一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物合成技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 二丁酰環(huán)磷腺苷鈣為環(huán)磷腺苷（cAMP)的衍生物。由于cAMP不易透過細(xì)胞膜，而 且進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的cAMP很快地被細(xì)胞內(nèi)之磷酸二酯酶水解，故制成環(huán)磷酸腺苷的衍生物。環(huán) 磷酸腺苷雙丁酰酯對(duì)細(xì)胞的滲透性比cAMP強(qiáng)，且能對(duì)抗機(jī)體內(nèi)磷酸二酯酶的破壞作用，故 其作用時(shí)間和速度均比cAMP持久和迅速，是具有更佳體內(nèi)藥物濃度分布和代謝動(dòng)力學(xué)特 性的新一代產(chǎn)品。二丁酰環(huán)磷腺苷鈣可以在體內(nèi)參與細(xì)胞能量代謝和蛋白質(zhì)合成，從而保 護(hù)瀕死的細(xì)胞，加速修復(fù)過程，使腎小管的完整性得以保護(hù)，進(jìn)而改善腎內(nèi)血流動(dòng)力學(xué)和循 環(huán)，增加腎血流量，達(dá)到保護(hù)腎臟功能的作用。二丁酰環(huán)磷腺苷鈣具有廣泛的細(xì)胞活化功 能，可參與人體內(nèi)糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大代謝的調(diào)節(jié)，對(duì)擴(kuò)張血管，舒張平滑肌，改善心肌缺 血缺氧，特別對(duì)心肌細(xì)胞的損傷修復(fù)及減輕缺血區(qū)再灌注的損傷有著十分重要的作用。二 丁酰環(huán)磷腺苷鈣作為一種治療與營(yíng)養(yǎng)兼顧的心血管制劑，應(yīng)用在老年穩(wěn)定型心絞痛人群 中，療效肯定，能提高生活質(zhì)量。近期藥理學(xué)研究表明，G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路中存在 cAMP調(diào)控作用，因此二丁酰環(huán)磷腺苷鈣還可能適用于與細(xì)胞凋亡和遺傳免疫性等相關(guān)的疾 病治療。
[0003] 二磷酸腺苷鈣作為蛋白酶致活劑，目前臨床上主要用于治療心血管疾病如心絞 痛、急性心肌梗死的輔助治療，亦可用于心肌炎、心源性休克、手術(shù)后網(wǎng)膜下出血和銀肩病， 并可輔助其他抗癌藥治療白血病。
[0004] 目前多采用化學(xué)合成方法純化二丁酰環(huán)磷腺苷鈣，但是純化方法操作復(fù)雜，且產(chǎn) 品純度較低（液相純度85% )，影響產(chǎn)品療效。
[0005] 因此，提供一種純度好、利于工業(yè)化生產(chǎn)的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法具有現(xiàn) 實(shí)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明提供一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法。該方法獲得的二丁酰 環(huán)磷腺苷其液相色譜純度達(dá)到98~98. 5%。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
[0008] 本發(fā)明提供了一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法，包括以下步驟：
[0009] 獲得二丁酰環(huán)磷腺苷鈣粗品；
[0010] 取所述二丁酰環(huán)磷腺苷鈣粗品與醇混合后，于0°C與醚混合、過濾，收集濾渣，干 燥。
[0011] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述醇為乙醇、丙醇、丁醇、或異丁醇中的一種或兩者 以上的混合物。
[0012] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述醚為乙醚、異丙醚、或甲基叔丁基醚中的一種或兩 者以上的混合物。
[0013] 作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的純化方法中，所述二丁酰環(huán)磷腺苷鈣粗品的制備方法包 括以下步驟：
[0014] 步驟1 :獲得環(huán)磷腺苷三乙胺鹽；
[0015] 步驟2 :在非質(zhì)子溶劑中將所述環(huán)磷腺苷三乙胺鹽與正丁酸酐混合，在有機(jī)堿催 化下發(fā)生?；磻?yīng)，水解，收集二丁酰環(huán)磷腺苷；
[0016] 所述?；磻?yīng)為30°C~80°C下避光反應(yīng)20~36h ;
[0017] 步驟3 :取所述二丁酰環(huán)磷腺苷成鹽，即得。
[0018] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述二丁酰環(huán)磷腺苷鈣粗品的制備方法中步驟2優(yōu)選 在氮?dú)獗Ｗo(hù)的條件下發(fā)生?；磻?yīng)。
[0019] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，以g/mL/mL計(jì)，步驟2所述酰化反應(yīng)中所述環(huán)磷腺苷三 乙胺鹽、所述正丁酸酐、所述非質(zhì)子溶劑的質(zhì)量體積比為1 :4~10 :50~60。
[0020] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，步驟2中所述非質(zhì)子溶劑為四氫呋喃、1，4_二氧六環(huán)、 N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、或吡啶中的一種或兩者以上的混合物。所有適用于?；磻?yīng)的 非質(zhì)子溶劑都在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，在此不作限定。
[0021] 本發(fā)明所述的技術(shù)方案中，所述的有機(jī)堿是4-二甲氨基吡啶、三乙胺、或二異丙 基乙基胺。
[0022] 作為優(yōu)選，步驟1具體為：將三乙胺鹽與水混合后，再與環(huán)磷腺苷混合，制得環(huán)磷 腺苷三乙胺鹽。
[0023] 作為優(yōu)選，步驟1中所述再與環(huán)磷腺苷混合之后還包括第一純化的步驟。
[0024] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述第一純化具體為在50°C下真空干燥獲得固體，將 非質(zhì)子溶劑溶解所述固體，濃縮、干燥。凡是能夠達(dá)到純化效果的操作均在本發(fā)明的保護(hù)范 圍內(nèi)，本發(fā)明在此不作限定。
[0025] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，步驟3中所述成鹽具體為將鈣鹽與醇-水混合溶液混 合后，與所述二丁酰環(huán)磷腺苷的醇混合發(fā)生成鹽反應(yīng)。
[0026] 在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，步驟2中所述收集二丁酰環(huán)磷腺苷具體為于25°C~ 45°C減壓濃縮除去溶劑后，加30-50倍體積的水，用醚洗滌水相2次，40°C~60°C減壓蒸餾， 再用二氯甲烷萃取剩余水相，合并有機(jī)相，減壓蒸餾除去二氯甲烷，得二丁酰環(huán)磷腺苷。
[0027] 具體的，本發(fā)明提供的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法可以為：
[0028] 第一步，環(huán)磷腺苷三乙胺鹽的制備：
[0029] 將三乙胺鹽與純化水?dāng)嚢杈鶆?，投入環(huán)磷腺苷，攪拌完全溶解，混合液在50°C下真 空干燥，得固體。用非質(zhì)子溶劑溶解上述固體，再此濃縮旋干，得環(huán)磷腺苷三乙胺鹽。
[0030] 第二步，二丁酰環(huán)磷腺苷的制備：
[0031] 取一定量的環(huán)磷腺苷與正丁酸酐，以非質(zhì)子溶劑為溶劑，一定溫度下避光反應(yīng)一 段時(shí)間，加水水解1~3h，25°C~45°C減壓濃縮除去溶劑，加水到一定體積，有機(jī)溶劑洗滌 水相，水相50°C減壓蒸餾，再以二氯甲烷萃取剩余水相，合并有機(jī)相，減壓除去二氯甲燒，得 到微粘的淡黃色二丁酰環(huán)磷腺苷固體；
[0032] 第三步，二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化：
[0033] 取一定量的二丁酰環(huán)磷腺苷溶于一定體積的醇類溶劑中；取一定量的氯化鈣溶于 醇類溶劑與水的混合液中；將兩溶液混合，室溫15~35°C反應(yīng)lOmin過濾，減壓除去醇類 溶劑和水，再以相同醇類溶劑溶解，低溫加入醚類溶劑，過濾，即得高純度二丁酰環(huán)磷腺苷 鈣白色粉末或類白色粉末；
[0034] 本發(fā)明提供的一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法，包括以下步驟：獲得二丁酰環(huán) 磷腺苷鈣粗品；取該粗品與醇混合后，于〇°C與醚混合、過濾，收集濾渣，干燥。本發(fā)明提供 的純化方法獲得的二丁酰環(huán)磷腺苷其液相色譜純度達(dá)到98~98. 5%。各項(xiàng)指標(biāo)均符合藥 典標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)簡(jiǎn)化了純化工藝，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0035] 圖1示本發(fā)明提供的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的制備工藝；
[0036] 圖2示實(shí)施例1制備的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣質(zhì)譜圖；
[0037] 圖3示二丁酰環(huán)磷腺苷鈣標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC譜圖；
[0038] 圖4示實(shí)施例1制備的二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的HPLC譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0039] 本發(fā)明公開了一種二丁酰環(huán)磷腺苷鈣的純化方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文 內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人 員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí) 施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法 和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)