g,加水20ml,煮沸30分鐘,濾過(guò),濾液濃縮至干,殘?jiān)蛹状?ml使溶解,照供試品溶液制備方法,自加在氧化鋁柱上起依法制成對(duì)照藥材溶液。
照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn),吸取上述兩種溶液各5μ1,分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上,以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置氨氣中熏1分鐘,置紫外光燈(365nm)下檢視。
供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
檢查應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(附錄I C)。
功能與主治清熱解毒,利尿通淋。
用于濕熱蘊(yùn)結(jié),小便黃赤、淋漓澀痛之癥,尿路感染,腎盂腎炎見(jiàn)上述證候者。
實(shí)施例3本發(fā)明控制頭花蓼藥材的方法一、實(shí)驗(yàn)材料與儀器1、藥材采自貴州、四川、云南、西藏,共15批,經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)萬(wàn)德光教授鑒定為蓼科植物頭花蓼Polygonum capitatum Buch.-Ham.ex D.Don的干燥全草。頭狀蓼為蓼科植物尼泊爾蓼Polygonum nepalense Meisn的干燥全草,采至四川峨眉山。
2、儀器及試劑Waters2695高效液相色譜儀,二級(jí)管陣列檢測(cè)器,Empower色譜工作站,SB2200型超聲清洗器。沒(méi)食子酸對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)0638-9501),槲皮素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)081-90003),槲皮苷對(duì)照品(自制,純度>98%),乙腈為色譜醇,其它試劑均為分析純,水為重蒸鎦水。
二、方法與結(jié)果1、參照物溶液的制備
1.1沒(méi)食子酸參照物溶液的制備精密稱取沒(méi)食子酸對(duì)照品適量,加50%甲醇溶解制成0.0204mg·mL-1的溶液,即得。
1.2槲皮素參照物溶液的制備精密稱取槲皮素對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成0.0216mg·mL-1的溶液,即得。
1.3槲皮苷參照物溶液的制備精密稱取槲皮苷對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成0.0992mg·mL-1的溶液,即得。
2、供試品溶液的制備取頭花蓼細(xì)粉(3號(hào)篩)2g,精密稱定,置圓底燒瓶中,分別加100ml80%乙醇,置水浴中加熱回流2h,濾過(guò),殘?jiān)?00ml80%乙醇回流提取1h,濾過(guò),合并濾液。濾液置蒸發(fā)皿中揮干,殘?jiān)?0%乙醇定容置10ml容量瓶中。用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
取頭狀蓼細(xì)粉(3號(hào)篩)2g,精密稱定,置圓底燒瓶中,加100ml80%乙醇,置水浴中加熱回流2h,濾過(guò),殘?jiān)?00ml80%乙醇回流提取1h,濾過(guò),合并濾液。濾液置蒸發(fā)皿中揮干,殘?jiān)?0%乙醇定容置10ml容量瓶中。用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
3、色譜條件色譜柱依利特Hypersil ODS色譜柱(4.6mm×150mm,5μm);柱溫25℃;流動(dòng)相乙腈(A)-0.4%磷酸(B)溶液二元梯度洗脫見(jiàn)表1;流速0.8mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)310nm;進(jìn)樣量20μl。
表1 線性梯度洗脫流動(dòng)相配比變化
4、空白試劑試驗(yàn)取制備供試品溶液的試劑(80%乙醇),進(jìn)樣15ul,記錄色譜圖,從色譜圖可知,所用試劑對(duì)指紋圖譜測(cè)定基本無(wú)干擾。
5、測(cè)定法取對(duì)照品和供試品溶液各15ul,注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖。見(jiàn)圖1。
6、方法學(xué)考察以貴州錦屏產(chǎn)頭花蓼藥材為樣品,對(duì)其穩(wěn)定性、儀器精密度、實(shí)驗(yàn)方法、重現(xiàn)性作了相應(yīng)考察,結(jié)果證明穩(wěn)定性及重現(xiàn)性良好。
6.1穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一份供試品溶液,分別在0、2、6、12、20、30h進(jìn)行檢測(cè),直觀觀察指紋圖譜的全貌無(wú)明顯差別,用相似度軟件計(jì)算,在同一臺(tái)儀器測(cè)定色譜指紋圖譜的相似度分別為0.984,0.994,0.995,0.961,0.992,0.982,均大于0.95。以槲皮苷峰為參照峰,考察色譜峰相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的一致性,各主要色譜峰相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均低于3。見(jiàn)表2、表3、見(jiàn)圖2。
表2穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
表3穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
6.2精密度試驗(yàn) 取同一份供試品溶液,重復(fù)進(jìn)樣6次,直觀觀察指紋圖譜的全貌無(wú)明顯差別,用相似度軟件計(jì)算,在同一臺(tái)儀器測(cè)定色譜指紋圖譜的相似度分別為0.999,0.996,0.998,0.999,0.996,均大于0.95。以槲皮苷峰為參照峰,考察色譜峰相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的一致性,各主要色譜峰相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均低于3。見(jiàn)表4、5,見(jiàn)圖3。
表4 精密度試驗(yàn)結(jié)果
表5精密度試驗(yàn)結(jié)果
6.3重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一產(chǎn)地的供試品5份,同法檢測(cè),直觀觀察指紋圖譜的全貌無(wú)明顯差別,用相似度軟件計(jì)算,在同一臺(tái)儀器測(cè)定色譜指紋圖譜的相似度分別為0.992,0.951,0.995,0.993,0.979,均大于0.95。以槲皮苷峰為參照峰,考察色譜峰相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的一致性,各主要色譜峰相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均低于3。見(jiàn)表6、7,見(jiàn)圖4。
表6重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果
表7重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果
6.4專屬性實(shí)驗(yàn) 頭狀蓼與頭花蓼的指紋圖譜相比,相似度為0.304,表明該指紋圖譜能區(qū)別出其他藥材。結(jié)果見(jiàn)圖5。
6.4指紋圖譜建立 精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各20ul,注入高效液相色譜儀,按選定的色譜條件,進(jìn)行檢測(cè)。同一實(shí)驗(yàn)條件下,測(cè)定所有供試品HPLC色譜圖。根據(jù)不同產(chǎn)地、不同采收時(shí)間供試品測(cè)定結(jié)果所給出的峰數(shù)、峰值(積分值)和峰位(相對(duì)保留時(shí)間)等相關(guān)參數(shù)進(jìn)行分析、比較,制定優(yōu)化的指紋圖譜(見(jiàn)圖6、7)6.5指紋圖譜分析及數(shù)據(jù)處理6.5.1共有指紋峰標(biāo)定比較不同產(chǎn)地頭花蓼及不同采收期頭花蓼供試品溶液給出的相關(guān)參數(shù),其中13個(gè)峰是各批供試品共有,因此確定這13個(gè)峰為其共有指紋峰,其中槲皮苷峰較沒(méi)食子酸峰及槲皮素峰大,選作為參照峰,不同產(chǎn)地及不同采收期頭花蓼指紋圖譜共有峰的相對(duì)保留時(shí)間見(jiàn)表8。
表8頭花蓼樣品的相對(duì)保留時(shí)間
注11號(hào)為11月采集品;13、14、15號(hào)分別為8、10、3月采集品,其它均為9月6.5.2頭花蓼指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)將12個(gè)不同產(chǎn)地、4個(gè)不同采收期頭花蓼樣品測(cè)定數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥指紋圖譜相似度計(jì)算軟件,經(jīng)選峰,設(shè)定匹配模板,將峰自動(dòng)匹配,然后設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)模板,進(jìn)行譜峰差異性評(píng)價(jià)和整體相似性評(píng)價(jià)。通過(guò)中藥指紋圖譜相似度計(jì)算軟件得出頭花蓼HPLC指紋圖譜共有模式,與共有模式比較,12個(gè)批次不同產(chǎn)地頭花蓼的相似度結(jié)果見(jiàn)表,4批次不同采收期頭花蓼的相似度結(jié)果見(jiàn)表9、10。
表9不同產(chǎn)地頭花蓼結(jié)果
注7號(hào)樣為峨眉山向陽(yáng)處植物;8號(hào)樣為峨眉山陰涼處植物;表10不同采收期結(jié)果
實(shí)施例4 本發(fā)明藥材質(zhì)量控制方法的條件篩選1、樣品提取條件的選擇為了盡可能地體現(xiàn)頭花蓼所含化學(xué)成分的特征。根據(jù)頭花蓼所含成分的性質(zhì),選擇了80%甲醇、甲醇、80%乙醇為提取溶劑,提取方法考察了熱回流、超聲提取,其中以80%乙醇回流提取較完全,并且80%乙醇較甲醇安全。見(jiàn)圖8。
2、檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇采用二極管陣列200~400nm掃描,綜合考慮頭花蓼中各主要成分的吸收光譜,使各被測(cè)組分均有較大吸收,選用310nm為指紋圖譜檢測(cè)波長(zhǎng)。
3、流動(dòng)相的選擇比較了乙腈-0.4%磷酸溶液系統(tǒng)和甲醇-0.4%磷酸溶液系統(tǒng)下的色譜圖,發(fā)現(xiàn)乙腈-0.4%磷酸溶液系統(tǒng)梯度洗脫的柱壓較低,同時(shí)發(fā)現(xiàn)流動(dòng)相的改變對(duì)其基線影響較小,所以選擇乙腈-0.4%磷酸溶液系統(tǒng)為流動(dòng)相。見(jiàn)圖9、10。
4、頭花蓼藥材的鑒別和評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)確定的樣品制備方法和色譜條件測(cè)定的指紋圖譜同樣可以進(jìn)行頭花蓼與頭狀蓼的鑒別。從圖譜中可看出,頭狀蓼的槲皮苷峰基本檢測(cè)不出,色譜圖的全貌也明顯不同于頭花蓼,將其色譜圖與頭花蓼的指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià),相似度僅為0.304。
5、不同產(chǎn)地頭花蓼藥材的評(píng)價(jià)通過(guò)指紋圖譜相似度軟件對(duì)12批不同產(chǎn)地頭花蓼進(jìn)行評(píng)價(jià)得出,貴州施秉栽培的頭花蓼與共有模式比較,相似度僅為0.130,而其他產(chǎn)地頭花蓼樣品與共有模式比較相似度均大于0.910,說(shuō)明12批不同產(chǎn)地頭花蓼藥材中除貴州施秉栽培樣品外,其他產(chǎn)地頭花蓼之間具有較好的相似性。
權(quán)利要求
1.頭花蓼藥材,其特征在于它具有如圖1D所示的HPLC指紋圖譜,含有13個(gè)特征峰,其中,色譜條件為色譜柱依利特Hypersil ODS色譜柱(4.6mm×150mm,5μm);柱溫25℃;流動(dòng)相乙腈(A)-0.4%磷酸(B)溶液二元梯度洗脫,重量百分比為0-30%∶100-70%;流速0.8mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)310nm;進(jìn)樣量20μl。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的頭花蓼藥材,其特征在于所述的13個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為1號(hào)峰0.083±0.001、2號(hào)峰0.178±0.001、3號(hào)峰0.357±0.001、4號(hào)峰0.388±0.001、5號(hào)峰0.460±0.001、6號(hào)峰0.520±0.001、7號(hào)峰0.544±0.002、8號(hào)峰0.792±0.002、9號(hào)峰0.848±0.002、10號(hào)峰0.888±0.001、11號(hào)峰1、12號(hào)峰1.266±0.002、13號(hào)峰1.296±0.002。
3.一種頭花蓼提取物,它是由權(quán)利要求1或2所述的頭花蓼藥材為原料,經(jīng)水或有機(jī)溶劑提取制備而成。
4.一種藥物組合物,它是由權(quán)利要求1或2所述的頭花蓼原生藥材或權(quán)利要求3所述的頭花蓼提取物為活性成分,加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物,其特征在于所述的藥劑是口服制劑、注射制劑。
6.一種控制權(quán)利要求1或2所述的頭花蓼藥材質(zhì)量的方法,它包括如下步驟a、制備沒(méi)食子酸參照物溶液取沒(méi)食子酸加50%甲醇溶解制成0.0204mg·mL-1的溶液;b、制備槲皮素參照物溶液取槲皮素對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成0.0216mg·mL-1的溶液;c、制備槲皮苷參照物溶液取槲皮苷對(duì)照品適量,加甲醇溶解制成0.0992mg·mL-1的溶液;d、供試品溶液的制備取頭花蓼細(xì)粉,加100ml 80%乙醇或甲醇,置水浴中加熱回流,濾過(guò),殘?jiān)偃胗?0%乙醇回流提取,濾過(guò),合并濾液。濾液置蒸發(fā)皿中揮干,殘?jiān)?0%乙醇定容,用微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得;e、色譜條件色譜條件為色譜柱依利特Hypersil ODS色譜柱(4.6mm×150mm,5μm);柱溫25℃;流動(dòng)相乙腈-0.4%磷酸溶液或甲醇-0.4%磷酸溶液二元梯度洗脫,重量百分比為0-30%∶100-70%;流速0.8mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)310nm;進(jìn)樣量20μl。f、測(cè)定法取對(duì)照品和供試品溶液各15ul,注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的頭花蓼藥材的質(zhì)量控制方法,其特征在于步驟d所述的溶劑為80%乙醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的頭花蓼藥材的質(zhì)量控制方法,其特征在于步驟e所述的流動(dòng)相為乙腈-0.4%磷酸溶液。
全文摘要
本發(fā)明提供了頭花蓼藥材,它具有如圖1D所示的HPLC指紋圖譜,含有13個(gè)特征峰,其中,色譜條件為色譜柱依利特Hypersil ODS色譜柱(4.6mm×150mm,5μm);柱溫25℃;流動(dòng)相乙腈(A)-0.4%磷酸(B)溶液二元梯度洗脫,重量百分比為0-30%∶100-70%;流速0.8mL·min
文檔編號(hào)G01N30/02GK101091749SQ20061002122
公開(kāi)日2007年12月26日 申請(qǐng)日期2006年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月22日
發(fā)明者萬(wàn)德光, 王祥培 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)