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人工脂質(zhì)膜形成方法

文檔序號:4989900閱讀:635來源:國知局
專利名稱:人工脂質(zhì)膜形成方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種用于生物傳感或膜蛋白質(zhì)解析的人工脂質(zhì)膜的形成方法。
背景技術(shù)
專利文獻1 3公開了具有受體的利用優(yōu)異的分子識別功能的生物傳感器。該生物傳感器具備含有受體和離子通道的人工脂質(zhì)膜?,F(xiàn)有的人工脂質(zhì)膜的形成方法的例子為(1)吹泡涂付法(泡吹t付《"法)、(2)粘合法(貼合打姑法)和(3) μ TAS(Micro Total Analysis System 微型全分析系統(tǒng))(例如非專利文獻1)。圖20表示利用吹泡涂附法的現(xiàn)有的人工脂質(zhì)膜的形成方法。圖20中,容器10的內(nèi)部以由特富龍(Teflon,注冊商標)或聚苯乙烯這樣的具有疏水性的樹脂構(gòu)成的平板11 分隔。以平板11分隔的空間充滿電解液12。含有脂質(zhì)分子和有機溶劑的脂質(zhì)溶液14利用15向在平板11上打開的微孔13涂布。涂布于微孔13上的脂質(zhì)溶液14中所含有的剩余有機溶劑慢慢移動到微孔13的邊緣而除去。以涂布30分鐘開始到3小時左右的時間形成人工脂質(zhì)膜。該脂質(zhì)的例子為二植烷酰卵磷脂或甘油單甘油酯這樣的磷脂。該有機溶劑的例子為癸烷、十六烷或己烷這樣的飽和烴。圖21 (a) (c)表示通過貼合法的現(xiàn)有的人工脂質(zhì)膜的形成方法。在圖21 (a)中, 容器20的內(nèi)部以具有疏水性表面的平板21分隔。該平板21由特富龍(Teflon,注冊商標) 或聚苯乙烯這樣的樹脂構(gòu)成。首先,作為預(yù)處理,向在平板21打開的微孔22涂布角鯊烯。在容器20的一個腔室內(nèi),以電解液23的液面的高度不超過微孔22下端的高度的程度,從注入口 M注入電解液23。接著,從容器20的上方,向電解液23滴下脂質(zhì)溶液(脂質(zhì)分子25和有機溶劑的混合液),放置數(shù)分鐘。如圖21 (a)所示,在電解液23的氣-液界面形成脂質(zhì)單分子膜。脂質(zhì)分子25具有親水性部分和疏水性部分,脂質(zhì)分子25的親水性部分的取向方向為朝向電解液23的方向。接著,如圖21 (b)所示,從注入口 M注入電解液23,直到電解液23的液面的高度通過微孔22上端的高度。在容器20的另一個腔室內(nèi),進行相同的操作。S卩,如圖21(c)所示,以液面的高度不超過微孔22下端高度的程度,從注入口 27注入電解液沈。接著,從容器20的上方,向電解液26滴下脂質(zhì)溶液,放置數(shù)分鐘。在電解液沈的氣-液界面形成脂質(zhì)單分子膜。從注入口 27注入電解液沈,直到電解液沈的液面的高度通過微孔22上端的高度。這樣操作, 在之前形成于微孔22的脂質(zhì)單分子膜上,再貼合另一層脂質(zhì)單分子膜。其結(jié)果,在微孔22 形成人工脂質(zhì)膜。要使用上述的2個方法以高度的再現(xiàn)性形成穩(wěn)定的人工脂質(zhì)膜,需要十分熟練。為了更加簡便地形成人工脂質(zhì)膜,專利文獻1 4公開了使用μ TAS技術(shù)而形成
4人工脂質(zhì)膜的方法。圖22表示如專利文獻1中記載的使用μ TAS技術(shù)的小型的人工脂質(zhì)膜形成裝置。 圖22所示的人工脂質(zhì)膜形成裝置具備第1室31和由隔板32從第1室31隔開的第2室 33。隔板32具備至少一個流體性連通第1室31和第2室33的小孔34。使用該人工脂質(zhì)膜形成裝置,如下形成人工脂質(zhì)膜。首先第1室31以第1水溶液充滿,接著第2室33以脂質(zhì)溶液充滿。通過小孔34,第1水溶液與脂質(zhì)溶液接觸。然后充滿第2室33的脂質(zhì)溶液通過與第2水溶液置換,在小孔34形成人工脂質(zhì)膜35?,F(xiàn)有技術(shù)文獻專利文獻專利文獻1 日本特開2005-098718號公報(第15頁,圖5)專利文獻2 日本特開平5-007770號公報(第3頁,圖1)專利文獻3 日本特開平8-15Μ23號公報(第3頁,圖1)專利文獻4 日本特開平4-215052號公報(第5頁,圖1)非專利文獻非專利文獻1 岡田泰伸著《^"夕7 実験技術(shù)法》,吉岡書店1996年9月 25 日(P. 133-139)

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明所要解決的問題專利文獻1中所公開的人工脂質(zhì)膜形成裝置,由于小型且易于搬運,因此具有非常優(yōu)異的便利性。但是,從人工脂質(zhì)膜形成中到形成后,由于攜帶移動對人工脂質(zhì)膜形成裝置施加振動,或者傾斜或倒置人工脂質(zhì)膜形成裝置,因此人工脂質(zhì)膜形成裝置內(nèi)部的電解液會從注入口 /排出口的開口部泄露到腔室之外。其結(jié)果,人工脂質(zhì)膜形成裝置質(zhì)變被電解液污染。而且,由于小型的人工脂質(zhì)膜形成裝置保有微量的電解液,因此電解液急速地揮發(fā)從而不能穩(wěn)定地形成人工脂質(zhì)膜。本發(fā)明的目的在于提供解決上述現(xiàn)有的問題、通過防止電解液向腔室外的泄露和電解液的急速揮發(fā)而穩(wěn)定地形成人工脂質(zhì)膜的方法。用于解決問題的方法本發(fā)明涉及具備以下工序A E的人工脂質(zhì)膜形成方法準備以下的人工脂質(zhì)膜形成裝置(100)的工序Α,這里,上述人工脂質(zhì)膜形成裝置(100)具備第1 腔室(104),第2 腔室(105),夾置于上述第1腔室(104)和上述第2腔室(105)之間的隔板(102),由設(shè)置于上述隔板(102)的貫通孔構(gòu)成的人工脂質(zhì)膜形成部(103),上述第1腔室(104)具有IOpl以上、200 μ 1以下的容量,上述第2腔室(105)具有IOpl以上、200 μ 1以下的容量;向上述第1腔室(104)注入具有1. 3mPa-s以上、200mPa 以下的粘度的第1電解液O01)的工序B ;
向上述人工脂質(zhì)膜形成部(10 注入含有脂質(zhì)(20 和有機溶劑的脂質(zhì)溶液 (202)的工序C ;向上述第2腔室(105)注入具有1. 3mPa · s以上、200mPa · s以下的粘度的第2 電解液004),在上述第1電解液O01)和上述第2電解液Q04)之間夾著上述脂質(zhì)溶液 (202)的工序D ;和除去上述有機溶劑,在上述人工脂質(zhì)膜形成部(10 形成人工脂質(zhì)膜的工序E。優(yōu)選上述第1電解液(201)或上述第2電解液(204)中的至少一方含有羥基的有機化合物。優(yōu)選上述含有羥基的有機化合物為醇。優(yōu)選上述醇為低級醇。優(yōu)選上述醇為甘油。優(yōu)選上述第1電解液O01)或上述第2電解液Q04)中的至少一方含有高分子。優(yōu)選上述高分子為聚乙烯醇。在上述工序B中,優(yōu)選上述第1電解液O01)通過噴墨法向上述第1腔室(104)注入。在上述工序D中,優(yōu)選上述第2電解液(204)通過噴墨法向上述第2腔室(105)注入。在上述工序C中,優(yōu)選上述脂質(zhì)溶液(20 通過噴墨法向上述人工脂質(zhì)膜形成部 (103)注入。本發(fā)明優(yōu)選在上述工序E之后還具備在上述人工脂質(zhì)膜中嵌入受體或離子通道中的至少一種的工序F。在上述工序B中,優(yōu)選上述第1腔室(104)由上述第1電解質(zhì)Q01)充滿。在上述工序D中,優(yōu)選上述第2腔室(105)由上述第2電解質(zhì)(204)充滿。本發(fā)明的上述目的、其它的目的、特征和優(yōu)點通過參考附圖,由下面的優(yōu)選的實施方式的詳細說明而更加明確。發(fā)明的效果根據(jù)本發(fā)明的人工脂質(zhì)膜形成方法,通過保持流動性并且提高電解液的粘度,能夠防止電解液從腔室泄露。其結(jié)果,防止由電解液造成的裝置周邊的污染。而且,由于能夠防止電解液的急速蒸發(fā),從而能夠穩(wěn)定地形成人工脂質(zhì)膜。


圖1表示實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成裝置的斜面投影圖。圖2表示實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成裝置的剖面圖。圖3表示實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成部的一例的貫通孔的剖面。圖4表示實施方式1的第1電解液注入工序。圖5表示實施方式1的從脂質(zhì)注入工序到人工脂質(zhì)膜形成工序的工序。圖6表示使實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成裝置傾斜的狀態(tài)。圖7表示使實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成裝置上下倒置的狀態(tài)。圖8表示實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成裝置以操作員的手攜帶的狀態(tài)。
圖9表示實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成裝置的剖面圖。
圖10表示實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成裝置的分解斜面投影圖。
圖11表示實施方式2的從第1電解液注入工序到第2電解液注入工序的工序。
圖12表示實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成工序。
圖13表示使實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成裝置傾斜的狀態(tài)。
圖14表示使實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成裝置上下倒置的狀態(tài)。
圖15表示實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成裝置以操作員的手攜帶的狀態(tài)。
圖16模式地表示向?qū)嵤┓绞?中的人工脂質(zhì)膜嵌入膜蛋白質(zhì)的狀態(tài)。
圖17表示甘油濃度與電解液的粘度的關(guān)系。
圖18表示PVA濃度與電解液的粘度的關(guān)系。
圖19表示實施方式2中的第1腔室內(nèi)的電解液的顯微鏡照片。
圖20表示現(xiàn)有的人工脂質(zhì)膜形成方法(吹泡涂附法)。
圖21表示現(xiàn)有的人工脂質(zhì)膜形成方法(貼合法)。
圖22表示專利文獻1的人工脂質(zhì)膜形成裝置。
具體實施例方式(實施方式1)以下,邊參考附圖邊說明本發(fā)明的實施方式1。〈工序A準備工序〉圖1和圖2分別表示本發(fā)明的實施方式1中人工脂質(zhì)膜形成裝置100的斜面投影圖和剖面圖。在實施方式1中,人工脂質(zhì)膜形成裝置100具備容器101。容器101的材料的例子為有機材料或無機材料。優(yōu)選有機材料。有機材料可以是熱塑性樹脂,也可以是熱固化樹脂。有機材料可以是通用塑料、工程塑料或超級工程塑料。有機材料的例子為苯酚樹脂、三聚氰胺樹脂、環(huán)氧樹脂、聚酯樹脂、 聚氨酯樹脂、聚酰亞胺樹脂、聚乙烯、聚碳酸酯、聚乙酸乙烯酯、ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯)樹脂、丙烯酸樹脂、聚對苯二甲酸乙二醇酯、氯乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚砜、PEEK(注冊商標;聚醚醚酮)、聚甲醛、環(huán)狀聚烯烴、聚苯硫醚、聚四氟乙烯或聚酰胺酰亞胺。有機材料也可以是復(fù)合樹脂。作為無機材料優(yōu)選為玻璃??梢允褂免c玻璃、石英、硼硅酸玻璃、低熔點玻璃、光敏玻璃。作為玻璃以外的無機材料,可以使用硅、鍺、磷化銦、砷化鎵、氮化鎵、氧化鋁、氧化硅或氮化硅。容器101的材料可以是多種有機材料或無機材料組合而成的材料。容器101的材料也可以是有機材料或無機材料的任一種,優(yōu)選具有絕緣性。優(yōu)選容器101的外周面的至少一部分具有親水性。為了使容器101的外周面的至少一部分為親水性,可以進行氧等離子體處理,也可以以親水性材料進行包被處理。容器 101的材料,優(yōu)選是透明的,從而能夠觀察人工脂質(zhì)膜,但也可以是不透明的。從操作性的觀點,容器101的容量優(yōu)選為2pl以上、2ml以下。容器101的容量更優(yōu)選為Inl以上、400μ1以下。容器101優(yōu)選為立方體,但也可以是圓筒形或多角形。容器101可以為流路或腔室。容器101優(yōu)選通過機械加工而成型。作為機械加工,優(yōu)選注塑成型、擠壓成型、壓縮成型、中空成型、切削加工、模具成型、噴砂、干法蝕亥IJ、濕法蝕亥IJ、納米壓印、銑削、光固化、光刻或熱壓印。容器101優(yōu)選通過半導(dǎo)體工藝加工。隔板102設(shè)置于容器101的內(nèi)部。隔板102優(yōu)選以將容器101分割成至少2個室的方式設(shè)置。隔板102優(yōu)選設(shè)置于容器101的中央部,但也可以設(shè)置于容器101的端部。隔板102的材料中,可以使用可用于容器101的材料中的任一種。也可以利用由與隔板102的材料不同的材料構(gòu)成的薄膜包被隔板102的表面的一部分。包被隔板102的表面的薄膜的厚度優(yōu)選為IOnm以上、IOOym以下。也可以利用由自組織膜(SAM膜)或疏水性的材料構(gòu)成的薄膜包被隔板102的表面的一部分。隔板102的材料可以是有機材料或無機材料的任一種,優(yōu)選具有絕緣性的材料。 隔板102的材料的電阻率優(yōu)選為IOuiQcm以上,更優(yōu)選為IO12Qcm以上。隔板102的材料的介電常數(shù)優(yōu)選為2.0以上、50.0以下,更優(yōu)選為2.0以上、15.0以下。隔板102的表面優(yōu)選為撥水性的。隔板102的表面的接觸角優(yōu)選為90°以上,更優(yōu)選為120°以上、150°以下。隔板102最優(yōu)選為板狀,但也可以是膜狀。隔板102的厚度優(yōu)選為IOnm以上、Imm 以下,更優(yōu)選為30 μ m以上、500 μ m以下。隔板102的厚度可以整個面都相同,也可以不同。 隔板102的面積優(yōu)選為Iym2以上、IOOcm2以下,更優(yōu)選為IOOym2以上、Icm2以下。隔板102優(yōu)選通過機械加工而成型。作為機械加工,優(yōu)選注塑成型、擠壓成型、壓縮成型、中空成型、切削加工、溶液澆鑄、壓延、模具成型、噴砂、干法蝕刻、濕法蝕刻、納米壓印、銑削、光固化、光刻或熱壓印。隔板102優(yōu)選通過半導(dǎo)體工藝加工。隔板102可以在容器101的內(nèi)部設(shè)置1個,也可以設(shè)置2個以上。人工脂質(zhì)膜形成部103優(yōu)選設(shè)置于隔板102的中央部。人工脂質(zhì)膜形成部103也可以設(shè)置于隔板102的端部。人工脂質(zhì)膜形成部103最優(yōu)選是設(shè)置于隔板102的貫通孔。 貫通孔的剖面優(yōu)選為圓形。圖3表示從隔板102的法線方向觀察的作為人工脂質(zhì)膜形成部 103的貫通孔的剖面。圖3(a)表示作為人工脂質(zhì)膜形成部103的貫通孔的剖面為圓形的情況。為了使施加于人工脂質(zhì)膜上的力均勻分散,優(yōu)選貫通孔的剖面為圓形。如圖3(b) (e)所示,貫通孔的剖面可以為橢圓形、多角形、梯形或四邊形。貫通孔更優(yōu)選如圖2所示的錐狀。人工脂質(zhì)膜形成部103其剖面為圓形的貫通孔時,人工脂質(zhì)膜形成部103的直徑優(yōu)選為IOnm以上、Imm以下,更優(yōu)選為50nm以上、200 μ m以下。人工脂質(zhì)膜形成部103的面積,即圖3(a) (e)所示的圖形的面積,優(yōu)選為75nm2以上、0. 75mm2以下。人工脂質(zhì)膜形成部103的內(nèi)壁優(yōu)選為平滑的,但從使人工脂質(zhì)膜穩(wěn)定化的觀點出發(fā),也可以具備凹凸結(jié)構(gòu)或溝結(jié)構(gòu)。人工脂質(zhì)膜形成部103可以與隔板102同樣操作而成型??梢栽诟舭?02設(shè)有一個人工脂質(zhì)膜形成部103,也可以設(shè)有多個人工脂質(zhì)膜形成部103。多個人工脂質(zhì)膜形成部103優(yōu)選設(shè)置為二維陣列狀。多個人工脂質(zhì)膜形成部103 優(yōu)選設(shè)置為正方晶格、斜方晶格、六方晶格、單純長方晶格或面心立方晶格,多個單純長方晶格103的形狀可以全部相同,也可以不同。多個單純長方晶格103的面積可以全部相同,也可以不同。第1腔室104設(shè)置于容器101的一端。第1腔室104優(yōu)選設(shè)置于容器101的內(nèi)壁和隔板102之間,最優(yōu)選利用容器101的內(nèi)壁和隔板102形成。從操作性的觀點出發(fā),第1 腔室104的容量優(yōu)選Ipl以上、Iml以下,更優(yōu)選為IOpl以上、200 μ 1以下。第1腔室104 優(yōu)選具備用于注入電解液的注入口。第1腔室104優(yōu)選具備用于排出電解液的排出口。第 1腔室104可以通過流路與電解液儲槽連接。第1腔室104的容量中可以包括電解液儲槽的容量,也可以不包括??梢栽诘?腔室104的開口部設(shè)置蓋子或栓,也可以在第1腔室 104的開口部貼膜。第2腔室105隔著隔板102設(shè)置于第1腔室104的相反側(cè)。第2腔室105優(yōu)選設(shè)置于容器101的內(nèi)壁和隔板102之間,最優(yōu)選利用容器101的內(nèi)壁和隔板102形成。從操作性的觀點出發(fā),第2腔室105的容量優(yōu)選為Ipl以上、Iml以下,更優(yōu)選為IOpl以上、 200 μ 1以下。第2腔室105的容積可以與第1腔室104的容積相同,也可以不同。第2腔室105優(yōu)選具備用于注入電解液的注入口。第2腔室105優(yōu)選具備用于排出電解液的排出口。第2腔室105可以通過流路與電解液儲槽連接。第2腔室105的容量中可以包括電解液儲槽的容量,也可以不包括。可以在第2腔室105的開口部設(shè)置蓋子或栓,也可以在第2 腔室105的開口部貼膜。接著,說明人工脂質(zhì)膜的形成程序。圖4和圖5表示本發(fā)明的實施方式1中的人工脂質(zhì)膜形成方法。在圖4和圖5中,與圖1和圖2相同的結(jié)構(gòu)使用相同的符號,省略其說明?!垂ば駼第1電解液注入工序>圖4表示第1電解液注入工序。在第1電解液注入工序中,將第1電解液201從第1開口部106注入到第1腔室104內(nèi),利用第1電解液201充滿第1腔室104。第1電解液201優(yōu)選不通過人工脂質(zhì)膜形成部103而從第1腔室104移動到第2腔室105。第1電解液201優(yōu)選含有KC1,優(yōu)選是等滲的KCl溶液。第1電解液201優(yōu)選與細胞內(nèi)的生理條件相同。第1電解液201的PH優(yōu)選為7附近。第1電解液201可以是如 HEPES、磷酸緩沖液(PBQ或磷酸緩沖生理鹽水這樣的緩沖液,也可以是在電生理實驗中使用的一般的溶液。第1電解液201的Ca2+濃度優(yōu)選為10 ΙΟΟηΜ。Ca2+濃度的調(diào)節(jié)中可以使用EGTA這樣的Ca2+螯合劑。第1電解液201優(yōu)選含有Tyrode溶液。第1電解液201優(yōu)選含有NaCl 137mM、 KCl 2. 68mM, CaCl2 1. 8mM, NaH2PO4 0. 32mM、葡萄糖(glucose) 5. 56mM、NaHCO3 1. 16mM。第 1 電解液 201 也可以含有 NaCl 140mM、KCl 5. 4mM、CaCl2 1. 8mM, MgCl2 ImM、NaH2PO4O. 3mM、 葡萄糖(glucose) 5mM、HEPES 5mM(pH7. 4)。第 1 電解液 201 也可以含有 KCl 140mM、MgCl2 ImM、CaCl2 ImM、EGTA 1 OmM, Mg-ATP 2mM、NaOH-HEPES IOmM (pH7. 3)。第1電解液201中的Cl_優(yōu)選取代為非膜透過性的陰離子的S042_、甲磺酸根 (Methanesulfonate)、葡萄糖酸根(gluconate)、谷氨酸根(glutamate)或天冬氨酸根 (aspartate)。第1電解液201優(yōu)選以_20°C冷凍保存,以不使微生物繁殖。第1電解液201 中的陽離子優(yōu)選取代為非膜透過性的有機鹽基。第1電解液201中的陽離子優(yōu)選取代為四乙基胺(tetraethylammonium)或 N-甲基-D-葡糖胺(N-methyl-D-glucamine)。第 1 電解液201中含有的EGTA優(yōu)選取代為BAPTA。第1電解液201也可以含有ATP。為了維持受體的功能,第1電解液201也可以含有0. 1 0. 3mM的GTP。第1電解液201的粘度優(yōu)選為1. 3mPa-s以上、200mPa 以下。從減少電壓下降的觀點和提高離子電導(dǎo)度的觀點出發(fā),第1電解液201優(yōu)選具有流動性。第1電解液201 優(yōu)選為液體狀或半液體狀。第1電解液201的粘度優(yōu)選利用水溶性物質(zhì)調(diào)整。第1電解液201的粘度優(yōu)選利用增粘劑調(diào)整。第ι電解液201的粘度也可以利用含有氫氧基、羧基、氨基或砜基這樣的顯示親水性的官能團的有機化合物調(diào)整。優(yōu)選為碳原子為1以上、10以下的有機化合物,更優(yōu)選為碳原子為1以上、5以下的有機化合物。第1電解液201的粘度優(yōu)選利用醇調(diào)整。醇可以是1元醇或多元醇中的任一種。 醇優(yōu)選為甘油這樣的低級醇。第1電解液201的粘度也可以利用異丙醇、乙二醇、山梨糖醇、木糖醇、二丙二醇、 丁二醇、聚乙二醇、聚氧乙烯甲基葡糖苷、麥芽糖醇、甘露醇或葡萄糖這樣的糖或糖醇進行調(diào)整。作為糖,可以使用單糖類、雙糖類、三糖類、四糖類或多糖類。第1電解液201優(yōu)選具有高于20°C純水的粘度(1. OmPa · s)的粘度。第1電解液201的粘度可以通過高分子進行調(diào)整。第1電解液201的粘度可以利用具有羥基、羧基、氨基或砜基這樣的表示出親水性的官能團的高分子進行調(diào)整。作為高分子,優(yōu)選聚乙烯醇,但也可以使用聚丙烯酰胺或甲基丙烯酸-2-羥乙酯(HEMA)。高分子可以是均聚物或共聚物中的任一種。高分子優(yōu)選為合成高分子,但也可以是半合成高分子或天然高分子。作為高分子, 可以使用阿拉伯膠、聚羧乙烯(carboxyvinyl polymer)、海藻酸鈉、海藻酸丙二醇酯、乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、黃原膠、合成硅酸鈉、合成硅酸鎂、二甲基二硬脂銨水輝石、環(huán)糊精、聚丙烯酸鈉、明膠、酪蛋白、膠原蛋白、透明質(zhì)酸、白蛋白、果膠、羅望子膠、瓜爾豆膠、卡拉膠或角豆膠。調(diào)整第1電解液201的粘度的物質(zhì)優(yōu)選為使人工脂質(zhì)膜這樣的膜蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的物質(zhì)。從注入的難易性的觀點出發(fā),調(diào)整第1電解液201的粘度的物質(zhì)的濃度優(yōu)選為以上、99%以下,更優(yōu)選為以上、50%以下。從注入的難易性的觀點出發(fā),調(diào)整第1電解液201的粘度的物質(zhì)的濃度優(yōu)選為0. 087w/w%、以上下,更優(yōu)選為0. 087 / %以上、以下。第1電解液201中的甘油濃度優(yōu)選為以上、99%以下,更優(yōu)選為以上、50%以下。第1電解液201中的PVA濃度優(yōu)選為0. 087w/w%以上、以下。在本說明書中,只標記%時表示體積濃度。標記w/w%時表示重量濃度。從減少電壓下降的觀點出發(fā),第1電解液201的電阻率優(yōu)選為Ωπι以上、 IOOkQm以下,更優(yōu)選為ΙπιΩπι、以上ΙΟΩπι以下。從觀察人工脂質(zhì)膜的觀點出發(fā),第1電解液201優(yōu)選是透明的,但也可以是不透明的。向第1腔室104注入的第1電解液201的量優(yōu)選為IOpl以上、200 μ 1以下,更優(yōu)選為Inl以上、200μ1以下。第1電解液201最優(yōu)選是靜止的,但也可以是流動的。在第 1電解液201進行流動時,優(yōu)選實質(zhì)上參與人工脂質(zhì)膜的形成的第1電解液201的量在上述范圍內(nèi)。也可以通過在向第1腔室104注入第1電解液201后,排出多余的第1電解液 201,由此調(diào)整第1腔室104內(nèi)的第1電解液201的量。
第1電解液201優(yōu)選使用移液器向第1腔室104注入,但也可以使用管、流路、滴管或注射器向第1腔室104注入。第1電解液201可以連續(xù)地向第1腔室104注入,也可以斷續(xù)地向第1腔室104注入。第1電解液201可以以液滴狀向第1腔室104注入。作為注入液滴狀的第1電解液201的方法,可以利用噴墨法、靜電噴霧法、超聲波法、點陣擊打法 (dot impact method)或微小液滴涂布法。噴墨法是指使液體形成微小液滴而注入目的位置的方法。微小液滴涂布法是指在前端細細地擰住的毛細管中充滿液體,通過使插入毛細管中的針移動,注入充填于毛細管中的液體的方法。噴墨法最優(yōu)選為壓電方式,但也可以是加熱方式。微小液滴涂布法是指在前端具有開口部的毛細管的內(nèi)部設(shè)置針,通過該針的移動在對象物涂布填充于毛細管內(nèi)的液體的方法。第1電解液201通過手動、半手動或自動向第1腔室104注入,第1點電解液201 的注入時間優(yōu)選為1微秒以上、10秒以下,更優(yōu)選為1微秒以上、1秒以下。第1電解液201 的注入速度在第1電解液注入工序中可以是一定的,也可以變化。從抑制第1電解液201的干燥的觀點出發(fā),在第1電解液注入工序中,第1電解液 201優(yōu)選維持于室溫。第1電解液201優(yōu)選維持于0°C以上、40°C以下,更優(yōu)選維持于10°C 以上、30°C以下。在第1電解液注入工序中,人工脂質(zhì)膜形成裝置100的周邊的相對濕度優(yōu)選維持于50%以上、100%以下。優(yōu)選通過膜過濾器,除去第1電解液201中所含有的灰塵或雜質(zhì)。在第1電解液注入工序中,第1電解液201優(yōu)選通過毛細管力、重力、表面張力或離心力向第1腔室104注入。在第1電解液注入工序中,可以檢測向第1腔室104中注入第1電解液201的結(jié)束。注入的結(jié)束可以利用光學(xué)顯微鏡觀察檢測,也可以在第1腔室104設(shè)置多個電極而通過測定電導(dǎo)度檢測。在第1電解液注入工序中,優(yōu)選第1電解液201向第1腔室104注入, 直至超過人工脂質(zhì)膜形成部103的上端。第1電解液201最優(yōu)選為具有單一粘度的均勻的電解液。第1電解液201也可以是組合具有1. 3mPa · s以上、200mPa · s以下的粘度的多種電解液的電解液。第1電解液 201的粘度也可以存在梯度。第1電解液201的粘度的梯度可以連續(xù)也可以不連續(xù)。由于第1電解液201是微量的,因此如果第1電解液201的粘度不足,則在第1腔室104或第2腔室105的開口部設(shè)置蓋子或栓,或貼膜的時候存在第1電解液201蒸發(fā)的可能性。因此,在操作上需要注意。<工序C 脂質(zhì)溶液注入工序>圖5(a)表示脂質(zhì)溶液注入工序。在脂質(zhì)溶液注入工序中,向人工脂質(zhì)膜形成部 103注入脂質(zhì)溶液202。在脂質(zhì)溶液注入工序中,優(yōu)選從第2腔室105 —側(cè)注入脂質(zhì)溶液 202。脂質(zhì)溶液202優(yōu)選為在有機溶劑中分散脂質(zhì)203的溶液。脂質(zhì)203優(yōu)選為在分子中含有磷酸或糖的復(fù)合脂質(zhì)。脂質(zhì)203也可以含有單純脂質(zhì)或衍生脂質(zhì)。脂質(zhì)203最優(yōu)選為磷脂,但也可以是糖脂質(zhì)、脂質(zhì)('J《脂質(zhì))、硫脂、鞘磷脂、甘油磷脂、偶氮植物凝血素或其它的天然由來的脂質(zhì),也可以是合成脂質(zhì)。由于合成脂質(zhì)純度高且易于得到化學(xué)上穩(wěn)定的試劑,因此比天然來源的脂質(zhì)更為優(yōu)選。作為脂質(zhì)203,可以使用二植烷?;蚜字?、甘油單油酸酯、卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸或二棕櫚酰磷脂酰膽堿。脂質(zhì)203的脂肪酸部分優(yōu)選為碳原子數(shù)為10 20的飽和脂肪酸或不飽和脂肪酸。脂質(zhì)203可以使用1種脂質(zhì),也可以使用2種以上的脂質(zhì)混合的脂質(zhì)。脂質(zhì)溶液202中所含有的有機溶液優(yōu)選為癸烷、十六烷、己烷或氯仿這樣的飽和烴。脂質(zhì)203相對于有機溶劑的濃度優(yōu)選為1 50mg/ml,更優(yōu)選為4 40mg/ml。脂質(zhì)溶液202中,除了脂質(zhì)203和有機溶劑,為了使人工脂質(zhì)膜具有凈余表面電荷,也可以含有磷脂酰絲氨酸或磷脂酰肌醇。人工脂質(zhì)膜的表面電荷優(yōu)選為負的。磷脂酰絲氨酸或磷脂酰肌醇可以在脂質(zhì)溶液注入工序之前在脂質(zhì)溶液202中混合,也可以在脂質(zhì)溶液注入工序之后在脂質(zhì)溶液202中混合。脂質(zhì)溶液202中,除了脂質(zhì)203和有機溶劑,優(yōu)選還含有受體、離子通道或G蛋白這樣的生物膜蛋白或分泌蛋白。脂質(zhì)溶液202也可以含有短桿菌肽這樣的多肽。脂質(zhì)溶液 202中可以只含有一種生物膜蛋白、分泌蛋白或多肽,也可以含有多種。生物膜蛋白、分泌蛋白或多肽,可以通過在脂質(zhì)溶液注入工序之前預(yù)先與脂質(zhì)溶液202混合導(dǎo)入到人工脂質(zhì)膜中,也可以在人工脂質(zhì)膜形成工序之后導(dǎo)入人工脂質(zhì)膜中。在人工脂質(zhì)膜形成工序之后向人工脂質(zhì)膜導(dǎo)入生物膜蛋白、分泌蛋白或多肽時, 可以通過將生物膜蛋白、分泌蛋白或多肽暫時組入氣泡中向載體融入人工脂質(zhì)膜,也可以使用公知的混合技術(shù)。在人工脂質(zhì)膜形成工序之后向人工脂質(zhì)膜導(dǎo)入生物膜蛋白、分泌蛋白或多肽時,可以在人工脂質(zhì)膜形成裝置100設(shè)有用于混合它們的裝置。從制作人工脂質(zhì)膜的容易性的觀點出發(fā),向人工脂質(zhì)膜形成部103注入的脂質(zhì)溶液202的量優(yōu)選為Ipl以上、10 μ 1以下,更優(yōu)選為Inl以上、2 μ 1以下。脂質(zhì)溶液202優(yōu)選通過移液器注入,也可以通過管、流路、滴管或注射器注入。脂質(zhì)溶液202可以連續(xù)地注入,也可以斷續(xù)地注入。脂質(zhì)溶液202可以以液滴狀注入。脂質(zhì)溶液202可以利用噴墨法、微小液滴涂布法、點陣擊打法、靜電噴霧法或超聲波法向人工脂質(zhì)膜形成部103注入。噴墨法最優(yōu)選為壓電方式,但也可以是加熱方式。脂質(zhì)溶液202通過手動、半手動或自動的方式向人工脂質(zhì)膜形成部103注入。脂質(zhì)溶液202的注入時間優(yōu)選為1微秒以上、10秒以下,更優(yōu)選為1微秒以上、1秒以下。脂質(zhì)溶液的202的注入速度在脂質(zhì)溶液注入工序中可以一定,也可以變化。在脂質(zhì)溶液注入工序中,脂質(zhì)溶液202優(yōu)選通過毛細管力、重力、表面張力或離心力向人工脂質(zhì)膜形成部103注入。在脂質(zhì)溶液注入工序中,可以檢測向人工脂質(zhì)膜形成部103注入脂質(zhì)溶液202的結(jié)束。注入的結(jié)束可以利用光學(xué)顯微鏡觀察檢測,也可以在隔板102設(shè)置多個電極而通過測定電導(dǎo)度檢測。由于第1電解液201是微量的,因此如果第1電解液201的粘度不足,使用移液器向人工脂質(zhì)膜形成部103注入脂質(zhì)溶液時,存在第1電解液201蒸發(fā)的可能性。因此,在操
作上需要注意?!垂ば駾第2電解液注入工序>圖5(b)表示第2電解液注入工序。在第2電解液注入工序中,第2電解液204通過第2開口部107向第2腔室105注入。第2電解液204優(yōu)選含有KC1,更優(yōu)選等滲的KCl溶液。第2電解液204優(yōu)選與細胞內(nèi)的生理條件相同。第2電解液204的pH優(yōu)選為7附近。第2電解液204可以是HEPES、 磷酸緩沖液(PBQ或磷酸緩沖生理鹽水這樣的緩沖液,也可以是在電生理實驗中使用的一般的溶液。第2電解液204的Ca2+濃度優(yōu)選為10 ΙΟΟηΜ。Ca2+濃度的調(diào)節(jié)中可以使用 EGTA這樣的Ca2+螯合劑。第2電解液204優(yōu)選含有Tyrode溶液。第2電解液204優(yōu)選含有NaCl 137mM、 KCl 2. 68mM, CaCl2 1. 8mM, NaH2PO4 0. 32mM、葡萄糖(glucose) 5. 56mM、NaHCO3 1. 16mM。第 2 電解液 204 也可以含有 NaCl 140mM、KCl 5. 4mM, CaCl2 1.8mM、MgCl2 ImM、NaHPO4 0. 3mM、 葡萄糖(glucose) 5mM、HEPES 5mM(pH7. 4)。第 2 電解液 204 也可以含有 KCl 140mM、MgCl2 ImM、CaCl2 ImM、EGTA 1 OmM、Mg-ATP2mM、NaOH-HEPES IOmM (pH7. 3)。第2電解液204中的Cl—優(yōu)選取代為非膜透過性的陰離子的S042—、甲磺酸根 (Methanesulfonate)、葡萄糖酸根(gluconate)、谷氨酸根(glutamate)或天冬氨酸根 (aspartate)。第2電解液204優(yōu)選以_20°C冷凍保存,以不使微生物繁殖。第2電解液204 的陽離子陽離子優(yōu)選取代為非膜透過性的有機鹽基。第2電解液204的陽離子優(yōu)選取代為四乙基胺(tetraethylammonium)或 N-甲基-D-葡糖胺(N-methyl-D-glucamine)。第 2 電解液204中含有的EGTA優(yōu)選取代為BAPTA。第2電解液204也可以含有ATP。為了維持受體的功能,第2電解液204也可以含有0. 1 0. 3mM的GTP。第2電解液204的粘度優(yōu)選為1. 3mPa · s以上、200mPa · s以下。第2電解液204 的粘度優(yōu)選與第1電解液201的粘度相等,但也可以與第1電解液201的粘度不同。從減少電壓下降的觀點和提高離子電導(dǎo)度的觀點出發(fā),第2電解液204優(yōu)選具有流動性。第2 電解液204優(yōu)選為液體狀或半液體狀。第2電解液204的粘度與第1電解液201相同地調(diào)整。第2電解液204優(yōu)選具有高于20°C純水的粘度(1. OmPa · s)的粘度。從減少電壓下降的觀點出發(fā),第2電解液204的電阻率優(yōu)選為1μ Ωπι以上、 IOOkQm以下,更優(yōu)選為ΙπιΩπι以上、ΙΟΩπι以下。從觀察人工脂質(zhì)膜的觀點出發(fā),第2電解液204優(yōu)選是透明的,但也可以是不透明的。向第2腔室105注入的第2電解液204的量優(yōu)選為IOpl以上、200 μ 1以下,更優(yōu)選為Inl以上、200 μ 1以下。第2電解液204最優(yōu)選是靜止的,但也可以是流動的。在第2 電解液204進行流動時,優(yōu)選實質(zhì)上參與人工脂質(zhì)膜的形成的第2電解液204的量在上述范圍內(nèi)。在可以通過向第2腔室105注入第2電解液204后,排出多余的第2電解液204, 由此調(diào)整第2腔室105內(nèi)的第2電解液204的量。第2電解液204優(yōu)選使用移液器向第2腔室105注入,但也可以使用管、流路、滴管或注射器向第2腔室105注入。第2電解液204可以連續(xù)地向第2腔室105注入,也可以斷續(xù)地向第2腔室105注入。第2電解液204可以以液滴狀向第2腔室105注入。作為注入液滴狀的第2電解液204的方法,可以利用噴墨法、靜電噴霧法、超聲波法、點陣擊打法或微小液滴涂布法。噴墨法最優(yōu)選為壓電方式,但也可以是加熱方式。第2電解液204通過手動、半手動或自動的方式注入。第2電解液204的注入時間優(yōu)選為1微秒以上、10秒以下,更優(yōu)選為1微秒以上、1秒以下。第2電解液204的注入速度在第2電解液注入工序中可以是一定的,也可以變化。從抑制第2電解液204的干燥的觀點出發(fā),在第2電解液注入工序中,第2電解液204優(yōu)選維持于室溫。第2電解液204優(yōu)選維持于0°C以上、40°C以下,更優(yōu)選維持于10°C 以上、30°C以下。人工脂質(zhì)膜形成裝置100的周邊的相對濕度優(yōu)選維持于50%以上、100% 以下。優(yōu)選通過膜過濾器,除去第2電解液204中所含有的灰塵或雜質(zhì)。在第2電解液注入工序中,第2電解液204優(yōu)選通過毛細管力、重力、表面張力或離心力向第2腔室105注入。在第2電解液注入工序中,可以檢測向第2腔室105中注入第2電解液204的結(jié)束。注入的結(jié)束可以利用光學(xué)顯微鏡觀察檢測,也可以在第2腔室105設(shè)置多個電極而通過測定電導(dǎo)度檢測。在第2電解液注入工序中,優(yōu)選第2電解液204向第2腔室105注入, 直至超過人工脂質(zhì)膜形成部103的上端。在第2電解液注入工序中,第2電解液204優(yōu)選向第2腔室105注入。第2電解液204最優(yōu)選為具有單一粘度的均勻的電解液。第2電解液204也可以是組合具有1. 3mPa · s以上、200mPa · s以下的粘度的多種電解液的電解液。第2電解液 204的粘度也可以存在梯度。第2電解液204的粘度的梯度可以連續(xù)也可以不連續(xù)。由于第2電解液204是微量的,因此如果第2電解液204的粘度不足,則在第1腔室104或第2腔室105的開口部設(shè)置蓋子或栓,或貼膜的時候存在第2電解液204蒸發(fā)的可能性。因此,在操作上需要注意。<工序E 人工脂質(zhì)膜形成工序>圖5(c)表示人工脂質(zhì)膜形成工序。在人工脂質(zhì)膜形成工序中,在人工脂質(zhì)膜形成部103形成人工脂質(zhì)膜205。人工脂質(zhì)膜205最優(yōu)選為脂質(zhì)雙層膜,但也可以包括單分子膜、四層膜或六層膜這樣的多層膜。在人工脂質(zhì)膜形成工序中,優(yōu)選利用第1電解液201和第2電解液204的水壓或來自外部的壓力,從脂質(zhì)溶液202的薄膜除去剩余的有機溶劑和脂質(zhì)203。剩余的有機溶劑和脂質(zhì)203優(yōu)選沿著隔板102的外周面而除去。為了促進有機溶劑和脂質(zhì)203的除去并且它們不除去必要量以上,也可以在隔板102的至少一側(cè)的外周面上,設(shè)置溝結(jié)構(gòu)或凹凸結(jié)構(gòu)這樣的控制微量流體的結(jié)構(gòu)。在人工脂質(zhì)膜形成工序中,為了除去剩余的有機溶劑和脂質(zhì)203,也可以使第1電解液201和/或第2電解液204的液面上下移動。在人工脂質(zhì)膜形成工序中,為了除去剩余的有機溶劑和脂質(zhì)203,也可以在人工脂質(zhì)膜的兩面施加電壓。施加在人工脂質(zhì)膜205的兩面的電壓優(yōu)選為ImV以上、IV以上,更優(yōu)選為50mV以上、200mV以上。施加電壓可以是DC(直流)電壓,也可以是AC(交流)電壓。人工脂質(zhì)膜形成工序也可以具備檢測人工脂質(zhì)膜205的形成的工序。人工脂質(zhì)膜 205的形成能夠通過使用光學(xué)顯微鏡觀察,或通過人工脂質(zhì)膜205的吸光度的測定檢測。也可以在第1腔室104和第2腔室105設(shè)置多個電極108,通過測定人工脂質(zhì)膜205的膜阻力、膜容量、膜電流或其它的電學(xué)特性,來檢測人工脂質(zhì)膜205的形成。由于第1電解液201是微量的,因此如果第1電解液201的粘度不足,則在人工脂質(zhì)膜形成工序時,存在第1電解液201蒸發(fā)的可能性。因此,在操作上需要注意。對第2電解液204也同樣。電極108優(yōu)選為非極化的電極。電極108的材料優(yōu)選適于電化學(xué)測定的電極材料, 也可以是Au、Pt或Ag這樣的純金屬。
電極108最優(yōu)選為Ag/AgCl電極,也可以使用飽和甘汞電極、氫電極碳電極、石墨電極或碳納米管電極這樣的無機材料的電極。電極108可以是場效應(yīng)晶體管(FET),也可以是場效應(yīng)晶體管的柵極、源極或漏極。電極108可以是離子敏場效應(yīng)晶體管(ISFET)或凝膠電極。也可以使用電極108測定第1電解液201或第2電解液204中所含有的離子、酶、 反應(yīng)產(chǎn)物或底物這樣的化學(xué)物質(zhì)。電極108優(yōu)選為線狀的,但也可以是薄膜狀、棒狀、平板狀、圓柱狀、四方柱狀、多角柱狀、線圈狀或網(wǎng)眼狀。從操作的容易性的觀點出發(fā),當(dāng)電極108為線狀時,電極108的長度,優(yōu)選為IOnm以上、Icm以下。當(dāng)電極108為線狀時,電極108的直徑,優(yōu)選為IOnm以上、Icm以下。當(dāng)電極108為平板狀時,電極108的長度、寬度和厚度分別優(yōu)選為IOnm以上、Icm 以下。當(dāng)電極108為薄膜狀時,電極108的長度和寬度分別優(yōu)選為IOnm以上、Icm以下。當(dāng)電極108為薄膜狀時,電極108的厚度優(yōu)選為IOnm以上、Icm以下,更優(yōu)選為50nm以上、1 μ m 以下。電極108優(yōu)選設(shè)置于容器101的內(nèi)壁,但也可以設(shè)置于容器101的側(cè)壁或底部。電極108也可以設(shè)置于人工脂質(zhì)膜形成裝置100內(nèi)的不與容器101的內(nèi)壁接觸的位置。電極108也可以是1個,也可以是數(shù)個。在設(shè)有多個電極108時,全部的電極108 可以由相同材料構(gòu)成,也可以分別由不同的材料的構(gòu)成。在設(shè)有多個電極108時,全部的電極108可以具有相同的形狀,也可以具有分別不同的形狀。在設(shè)有多個電極108時,全部電極108可以大小相同,也可以是分別不同的大小。根據(jù)這樣的結(jié)構(gòu)和操作的步驟,由于第1電解液201和第2電解液204的粘度高, 因此能夠抑制第1電解液201和第2電解液204從注入口 M和排出304的開口部向第1 腔室104和第2腔室105之外泄露。其結(jié)果,能夠防止人工脂質(zhì)膜形成裝置100周邊的由電解液造成的污染。而且,由于微量的第1電解液201和第2電解液204急速地蒸發(fā)被抑制,因此能夠穩(wěn)定地形成人工脂質(zhì)膜205。在實施方式1中,如圖1所示,優(yōu)選將人工脂質(zhì)膜形成裝置100設(shè)置為水平面而使其運行,但也可以設(shè)置為傾斜面而使其運行。其原因在于,由于第1電解液201和第2電解液204的粘度高,即使將人工脂質(zhì)膜形成裝置100設(shè)置為傾斜面,也能夠抑制第1電解液 201和第2電解液204向第1腔室104和第2腔室105之外泄露。在形成人工脂質(zhì)膜205的工序的途中,可能對人工脂質(zhì)膜形成裝置100施加振動, 或使人工脂質(zhì)膜形成裝置100傾斜,或倒置人工脂質(zhì)膜形成裝置100。人工脂質(zhì)膜205形成后,也可能對人工脂質(zhì)膜形成裝置100施加振動,或使人工脂質(zhì)膜形成裝置100傾斜,或倒置人工脂質(zhì)膜形成裝置100。特別是人工脂質(zhì)膜形成裝置100是小型的情況下,易于引起這樣的問題。但是,在實施方式1中,由于第1電解液201和第2電解液204的粘度高,因此即使對人工脂質(zhì)膜形成裝置100施加振動,或使人工脂質(zhì)膜形成裝置100傾斜,或倒置人工脂質(zhì)膜形成裝置100,也可以抑制第1電解液201和第2電解液204向第1腔室104和第2腔室105之外泄露。如圖6所示,人工脂質(zhì)膜形成裝置100能夠以傾斜的狀態(tài)運行。如圖7所示,人工脂質(zhì)膜形成裝置100能夠以與圖1中表示的狀態(tài)上下翻轉(zhuǎn)朝向的狀態(tài)運行。人工脂質(zhì)膜形成裝置100可以靜止,可以運動,也可以振動。如圖8所示,人工脂質(zhì)膜形成裝置100,操作者可以邊以手攜帶邊使其運行。由于第1電解液201和第2電解液204的粘度高,因此,如圖8所示,即使操作者的手發(fā)生抖動, 也能夠抑制第1電解液201和第2電解液204的泄露。如圖8所示,人工脂質(zhì)膜形成裝置 100也可以內(nèi)置于攜帶終端的一部分。在實施方式1中,可以在第1電解液注入工序和第2電解液注入工序之后,進行脂質(zhì)溶液注入工序。即,可以在本實施方式中適用現(xiàn)有技術(shù)中的吹泡涂附法、移液法或刷毛涂布法。在本實施方式中,可以同時進行第1電解液注入工序和脂質(zhì)溶液注入工序,并且,也可以同時進行第2電解液注入工序和脂質(zhì)溶液注入工序。即,也可以在本實施方式中適用作為現(xiàn)有技術(shù)的貼合法。在實施方式1中,從第1電解液注入工序到人工脂質(zhì)膜形成工序的一系列工序優(yōu)選以20°C以上、60°C以下進行,更優(yōu)選以25°C以上、40°C以下進行。能夠使用實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成方法制造生物傳感器。使用本實施方式的人工脂質(zhì)膜形成方法而得到的生物傳感器優(yōu)選用于有機化合物的檢測。有機化合物優(yōu)選為揮發(fā)性有機化合物、生物分子、診斷標記物、蛋白質(zhì)、肽、堿基或代謝物質(zhì)。為了能夠期待收集或濃縮生物傳感器的被檢測物質(zhì)的效果,優(yōu)選調(diào)整電解液的粘度。與現(xiàn)有的固體狀凝膠相比,在具有流動性的電解液中,被檢測物質(zhì)迅速擴散。因此,期待使用電解液的生物傳感器比使用固體狀凝膠的生物傳感器更為迅速的感應(yīng)。使用實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成方法而得到的生物傳感器優(yōu)選適用于分析裝置。作為分析裝置,可以列舉臨床檢查用分析裝置、電化學(xué)分析裝置、氣體分析裝置、味覺分析裝置、神經(jīng)生理解析裝置、離子通道解析裝置、離子通道功能解析裝置或藥物篩選裝置。實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成方法可以適用于化學(xué)物質(zhì)檢測裝置、生物分子分析裝置、大氣污染物質(zhì)分析裝置、水質(zhì)污染物質(zhì)分析裝置、殘留農(nóng)藥分析裝置、食品成分分析裝置、麻藥分析裝置、飲酒判定裝置、吸煙判定裝置、炸藥搜尋裝置、氣體泄露探測器、火災(zāi)警報器、不明物體搜尋裝置、個人識別裝置、空氣凈化機、生活習(xí)慣疾病診斷裝置、尿分析裝置、體液分析裝置、呼吸氣體分析裝置、血液分析裝置、血中氣體分析裝置或應(yīng)力計測儀。(實施方式2)以下,參照

本發(fā)明的實施方式2?!垂ば駻準備工序〉圖9和圖10分別表示本發(fā)明的實施方式2中人工脂質(zhì)膜形成裝置100的剖面圖和分解斜面投影圖。對實施方式2,在與實施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用相同的符號,省略其詳細說明。實施方式2與實施方式1最大的不同點在于,實施方式2是利用μ TAS技術(shù)形成人工脂質(zhì)膜205。具體而言,在于第1腔室104和/或第2腔室105為微流路或微孔這一點上。利用μ TAS技術(shù)使第1腔室104和第2腔室105細微化,因此電解液和腔室的接觸面積S相對于電解液的量V的比,S卩,S/V值增大。其結(jié)果,能夠進一步抑制第1電解液201 和第2電解液204從第1腔室104和第2腔室105泄露。第1基板301的材料中,可以使用作為容器101的材料可使用的任一種材料。第1基板301的材料最優(yōu)選為絕緣體。優(yōu)選第1基板301的外周面的至少一部分具有親水性。為了使得第1基板301的外周面至少一部分具有親水性,可以進行氧等離子體處理,也可以以親水性材料包被。第1基板301材料優(yōu)選是透明的,使得能夠觀察人工脂質(zhì)膜205,但也可以是不透明的。第1基板301最優(yōu)選為平板狀的,但也可以為圓盤狀、梯形、多角形、圓柱狀或角柱狀。第1基板301優(yōu)選通過機械加工而成型。機械加工優(yōu)選注塑成型、擠出成型、壓縮成型、中空成型、切削加工、模具成型、噴砂、干式蝕刻、濕式蝕刻、納米壓印、銑削、光固化、 光刻或熱壓印。第1基板301優(yōu)選通過半導(dǎo)體工藝加工。隔板102夾持于第1基板301和第2基板302之間。實施方式2的隔板102可以使用與實施形態(tài)1的隔板102相同的材料。人工脂質(zhì)膜形成部103與實施方式1相同,如圖2所示,優(yōu)選具有錐狀的形狀。錐狀的方向可以是朝向第1腔室104變窄的方向,也可以朝向第2腔室105變窄的方向。人工脂質(zhì)膜形成部103如圖9和圖10所示,也可以是相同直徑的貫通孔。第1腔室104設(shè)置于第1基板301的一部分。第1腔室104優(yōu)選設(shè)置于第1接班 301和隔板102之間,最優(yōu)選利用第1基板301和隔板102形成。從操作性的觀點出發(fā),第 1腔室104的容量優(yōu)選為Ipl以上、Iml以下,更優(yōu)選為IOpl以上、200 μ 1以下。第1腔室 104優(yōu)選具備用于注入電解液的第1注入口 303和排出口 304。第1腔室104優(yōu)選為流路。 第1腔室104也可以是微孔、毛細管、管或蓄水箱。第1腔室104也可以通過流路與電解液儲槽相接。第1腔室104的容量中可以包括電解液儲槽的容量,也可以不包括??梢栽诘?1腔室104的開口部設(shè)置蓋子或栓,也可以在第1腔室104的開口部貼膜。在第1腔室104的內(nèi)部,為了通過使表面積增大而抑制電解液的泄露,優(yōu)選具備保持結(jié)構(gòu)。保持結(jié)構(gòu)優(yōu)選為柱狀、多孔質(zhì)、球狀、珠子、點狀、海綿狀、纖維狀或泡沫狀。保持結(jié)構(gòu)可以是納米柱、微米柱、多孔質(zhì)金屬、多孔質(zhì)陶瓷、微米珠、納米珠、納米泡沫、多孔硅、多孔二氧化硅或多孔鋁。保持結(jié)構(gòu)的材料可以使用作為容器101的材料可以使用的材料中的任一種。也可以利用與保持結(jié)構(gòu)的材料不同的材料構(gòu)成的薄膜包被保持結(jié)構(gòu)的表面的一部分。包被保持結(jié)構(gòu)的表面的薄膜與隔板102相同。保持結(jié)構(gòu)可以與第1腔室104的形成同時形成,也可以在第1腔室104形成之后形成。也可以預(yù)先形成保持結(jié)構(gòu),之后向第1腔室104填充保持結(jié)構(gòu)。第2基板302的材料與保持結(jié)構(gòu)相同,可以使用作為容器101的材料可以使用的材料中的任一種。第2基板302的材料最優(yōu)選為絕緣體。優(yōu)選第2基板302的外周面的至少一部分具有親水性。為了使第2基板302的外周面的至少一部分具有親水性,可以進行氧等離子體處理,也可以以親水性材料進行包被處理。為了可以觀察人工脂質(zhì)膜205,第2基板302優(yōu)選是透明的,但也可以是不透明的。第2基板302最優(yōu)選為平板狀的,但也可以為圓盤狀、梯形、多邊形、圓柱狀或角柱狀。
第2腔室105隔著隔板102設(shè)置于第1腔室104的相反側(cè)。第2腔室105優(yōu)選設(shè)置于第2基板302和隔板102之間,最優(yōu)選利用第2基板302和隔板102形成。第2腔室 105的容積與實施方式1相同。第2腔室105優(yōu)選具備用于注入電解液的注入口。第2腔室105優(yōu)選為流路,但也可以是微孔、毛細管、管狀或蓄水箱。第2腔室105可以通過流路與電解液儲槽相接。第2腔室105的容量中可以包括電解液儲槽的容量,也可以不包括。可以在第2腔室105的開口部設(shè)置蓋子或栓,也可以在第2腔室105的開口部貼膜。在第2腔室105的內(nèi)部,為了通過增大表面積而抑制電解液的泄露,優(yōu)選具備與第 1腔室104相同的保持結(jié)構(gòu)。保持結(jié)構(gòu)可以與第2腔室105的形成同時形成,也可以在第2 腔室105的形成之后形成。也可以預(yù)先形成保持結(jié)構(gòu),之后向第2腔室105填充保持結(jié)構(gòu)。接著,說明人工脂質(zhì)膜的形成步驟。圖11和圖12表示本發(fā)明的實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成裝置100的運行圖。對圖11和圖12,在與圖9和圖10相同的結(jié)構(gòu)使用相同的符號,省略其說明?!垂ば駼第1電解液注入工序>圖11 (a)表示第1電解液注入工序。在第1電解液注入工序中,從第1注入口 303 向第1腔室104注入第1電解液201,利用第1電解液201充滿第1腔室104。剩余的第1 電解液201可以從排出口 304排出。排出口 304可以用于釋放第1腔室104的氣泡。第1電解液201可以使用與實施方式1相同的電解液。第1電解液201具有與實施方式1相同的粘度和電阻率。第1電解液201的粘度可以與實施方式1同樣進行調(diào)整。從第1注入口 303向第1腔室104注入第1電解液201的方法與實施方式1相同。 第1電解液201的溫度和人工脂質(zhì)膜形成裝置100的周邊的相對濕度與實施方式1相同。向第1腔室104注入第1電解液201的結(jié)束可以與實施方式1同樣地檢測。<工序C 脂質(zhì)溶液注入工序>圖11(b)表示脂質(zhì)溶液注入工序。在脂質(zhì)溶液注入工序中,脂質(zhì)溶液202向人工脂質(zhì)膜形成部103注入。在脂質(zhì)溶液注入工序中,優(yōu)選從第2腔室105側(cè)注入脂質(zhì)溶液202。脂質(zhì)溶液202可以使用與實施方式1相同的脂質(zhì)溶液。與實施方式1同樣操作, 脂質(zhì)溶液202向人工脂質(zhì)膜形成部103注入。與實施方式1同樣操作,可以向人工脂質(zhì)膜導(dǎo)入生物膜蛋白、分泌蛋白或多肽。脂質(zhì)溶液202向人工脂質(zhì)膜形成部103注入的結(jié)束可以與實施方式1同樣地檢測?!垂ば駾第2電解液注入工序>圖11(c)表示第2電解液注入工序。在第2電解液注入工序中,第2電解液204 向第2腔室105注入。第2電解液204可以使用與實施方式1相同的電解液。第2電解液204具有與實施方式1相同的粘度和電阻率。第2電解液204的粘度可以與實施方式1同樣進行調(diào)整。向第2腔室105注入第2電解液204的方法與實施方式1相同。第2電解液204 的溫度和人工脂質(zhì)膜形成裝置100的周邊的相對濕度與實施方式1相同。向第2腔室105注入第2電解液204的結(jié)束可以與實施方式1同樣地檢測。<工序E 人工脂質(zhì)膜形成工序>圖12表示人工脂質(zhì)膜形成工序。在人工脂質(zhì)膜形成工序中,在人工脂質(zhì)膜形成部103形成人工脂質(zhì)膜205。人工脂質(zhì)膜205與實施方式1相同。實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成工序與實施方式1相同。在實施方式2中,如圖12所示,優(yōu)選將人工脂質(zhì)膜形成裝置100設(shè)置為水平面而使其運行,但也可以設(shè)置為傾斜面而使其運行。其原因在于,由于第1電解液201和第2電解液204的粘度高,即使將人工脂質(zhì)膜形成裝置100設(shè)置為傾斜面,也能夠抑制第1電解液 201和第2電解液204向第1腔室104和第2腔室105之外泄露。即使在對人工脂質(zhì)膜形成裝置100施加振動,或使人工脂質(zhì)膜形成裝置100傾斜, 或倒置人工脂質(zhì)膜形成裝置100時,也能夠抑制第1電解液201和第2電解液204向第1 腔室104和第2腔室105之外泄露。例如,如圖13所示,能夠使人工脂質(zhì)膜形成裝置100 以傾斜的狀態(tài)運行。如圖14所示,也能夠使人工脂質(zhì)膜形成裝置100以與圖12所示的狀態(tài)上下倒置的狀態(tài)運行。人工脂質(zhì)膜形成裝置100可以靜止,也可以運動,也可以振動。如圖15所示,人工脂質(zhì)膜形成裝置100,操作者可以邊以手攜帶邊使其運行。由于第1電解液201和第2電解液204的粘度高,因此,如圖15所示,即使操作者的手發(fā)生抖動,也能夠抑制第1電解液201和第2電解液204的泄露。如圖15所示,人工脂質(zhì)膜形成裝置100也可以內(nèi)置于攜帶終端的一部分。在實施方式2中,可以在第1電解液注入工序和第2電解液注入工序之后,進行脂質(zhì)溶液注入工序。即,可以在本實施方式中適用現(xiàn)有技術(shù)中的吹泡涂附法、移液法或刷毛涂布法。在本實施方式中,可以同時進行第1電解液注入工序和脂質(zhì)溶液注入工序,并且,也可以同時進行第2電解液注入工序和脂質(zhì)溶液注入工序。即,也可以在本實施方式中適用作為現(xiàn)有技術(shù)的貼合法。在實施方式2中,向人工脂質(zhì)膜205嵌入膜蛋白。圖16(a) (c)模式地表示向人工脂質(zhì)膜205嵌入了膜蛋白的狀態(tài)。優(yōu)選將受體型通道305嵌入人工脂質(zhì)膜205。圖 16(a)模式地表示向形成于人工脂質(zhì)膜形成部103的人工脂質(zhì)膜205嵌入受體型通道305 的狀態(tài)。受體型通道305與通道蛋白質(zhì)的直接的配體結(jié)合觸發(fā)而開放。圖16(a)模式地表示配體306向受體型通道305結(jié)合的情況。離子307通過開放的受體型通道305。也優(yōu)選向人工脂質(zhì)膜205嵌入G蛋白310。圖16(b)模式地表示向形成于人工脂質(zhì)膜形成部103的人工脂質(zhì)膜205嵌入通道308、受體蛋白質(zhì)309和G蛋白310的狀態(tài)。通道308被通過獨立的與受體蛋白質(zhì)309的配體結(jié)合而產(chǎn)生的活性型GTP結(jié)合蛋白質(zhì)(G蛋白310)觸發(fā)。優(yōu)選向人工脂質(zhì)膜205嵌入第二信使控制型通道。圖16(c)模式地表示向形成于人工脂質(zhì)膜形成部103的人工脂質(zhì)膜205嵌入通道308、受體蛋白質(zhì)309、G蛋白310和酶 311的狀態(tài)。通道308通過G蛋白310活化之后產(chǎn)生的第二信使而激活。向人工脂質(zhì)膜205嵌入的膜蛋白質(zhì)可以是膜內(nèi)在蛋白質(zhì),也可以是膜表面蛋白質(zhì)。向人工脂質(zhì)膜205嵌入的膜蛋白質(zhì)可以是膜貫穿型蛋白質(zhì),也可以是1次膜貫穿型蛋白質(zhì)。嵌入到人工脂質(zhì)膜205中的膜蛋白質(zhì),可以是受體、離子通道或G蛋白。向人工脂質(zhì)膜205嵌入的受體優(yōu)選為膜貫穿型受體或細胞內(nèi)受體。向人工脂質(zhì)膜 205嵌入的受體可以是代謝型受體,也可以是離子通道型受體。向人工脂質(zhì)膜205嵌入的受體優(yōu)選為G蛋白共軛型受體(GPCR)。向人工脂質(zhì)膜205嵌入的受體可以是毒蕈堿性乙酰膽堿受體、腺苷受體、腎上腺素受體、GABA受體、血管緊張肽受體、大麻素受體、膽囊收縮素受體、多巴胺受體、胰高血糖素受體、組胺受體、嗅覺受體、阿片受體、視紫紅質(zhì)受體、胰泌素受體、5-羥色胺受體、生長抑素受體、胃泌素受體、P2Y受體、酪氨酸激酶受體、促紅細胞生成素受體、胰島素受體、細胞生長因子受體、細胞因子受體、鳥苷酸環(huán)化酶受體、煙堿型乙酰膽堿受體、甘氨酸受體、谷氨酸受體、三磷酸肌醇受體、魚尼丁受體或P2X受體。在實施方式2中,向人工脂質(zhì)膜205嵌入的G蛋白最優(yōu)選為與膜受體相關(guān)的異三聚體G蛋白。向人工脂質(zhì)膜205嵌入的G蛋白優(yōu)選通過GPCR被活化。在實施方式2中,向人工脂質(zhì)膜205嵌入的離子通道優(yōu)選為鉀離子通道,但也可以是鈣離子通道。在實施方式2中,優(yōu)選通過噴墨法、微小液滴涂布法、點陣擊打法、靜電噴霧法、超聲波法或電轉(zhuǎn)化法向人工脂質(zhì)膜205嵌入受體、離子通道或G蛋白。在本實施方式中,也可以通過使細胞與人工脂質(zhì)膜205融合,嵌入在細胞膜上表達的膜蛋白質(zhì)。也可以通過噴墨法、微小液滴涂布法、點陣擊打法、靜電噴霧法、超聲波法或電轉(zhuǎn)化法使細胞與人工脂質(zhì)膜 205融合。在本實施方式中,可以通過將載體與人工脂質(zhì)膜205融合,嵌入在載體膜上分布的膜蛋白質(zhì)。在本實施方式中,從第1電解液注入工序到人工脂質(zhì)膜形成工序的一系列工序優(yōu)選以20°C以上、60°C以下進行,更優(yōu)選以25°C以上、40°C以下進行。能夠使用實施方式2的人工脂質(zhì)膜形成方法制造生物傳感器。使用了本實施方式得到的人工脂質(zhì)膜形成方法可以適用于與使用了實施方式1的人工脂質(zhì)膜形成方法得到的生物傳感器同樣的裝置。[實施例]以以下的步驟判定第1電解液201和第2電解液204向第1腔室104和第2腔室 105之外的泄露。使用顯微鏡(KEYENCE公司制造,VH-6300)評價第1電解液201和第2電解液204的蒸發(fā)的情況。〈工序A準備工序〉作為圖9所示的第1基板301和第2基板302,使用聚丙烯板。根據(jù)第1電解液 201和第2電解液204的液量,將第1基板301和第2基板302的厚度調(diào)整為0. 5mm、Imm或 5mm。當(dāng)?shù)?電解液201和第2電解液204的液量為0. 1 μ 1或1 μ 1時,第1基板301和第 2基板302的厚度為0. 5mm。當(dāng)?shù)?電解液201和第2電解液204的液量為50 μ 1時,第 1基板301和第2基板302的厚度為1mm。當(dāng)?shù)?電解液201和第2電解液204的液量為 200μ 1、300μ 1或400μ 1時,第1基板301和第2基板302的厚度為5_。第1基板301和第2基板302的大小為20mmX20mm。容器101是透明的。根據(jù)第 1電解液201和第2電解液204的液量,第1腔室104和第2腔室105的直徑調(diào)整為1mm、 6mm和10mm。當(dāng)?shù)?電解液201和第2電解液204的液量為0. 1 μ 1或1 μ 1時,第1腔室 104和第2腔室105的直徑為1mm。當(dāng)?shù)?電解液201和第2電解液204的液量為50 μ 1 時,第1腔室104和第2腔室105的直徑為6mm。當(dāng)?shù)?電解液201和第2電解液204的液量為200μ 1、300μ 1或400μ 1時,第1腔室104和第2腔室105的直徑為10_。隔板102為厚度50 μ m的特富龍(Teflon,注冊商標)膜,具有絕緣性。隔板102 的表面顯示撥水性。隔板102的面積為km2。利用隔板102,將容器101分割為第1腔室 104和第2腔室105。人工脂質(zhì)膜形成部103為直徑200 μ m的圓形的貫通孔。使用鉆孔機在隔板102的中央部分的一處形成人工脂質(zhì)膜形成部103。通過第1基板301和第2基板302夾著隔板102而形成人工脂質(zhì)膜形成裝置100。對作為第1電解液201和第2電解液204的液量為Iml的人工脂質(zhì)膜形成裝置 100,使用上述的Compact chamber (Ionovation GmbH)。隔板102是厚度為25 μ m的特富龍(Teflon,注冊商標)膜,具有絕緣性。隔板102的表面顯示撥水性。隔板102的面積為 lcm2。隔板102與第1電解液201接觸的面為直徑5mm的圓形。利用隔板102,將容器101 分割為第1腔室104和第2腔室105。人工脂質(zhì)膜形成部103為直徑120 μ m的貫通孔。使用激光在隔板102的中央部分的一處形成人工脂質(zhì)膜形成部103。作為第1電解液201和第2電解液204,使用Tyrode溶液。Tyrode溶液的組成為 NaCl (特級,和光純藥)137mM、KCl (特級,和光純藥)2. 68mM、CaCl2 (特級,和光純藥)1. 8mM、 NaH2PO4(特級,和光純藥)0. 32mM、葡萄糖(glucose) (SIGMA G_7021)5. 56mM、NaHCO3(特級, 和光純藥)1. 16mM。利用甘油(特級,和光純藥)或聚乙烯醇(PVA)(—級,和光純藥,聚合度為3100 3900)、聚乙二醇(PEG)(—級,和光純藥,平均分子量為7300 9300),調(diào)整第 1電解液201和第2電解液204的粘度。使用東機產(chǎn)業(yè)的粘度計(TV-22),測定第1電解液 201和第2電解液204的粘度。作為月旨質(zhì)溶液 202,使用磷月旨(1, 2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphochol ine :1,2-二植烷?;?sn-甘油基-3-膽堿磷酸,Avanti Polar Lipids)和有機溶劑 (chloroform:氯仿,和光純藥)的混合溶液。磷脂的濃度為lmg/ml?!垂ば駼第1電解液注入工序>利用移液器(Gilson)向第1腔室104注入第1電解液201。作為第1電解液201, 使用利用甘油、PVA或PEG調(diào)整過粘度的Tyrode溶液。第1電解液201的溫度為22°C。<工序C 脂質(zhì)溶液注入工序>從第2腔室105 —側(cè)向人工脂質(zhì)膜形成部103注入1 μ 1脂質(zhì)溶液202。注入中, 使用微量注射器(Hamilton)。向人工脂質(zhì)膜形成部103注入脂質(zhì)溶液202時,脂質(zhì)溶液202 邊在隔板102表面擴散,邊到達人工脂質(zhì)膜形成部103?!垂ば駾第2電解液注入工序>利用移液器(Gilson)向第2腔室105注入第2電解液204。作為第2電解液204, 使用利用甘油、PVA或PEG調(diào)整過粘度的Tyrode溶液。第2電解液204的溫度為22°C。<工序E 人工脂質(zhì)膜形成工序>靜置人工脂質(zhì)膜形成裝置100。人工脂質(zhì)膜形成工序之后,判定以相對于水平面為45°、90°和180°的角度設(shè)置人工脂質(zhì)膜形成裝置100時的第1電解液201和第2電解液204有無泄露。以相對于水平面90°設(shè)置是指使第2腔室105的開口部朝向水平方向而設(shè)置。以相對于水平面180° 設(shè)置是指使第2腔室105的開口部垂直向下地設(shè)置。利用該判定,確認了使人工脂質(zhì)膜形成裝置100傾斜或翻轉(zhuǎn)時,第1電解液201和第2電解液204是否泄露。第1電解液注入工序至人工脂質(zhì)膜形成工序以室溫22°C、相對濕度50%的環(huán)境進行。表1表示利用甘油調(diào)整過的第1電解液201和第2電解液204的粘度。[表1]
權(quán)利要求
1.一種形成人工脂質(zhì)膜的方法,其特征在于,具備以下工序A E 準備以下的人工脂質(zhì)膜形成裝置的工序A,這里,所述人工脂質(zhì)膜形成裝置具備 第1腔室, 第2腔室,夾置于所述第1腔室和所述第2腔室之間的隔板,和由設(shè)置于所述隔板的貫通孔構(gòu)成的人工脂質(zhì)膜形成部, 所述第1腔室具有IOpl以上、200 μ 1以下的容量, 所述第2腔室具有IOpl以上、200 μ 1以下的容量;向所述第1腔室注入具有1. 3mPa.s以上、200mPa 以下的粘度的第1電解液的工序B ;向所述人工脂質(zhì)膜形成部注入含有脂質(zhì)和有機溶劑的脂質(zhì)溶液的工序C ; 向所述第2腔室注入具有1. 3mPa · s以上、200mPa · s以下的粘度的第2電解液,在所述第1電解液和所述第2電解液之間夾著所述脂質(zhì)溶液的工序D ;和除去所述有機溶劑,在所述人工脂質(zhì)膜形成部形成人工脂質(zhì)膜的工序E。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述第1電解液或所述第2電解液中的至少一方含有具有羥基的有機化合物。
3.如權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于 所述具有羥基的有機化合物為醇。
4.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于 所述醇為低級醇。
5.如權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于 所述醇為甘油。
6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述第1電解液或所述第2電解液中的至少一方含有高分子。
7.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于所述第1電解液或所述第2電解液中的至少一方含有聚乙烯醇。
8.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在所述工序B中,所述第1電解液通過噴墨法向所述第1腔室注入。
9.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在所述工序D中,所述第2電解液通過噴墨法向所述第2腔室注入。
10.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在所述工序C中,所述脂質(zhì)溶液通過噴墨法向所述人工脂質(zhì)膜形成部(10 注入。
11.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在所述工序E之后,還具備在所述人工脂質(zhì)膜中嵌入受體或離子通道中的至少一種的工序F。
12.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在所述工序B中,所述第1腔室由所述第1電解液充滿。
13.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于在所述工序D中,所述第2腔室由所述第2電解液充滿。
14.如權(quán)利要求12所述的方法,其特征在于 在所述工序D中,所述第2腔室由所述第2電解液充滿。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于提供抑制電解液的泄露和蒸發(fā)而穩(wěn)定地形成人工脂質(zhì)膜的方法。本發(fā)明是使用人工脂質(zhì)膜形成裝置而形成人工脂質(zhì)膜的人工脂質(zhì)膜形成方法,上述形成裝置具備第1腔室、第2腔室、隔板和人工脂質(zhì)膜形成部。第1腔室和第2腔室具有10pl以上、200μl以下的容量。本發(fā)明的人工脂質(zhì)膜形成方法具備準備上述人工脂質(zhì)膜形成裝置的工序,向上述第1腔室注入具有1.3mPa·s以上、200mPa·s以下的粘度的第1電解液的工序,向上述人工脂質(zhì)膜形成部注入脂質(zhì)溶液的工序,向上述第2腔室注入具有1.3mPa·s以上、200mPa·s以下的粘度的第2電解液的工序和形成人工脂質(zhì)膜的人工脂質(zhì)膜形成工序。
文檔編號B01J19/00GK102216773SQ201080003225
公開日2011年10月12日 申請日期2010年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月7日
發(fā)明者岡弘章, 沖明男, 塚原法人, 鈴木雅登 申請人:松下電器產(chǎn)業(yè)株式會社
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