一種茶苯海明的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種茶苯海明的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的茶苯海明的藥物組合物中含有茶苯海明和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，茶苯海明、化合物(Ⅰ)單獨(dú)作用時(shí)，對卵巢衰退引起的睡眠障礙具有治療作用；茶苯海明和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時(shí)，治療作用進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療更年期綜合征以及睡眠障礙的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專利說明】
-種茶苯海明的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，設(shè)及茶苯海明的新用途，具體設(shè)及一種茶苯海明的藥 物組合物及其醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 茶苯海明是一種常用的抗組胺藥。臨床主要用于抗暈動(dòng)癥。對放射線治療等引起 的惡屯、、嘔吐、眩暈也有一定效果。
[0003] 迄今為止，尚未見茶苯海明及其藥物組合物與治療更年期綜合征W及睡眠障礙的 相關(guān)性報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種茶苯海明的藥物組合物，該藥物組合物中含有茶苯海 明和一種天然產(chǎn)物，茶苯海明和該天然產(chǎn)物可W協(xié)同治療更年期綜合征W及睡眠障礙。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得W實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I)，
[0007]
[000引一種茶苯海明的藥物組合物，包括茶苯海明、如權(quán)利要求1所述的化合物（I)和藥 學(xué)上可W接受的載體，制備成需要的劑型。
[0009] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可W接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑。
[0010] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0011] 上述化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：（a)將木芙蓉葉粉碎，用75~85% 乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水飽和的正下醇 萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步驟(a)中正下醇萃取 物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集 70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相 硅膠分離，依次用體積比為60:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分； (d)步驟k)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1、4:1和2:1的二氯甲燒-甲 醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體 積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~15個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮 得到化合物(I)。
[0012] 進(jìn)一步地，化合物(I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0013] 上述化合物(I)在制備治療更年期綜合征W及睡眠障礙的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 上述茶苯海明的藥物組合物在制備治療更年期綜合征W及睡眠障礙的藥物中的 應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明提供的茶苯海明的藥物組合物中含有茶苯海明和一種結(jié)構(gòu) 新穎的天然產(chǎn)物，茶苯海明、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，對卵巢衰退引起的睡眠障礙具有治療 作用；茶苯海明和化合物（I)聯(lián)合作用時(shí)，治療作用進(jìn)一步提高，可W開發(fā)成治療更年期綜 合征W及睡眠障礙的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不W此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0017] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0018] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0019]分離方法：（a)將木芙蓉葉（2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提?。╨f5LX3次），合并提 取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油酸(化X3次）、乙酸乙醋(化X3次)和水飽和的正下醇 (化X3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步驟(a)中 正下醇萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫10 個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b)中70%乙醇洗脫 濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1(10個(gè)柱體積）、30:1(8個(gè)柱體積）、15:1(10個(gè) 柱體積)和5:1(8個(gè)柱體積)的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟k)中組分4用 正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1 (10個(gè)柱體積）、4:1 (8個(gè)柱體積)和2:1 (6個(gè)柱體 積)的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反 相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~15個(gè)柱體積洗脫液， 洗脫液減壓濃縮得到化合物(IKHPLC歸一化純度大于98% )。
[0020] 結(jié)構(gòu)確證:HR-ESI-MS顯示[Μ+Η]+為m/z 309.1281，結(jié)合核磁特征可得分子式為 。6出日〇6，不飽和度為8。核磁共振氨譜數(shù)據(jù)SH(ppm，CDC13，500MHz): H-1 (2.74，d，J = 4.2Hz)， H-2(3.44，d J = 4.2Hz)，H-5(2.57，s)，H-7(2.73，dd J=12.9,3.6Hz)，H-8a(1.72，m)，H-80 (1.81，m)，H-9a(1.56，m)，H-W(1.63，m)，H-13(6.29，d，J = 3.3Hz)，H-13(5.76，d，J = 3.3化），護(hù)14(1.02,3)，護(hù)15(1.47,3)，12-016(3.77,3);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)6。(99111，〔0(：13， 125MHz):70.1(CH，1-C)，51.4(CH，2-C)，207.4(C，3-C)，59.3(C，4-C)，62.3(CH，5-C),208.6 (C，6-C)，51.7(CH，7-C)，20.3(CH2,8-C)，33.5(CH2,9-C)，34.3(C，10-C)，144.6(C，11-C)， 167.3(C，12-C)，124.9(CH2，13-C)，19.2(Ol3，14-C)，21.6(ai3，15-C)，52.7(CH3，12-0Me)。 Uc-NMR、DEPT和HSQC譜中顯示有16個(gè)碳信號，包括Ξ個(gè)甲基(一個(gè)連氧碳），Ξ個(gè)亞甲基(一 個(gè)締控碳），四個(gè)次甲基(兩個(gè)連氧碳），W及六個(gè)季碳(一個(gè)締控碳，Ξ個(gè)幾基碳和一個(gè)連氧 季碳）。^上功能結(jié)構(gòu)再結(jié)合不飽和數(shù)表明該化合物為Ξ環(huán)結(jié)構(gòu)。iH-NMR譜結(jié)合HSQ村普顯示 Ξ個(gè)甲基質(zhì)子信號6111.02(3山8)、1.47(3山3)與3.77(3山8)，一對端締控質(zhì)子信號6此.29 (1山(1^ = 3.3化）與5.76(1山(1^ = 3.3化），兩個(gè)連氧次甲基質(zhì)子信號6112.74(1山(1^ = 4.2化）與3.44(巧，(1，1 = 4.2化）。醒財(cái)普數(shù)據(jù)6113.77(3山3)與6。52.7可知該化合物中存在甲 氧基，HMBC譜中OMe與C-12的相關(guān)信號表明了甲氧基連接在C-12位，根據(jù)NMR譜數(shù)據(jù)δκ2.74 αH，d，J = 4.2Hz)、3.44αH，d，J = 4.2Hz)與δc70.1、51.4可知該化合物中存在一個(gè)環(huán)氧結(jié) 構(gòu)。通過1η-1η COSY譜中Η-1/Η-2與Η-7/Η-8/Η-9相關(guān)信號，W及HMBC譜中顯示的Η-1與C-2、 C-3和C-10、H-2與C-1和C-3，H-5與C-6和C-10，H-7與C-6、C-8和C-11，H-13與C-7、C-11和C- 12，H-14與C-10相關(guān)信號，可W構(gòu)建該化合物的連接方式，并且上述波譜數(shù)據(jù)表明該化合物 為按葉燒型倍半祗。N犯SY譜中，H-l/H-14、H-2/H-14W及H-14/H-15的相關(guān)性表明C-1與C-2 的環(huán)氧結(jié)構(gòu)為α構(gòu)型。該化合物中的(：-1、(：-2、(：-4、(：-5、(：-7和(：-10為手性碳，通過^65￥試驗(yàn) 與Η-Η偶合常數(shù)確認(rèn)了相對構(gòu)型。Ν犯SY譜中護(hù)1/護(hù)2、護(hù)1/護(hù)90、護(hù)1/護(hù)14、護(hù)5/護(hù)7、護(hù)7/護(hù) 13、護(hù)地/護(hù)13、護(hù)地/護(hù)14^及護(hù)14/護(hù)15相關(guān)信號表明該化合物01、(：-2、(：-4、(：-5、(：-7和 C-10構(gòu)型為13、21?、45、55、75和101?。綜合氨譜、碳譜、麗8村普和^^5￥譜，^及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān) 類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過ECD試驗(yàn)確定，理論值 與實(shí)驗(yàn)值基本一致。該化合物化學(xué)式及碳原子編號如下：
[0021]
[0022] 實(shí)施例2:藥理作用
[0023] 本實(shí)施例W去卵巢大鼠為動(dòng)物模型，采用大鼠皮層腦電圖描記技術(shù)，從睡眠時(shí)相 方面觀察藥物改善更年期失眠癥的作用。
[0024] 1、材料與方法
[0025] 1.1 動(dòng)物
[00%] Wistar大鼠，雌性，體重200g~240g，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中屯、提供。
[0027] 1.2試劑與樣品
[0028] 茶苯海明購自中國藥品生物制品檢定所?；衔?I)自制，制備方法見實(shí)施例1。
[0029] 1.3 儀器
[0030] 16道生理信號記錄儀(美國Stoelting公司），大鼠腦立體定位儀(美國Stoelting 公司），有機(jī)玻璃籠（自制），恒溫恒濕自動(dòng)光控電子屏蔽室。
[0031] 1.4大鼠分組及模型制備
[0032] 將大鼠分為5組，每組8只，分別為空白對照組、模型對照組和茶苯海明組(80mg · kg-1)、化合物（I)組(80mg · kg-1)、茶苯海明與化合物（I)組合物組【40mg · kg-1茶苯海明+ 40mg · kg-i化合物（I)】。模型組和藥物組分別做卵巢切除手術(shù)，空白對照組做假手術(shù)。模型 對照組和給藥組為篩選合格的埋好記錄電極的去卵巢大鼠。術(shù)后1周，給藥組分別灌胃給予 相應(yīng)藥物，空白對照組和模型對照組灌胃給予等容量蒸饋水，共7d。
[0033] 卵巢切除手術(shù)操作方法:戊己比妥鋼腹腔注射麻醉(40mg/kg)，腦立體定位儀固 定，頭部剪毛與消毒后，剪開頭部皮膚，分別于冠狀縫前1mm及人字縫前1mm與煩骨中線右側(cè) 旁開1mm交叉點(diǎn)處，用特制的止血錯(cuò)夾住2個(gè)螺絲釘入煩骨內(nèi)，使之與硬腦膜接觸，但不穿透 硬腦膜，為皮層電極，用于記錄腦電。在兩側(cè)頸肌內(nèi)分別插入銀絲電極W記錄肌電，4個(gè)電極 分別焊至4線微型插座上，借牙科水泥固定于煩骨上，同時(shí)無菌操作行雙側(cè)卵巢切除術(shù)。空 白對照組（即假手術(shù)組)安裝電極后僅切除約Ig重脂肪，不切除卵巢。術(shù)后放在特制的有機(jī) 玻璃筒內(nèi)單籠飼養(yǎng)，去卵巢大鼠3d后進(jìn)行陰道涂片，連續(xù)5d，W證明去勢是否徹底。各組大 鼠每天保證明暗交替12h。
[0034] 1.5慢波睡眠時(shí)間測定實(shí)驗(yàn)
[0035] 末次給藥30min后，頭部的記錄電極通過微型插座和連接線連接到16道生理信號 記錄儀上，記錄腦電和肌電（每日9:00~17:00間進(jìn)行，計(jì)算機(jī)自動(dòng)連續(xù)記錄化），記錄慢波 睡眠深睡期（SWS1)和淺睡期（SWS2)時(shí)間。
[0036] 1.6快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠時(shí)間測定實(shí)驗(yàn)
[0037] 末次給藥30min后，頭部的記錄電極通過微型插座和連接線連接到16道生理信號 記錄儀上，記錄腦電和肌電（每日9:00~17:00間進(jìn)行，計(jì)算機(jī)自動(dòng)連續(xù)記錄化），記錄快速 眼球運(yùn)動(dòng)睡眠 (REM)的時(shí)間及清醒(WAKE)時(shí)間。
[003引1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0039] 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（T±s)表示，應(yīng)用SPSS18.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差 分析和t檢驗(yàn)，WP<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0040] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0041 ] 2.1對自由活動(dòng)去卵巢大鼠淺睡期的影響
[0042] 與空白對照組比，模型對照組大鼠 SWS2顯著縮短(P<0.01)，說明造模成功；與模 型對照組比，茶苯海明組、化合物（I)組大鼠 SWS2延長(P<0.05);與模型對照組相比，茶苯 海明與化合物（I)組合物組大鼠 SWS2顯著延長(P<0.01)。藥物對SWS1沒有明顯影響。結(jié)果 見表1。
[0043] 2.2對自由活動(dòng)去卵巢大鼠快速眼球運(yùn)動(dòng)睡眠的影響
[0044] 與空白對照組比，模型對照組大鼠 REM顯著延長(P<0.01)，說明造模成功；與模型 對照組比，茶苯海明組、化合物（I)組大鼠 REM縮短(P<0.05);與模型對照組相比，茶苯海明 與化合物（I)組合物組大鼠 REM顯著縮短(P<0.01)。藥物對SWS1沒有明顯影響。結(jié)果見表1。
[0045] 表1對自由活動(dòng)去卵巢大鼠睡眠時(shí)相的影響
[0046]
[004引圍絕經(jīng)期綜合征是指婦女在絕經(jīng)前后，由于卵巢功能退行性改變、雌激素水平低 下、神經(jīng)內(nèi)分泌功能失調(diào)、免疫功能下降所導(dǎo)致的W植物神經(jīng)系統(tǒng)功能素亂為主并伴有屯、 理癥狀的一組證候群。主要癥狀按系統(tǒng)分為精神神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、血管舒縮失調(diào)癥狀、泌尿系 統(tǒng)、生殖道及第二性征改變等。目前西醫(yī)治療上主要有激素替代法和W鎮(zhèn)靜催眠藥作為主 要治療藥物，同時(shí)配合非藥物治療(如睡眠衛(wèi)生教育、光照治療、屯、理和認(rèn)知行為治療)等療 法。鎮(zhèn)靜安眠藥物作用特點(diǎn)在于使失眠者入睡快，淺睡眠時(shí)間延長，中間不易醒，但都(95% W上)程度不等地縮短了 SWS2和REMS睡眠，從而產(chǎn)生了嚴(yán)重的不良反應(yīng)，如宿醉、耐受性及 依賴型等，使其應(yīng)用受到限制。隨著激素替代治療使用的不斷增加，其副作用受到越來越多 的重視，如誘發(fā)乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、肝腎功能異常等風(fēng)險(xiǎn)增加。
[0049] 本實(shí)驗(yàn)采用大鼠皮層腦電圖描記技術(shù)，首先對去卵巢大鼠的腦電圖進(jìn)行描記。結(jié) 果發(fā)現(xiàn)，去卵巢大鼠在睡眠時(shí)相上表現(xiàn)為SWS2明顯縮短。SWS2在整個(gè)睡眠時(shí)相中稱為慢波 睡眠深睡期，是最重要的睡眠成分。據(jù)此，國內(nèi)學(xué)者提出新型催眠藥物應(yīng)選擇性地延長慢波 睡眠深睡期，同時(shí)保證旭Μ正常比例。國內(nèi)學(xué)者還研究發(fā)現(xiàn)，慢波失眠者有深睡眠減少甚至 缺乏，REM(快動(dòng)眼睡眠)活動(dòng)度和密度低改變等。多項(xiàng)圍絕經(jīng)期綜合征流行病學(xué)調(diào)查表明， 我國圍絕經(jīng)期癥狀中尤W睡眠障礙發(fā)生率高。本研究結(jié)果表明，去卵巢大鼠與假手術(shù)組在 睡眠時(shí)相上表現(xiàn)為SWS2明顯縮短，與圍絕經(jīng)期患者主要癥狀為睡眠障礙相一致，從腦電圖 方面為圍絕經(jīng)期患者的臨床表現(xiàn)提供了依據(jù)。
[0050] 上述結(jié)果表明，茶苯海明、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，對卵巢衰退引起的睡眠障礙具 有治療作用；茶苯海明和化合物（I)聯(lián)合作用時(shí)，治療作用進(jìn)一步提高，可W開發(fā)成治療更 年期綜合征W及睡眠障礙的藥物。
[0051] 上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不W此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，2. -種茶苯海明的藥物組合物，其特征在于:包括茶苯海明、如權(quán)利要求1所述的化合 物(I)和藥學(xué)上可W接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶苯海明的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可W接受的載體 包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體 或潤滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶苯海明的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、膠 囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、 栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含W下操作步驟：（a)將木 芙蓉葉粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸 乙醋和水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物； (b)步驟(a)中正下醇萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇 洗脫10個(gè)柱體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70 %乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b)中70 %乙 醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲燒-甲醇梯 度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(C)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1、4:1 和2:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~15個(gè)柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。7. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療更年期綜合征W及睡眠障礙的藥物中的應(yīng) 用。8. 權(quán)利要求2~4任一所述的茶苯海明的藥物組合物在制備治療更年期綜合征W及睡 眠障礙的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P25/20GK106083768SQ201610472633
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月22日
【發(fā)明人】陳露
【申請人】陳露