一種苯酚茶酸素及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種苯酚茶酸素及其制備方法，可用于阿爾茨海默氏癥(也阿爾茨海 默癥)癡呆癥及其它神經(jīng)/神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行性退化病變的治療藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前全世界有3600萬人生活在阿爾茨海默氏癥的痛苦當(dāng)中。世界上有九分之一年 齡在65歲以上的人有癡呆癥狀，在2013年，與阿爾茨海默癡呆癥有關(guān)的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)超過 二萬二千億美金，阿爾茨海默癡呆癥是最常見的癡呆癥，占總的癡呆癥的50%至75%，隨著 年齡的增加比例也增加。根據(jù)世界衛(wèi)生組織2013報(bào)告，全世界有超過25%-50%的85歲老人 患阿爾茨海默癡呆癥。人超過60歲，老年癡呆癥(主要含阿爾茨海默氏癥)在低/中收入地區(qū) 的人數(shù)是高收入地區(qū)的兩倍。這些阿爾茨海默癡呆癥目前在世界上所構(gòu)成的社會(huì)負(fù)擔(dān)的經(jīng) 濟(jì)成本超過每年兩千零四億美金。在高收入國家，非正式護(hù)理（45%)和正式的社會(huì)護(hù)理 (40%)占大多數(shù)的成本，而直接醫(yī)療費(fèi)用占（15%)，主要是由于沒有有效的藥物。在低收入 和中等偏低收入國家，患有老年癡呆癥是得不到護(hù)理的，老年癡呆癥患者是沒有希望的，而 且無法生存。中國人口占世界總?cè)丝诘乃姆种?，是一個(gè)中等收入國家。是繼美國之后的第 二大老齡化國家。因此，整個(gè)中國需要抗阿爾茨海默氏癥/老年癡呆癥的產(chǎn)品是當(dāng)務(wù)之急。 世界衛(wèi)生組織報(bào)告說，到2050年，阿爾茨海默癡呆癥人數(shù)的增長將是現(xiàn)在的雙倍。在低/中 收入國家有71 %的65歲以上的人將會(huì)生活在阿爾茨海默氏癥痛苦中。此外，癡呆癥研究小 組對(duì)拉丁美洲，亞洲和加勒比海的20個(gè)低或中等收入國家的衰老狀況的研究表明，有三分 之二的癡呆癥病例發(fā)生在這些發(fā)展中國家，但目前的數(shù)據(jù)只有10%是在這些國家和地區(qū)產(chǎn) 生的。事實(shí)上在低收入國家中，估計(jì)有更高的老年癡呆癥的發(fā)生率。根據(jù)美國疾病控制中心 (2013)的報(bào)告，相比于糖尿病，癌癥，心臟病和中風(fēng)的死亡率的下降，阿爾茨海默癡呆癥的 死亡率卻顯著增加，原因是由于缺乏有效的藥物治療。因此，阿爾茨海默癡呆癥目前被認(rèn)定 為"世紀(jì)疾病"。低收入國家更為需要阿爾茨海默癡呆癥的藥物。世界各國已經(jīng)組織研究，為 能找到一種可對(duì)抗阿爾茨海默癡呆癥治療方法。截至2012年，超過1000個(gè)單位組織的臨床 試驗(yàn)已經(jīng)或正在開展，以尋找方法來治療阿爾茨海默癡呆癥，但結(jié)果是不理想的和未知的。 到目前為止，現(xiàn)有的治療方法只能暫時(shí)改善癥狀，但都不能逆轉(zhuǎn)疾病的進(jìn)展和預(yù)防阿爾茨 海默癡呆癥的發(fā)生。最近的研究發(fā)現(xiàn)，各種對(duì)抗阿爾茨海默癡呆癥藥物的開發(fā)主要集中在 減少過度的的定粉狀蛋白沉淀(AP)，而降低的定粉狀蛋白沉淀的治療的臨床實(shí)驗(yàn)都失敗了。 這說明了過度的N定粉狀蛋白沉淀只是阿爾茨海默癡呆癥的病理改變中的一種現(xiàn)象，它不 是產(chǎn)生、治療效果的關(guān)鍵靶點(diǎn)。而導(dǎo)致阿爾茨海默癡呆癥進(jìn)展的機(jī)理還是未知的。淀粉狀 蛋白沉淀"是阿爾茨海默癡呆癥發(fā)病原因或僅僅是阿爾茨海默癡呆癥的一個(gè)副產(chǎn)品是不清 楚的。
[0003] 除了過度的財(cái)定粉狀蛋白沉淀的發(fā)病理論之外，乙酰膽堿理論，鈣代謝理論，過氧 化理論等及與其相關(guān)的藥物使用，都沒有得到臨床認(rèn)可的結(jié)果。中利凡斯的明，膽堿酯酶抑 制劑，和伐尼克蘭的煙堿型乙酰膽堿受體a4P2亞型，在阿爾茨海默癡呆癥患者的給藥研究 中與安慰劑相比，給藥患者的日?；顒?dòng)和認(rèn)知能力表現(xiàn)有輕度改善或無改善。在美金剛的 安全性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)中，試用美金剛?cè)ブ委煱柎暮ＤV呆癥的輕度認(rèn)知功能障礙，但結(jié)果 顯示和安慰劑比較，美金剛并沒有改善患者的輕度認(rèn)知功能障礙和認(rèn)知功能，而且它會(huì)有 增加胃腸道損害的風(fēng)險(xiǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種苯酚茶酸素及其制備方法，用于阿爾茨海默氏癥(也阿 爾茨海默癥)癡呆癥及其它神經(jīng)/神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行性退化病變的治療藥物。
[0005] 本發(fā)明所述的苯酚茶酸素(PDT0P)，是合成出來的黃酮類化合物。又名苯酚二氫黃 酉同酉享，英文:piper idinium2，3_dihydroxy-5-( (2R，3R) -3，5，7_tr ihydroxy-4-oxochroman-2-yl)phendate)
[0007] 本發(fā)明所述的苯酚茶酸素的制備方法：
[0008] 將五毫摩爾（5mmol，1.6g)二氫楊梅素加入到20毫升甲醇溶解30分鐘，將溶解的溶 液放置入冰槽，用5.5毫摩爾的哌啶，在-10°C的氬氣存在下滴定入二氫
[0010] 楊梅素甲醇液，放置20分鐘使其反應(yīng)完全，然后，在低壓真空情況下濃縮反應(yīng)液， 過濾后，用甲醇洗三遍即可獲得苯酚茶酸素(~2g)。
[0011] 二氫楊梅素的制備方法：
[0012] 紫杉葉素二氫橡黃素在黃酮羥化酶和黃酮單氧化酶存在下常溫反應(yīng)，成為二氫楊 梅素。
[0013] 苯酚茶酸素的制備：
[0015] 二氫楊梅素屬黃酮類化合物，存在于許多植物的花、葉、果實(shí)中，多以苷的形式存 在，如蘆丁 (蕓香苷），槲皮苷，金絲桃苷等。
[0016] 二氫楊梅素的來源可以是從枳具子，藤茶，杜鵑科花類，和松類葉/籽的自然產(chǎn)物 中提取，也可以是合成。兩種方法在中國已經(jīng)形成大規(guī)模生產(chǎn)模式。但是由于對(duì)光照的易感 性和溶解度低的特點(diǎn)，使得二氫楊梅素在使用上受到了局限，藥用效果也會(huì)存在不穩(wěn)定。
[0017] 阿爾茨海默氏癡呆癥(AD)是神經(jīng)進(jìn)行性退化疾病變，阿爾茨海默癥的病患除了認(rèn) 知/學(xué)習(xí)能力減退，精神神經(jīng)癥狀，如焦慮和癲癇發(fā)作都分別在阿爾茨海默癡呆癥患者中看 到高達(dá)70 %和17 %，這表明中樞抑制神經(jīng)一伽馬氨基丁酸(GABARs)神經(jīng)間的傳遞功能障 礙，而且這也是伽馬氨基丁酸參與阿爾茨海默癡呆癥的發(fā)病的機(jī)制的證據(jù)。苯酚茶酸素是 一種合成的苯酚黃酮物，是伽馬氨基丁酸的調(diào)節(jié)劑。苯酚茶酸素的效果和目前二氫楊梅素 和臨床上使用的美金剛(30毫克/公斤/天)的效果進(jìn)行比較，對(duì)阿爾茨海默氏癡呆癥的基因 改造(Tg2576)四月齡小鼠給與苯酚茶酸素(0.5毫克/公斤/天)3個(gè)月口服治療。這種阿爾茨 海默氏癡呆癥樣病變小鼠已經(jīng)被證明，在成年(6月齡）以后，會(huì)逐漸產(chǎn)生阿爾茨海默氏癡呆 癥具有的腦神經(jīng)內(nèi)的定粉狀蛋白沉淀(AP)，認(rèn)知能力和學(xué)習(xí)能力障礙等阿爾茨海默氏癡呆 癥樣病理生理改變。開始給藥以后每月進(jìn)行一次測試，以隨時(shí)觀察苯酚茶酸素對(duì)阿爾茨海 默氏癡呆癥發(fā)病的預(yù)防和治療作用。比較與二氫楊梅素，行為實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果顯示，苯酚茶酸 素給藥的小鼠在有阿爾茨海默氏癡呆癥的基因改造的情況下沒有出現(xiàn)明顯的認(rèn)知能力改 變，沒有出現(xiàn)焦慮增加和癲癇發(fā)作的易感性。病理上，苯酚茶酸素明顯的降低腦神經(jīng)內(nèi)的定 粉狀蛋白沉淀。從阿爾茨海默氏癡呆癥小鼠（8月齡)海馬齒狀回神經(jīng)元的電生理(膜片鉗） 記錄顯示，伽馬氨基丁酸介導(dǎo)的抑制性突觸后自然電流釋放(mIPSC)的頻率和振幅減少，突 觸間維持抑制電流(synaptic tonic current)降低。而苯酸茶酸素的服用，阿爾茨海默氏 癡呆癥鼠海馬齒狀回神經(jīng)元上的伽馬氨基丁酸-介導(dǎo)的電流有效的得到恢復(fù)。定量分析顯 示，神經(jīng)受體支撐蛋白（gephyrin)，也是調(diào)節(jié)伽馬氨基丁酸受體突觸形成和伽馬氨基丁酸 受體突觸后可塑性的錨定蛋白，在阿爾茨海默氏癡呆癥鼠腦內(nèi)，支撐蛋白降低至50%以下， 特別是海馬和皮層。苯酚茶酸素的治療有效的恢復(fù)支撐蛋白gephyrin水平。并且，經(jīng)過苯酚 茶酸素的給與，腦神經(jīng)內(nèi)的定粉狀蛋白沉淀明顯減少。這些結(jié)果表明，苯酚茶酸素的給與不 僅可以改善技藝和認(rèn)知能力損傷，緩解憂郁，逆轉(zhuǎn)阿爾茨海默氏癡呆癥的病理改變包括減 少增加了的的定粉狀蛋白沉淀，及停止或逆轉(zhuǎn)漸進(jìn)的神經(jīng)病理變化，恢復(fù)gephyrin水平，及 恢復(fù)伽馬氨基丁酸系統(tǒng)的傳輸和功能性。更重要的是，苯酚茶酸素可以對(duì)有潛在阿爾茨海 默氏癡呆癥基因改變的生物體有預(yù)防作用。此項(xiàng)發(fā)明證明，苯酚茶酸素的作用靶點(diǎn)是神經(jīng) 系統(tǒng)內(nèi)起連結(jié)和修復(fù)作用的蛋白質(zhì)如gephyrin。苯酚茶酸素是一種很有潛力和前途的治療 阿爾茨海默氏癡呆癥的候選藥物。
[0018] 迄今為止，對(duì)阿爾茨海默氏病發(fā)病機(jī)理的研究具有建模的困難限制，不可能進(jìn)行 人體試驗(yàn)。轉(zhuǎn)基因小鼠模型是經(jīng)過技術(shù)改造，具有的定粉狀蛋白沉淀及攜帶一個(gè)或幾個(gè)突變 的家族性阿爾茨海默病基因的過度表達(dá)而產(chǎn)生的。雖然這些模型不能完全復(fù)制人類的阿爾 茨海默氏病，但是已經(jīng)獲得科學(xué)界認(rèn)可，它們可以提供有價(jià)值的對(duì)于給出阿爾茨海默氏癡 呆癥的發(fā)病機(jī)制的證據(jù)，以及進(jìn)行藥物開發(fā)的測試以檢測藥物的治療效果。
[0019] 人的研究表明，認(rèn)知/記憶和學(xué)習(xí)能力的喪失，伴有精神神經(jīng)癥狀，如焦慮和癲癇 等，在阿爾茨海默癡呆癥患者中分別高達(dá)70%和17%。這提示伽馬氨基丁酸能傳輸?shù)墓δ?障礙。伽馬氨基丁酸是至關(guān)重要的參與調(diào)節(jié)必要的正常認(rèn)知功能的神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)。其伽馬 氨基丁酸突觸的損失，和異常的伽馬氨基丁酸突觸活動(dòng)導(dǎo)致阿爾茨海默癡呆癥患者的認(rèn)知 缺陷有關(guān)。然而，發(fā)病機(jī)制尚不清楚。
[0020] Gephyrin是抑制性突觸后的關(guān)鍵的支撐蛋白。Gephyrin是一種多聚體支架蛋白， 功能為引導(dǎo)伽馬氨基丁酸受體在神經(jīng)突觸后形成簇狀抑制位點(diǎn)，并錨固伽馬氨基丁酸受體 在突觸后膜的位置。Gephyrin基因去除和去除實(shí)驗(yàn)表明伽馬氨基丁酸在突觸后膜聚集減 少，伴隨伽馬氨基丁酸突觸間傳導(dǎo)障礙。因此，正常質(zhì)量和數(shù)量的gephyrin對(duì)維持伽馬氨基 丁酸突觸間傳導(dǎo)的功能是至關(guān)重要的。然而，雖然有報(bào)告指出gephyrin在阿爾茨海