晾干，與4°C下保存，備用，制得的即為一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料。
[0014]所述的木醋桿菌編號為ATCC 23770。
[0015]所述的氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液是由氯化鈣、無水乙醇和蒸餾水按質(zhì)量比為2:5:10復(fù)配得到。
[0016]本發(fā)明制得的復(fù)合醫(yī)用敷料可以用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大4cm的復(fù)合醫(yī)用敷料覆蓋創(chuàng)面，之后再以無菌紗布包扎，使敷料與創(chuàng)面緊貼，更換時間根據(jù)創(chuàng)面滲出液而定，滲出液多，敷料吸收飽和應(yīng)及時更換，滲出液少，可隔2天更換即可。
[0017]首先將250g硫酸鹽紙漿廢料和400?500mLpH為7.5的檸檬酸緩沖溶液混合后倒入酶解罐中，向酶解罐中加入4g纖維素酶，用攪拌棒攪拌均勻后移入恒溫箱中，在45°C下酶解42h，將酶解物放入高速離心機，在5°C下以4500g的離心力離心13min，分離得到木漿酶解上清液，備用;稱取4g葡萄糖、1.5g酵母粉、0.8g蛋白胨和7mL蒸餾水放入滅菌后的培養(yǎng)皿中，用玻璃棒攪拌均勻，通過接種環(huán)挑取2環(huán)木醋桿菌菌株接種于培養(yǎng)皿中，于35°C下培養(yǎng)14h，制得木醋桿菌復(fù)壯種子液;取150mL木漿酶解上清液，向里加入2g酵母粉和2.5g胰蛋白胨，用濃度為0.02mol/L的硫酸溶液調(diào)節(jié)pH至5.5，在108°C下滅菌25min，待其冷卻后以13%的接種量接入上述制得的復(fù)壯種子液，放入恒溫培養(yǎng)箱，在35°C下培養(yǎng)8天;培養(yǎng)結(jié)束后，用鑷子取出培養(yǎng)皿和空氣交界面形成的凝膠狀細菌纖維素，用蒸餾水反復(fù)沖洗3?5次后放入水浴鍋中，在85°C下水浴45min，去除殘余菌體，再用去離子水沖洗至中性，得細菌纖維素;將碎蠶繭和質(zhì)量濃度為5%的碳酸鈉溶液按固液比為1:50進行混合，在96°C下水浴脫膠35min，再放入氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液中浸泡，于75°C下水浴直至絲素蛋白完全溶解;將溶解的絲素蛋白溶液靜置過夜，裝入透析袋中，以雙蒸水為透析液進行透析65h，每2.5h更換一次透析液，透析結(jié)束后，將透析袋中溶液以6500r/min的轉(zhuǎn)速離心處理，分離得到上清液；將細菌纖維素和上述得到的上清液按固液比為1:2進行混合后，倒入聚四氟乙烯模具中，進行冷凍干燥得復(fù)合膜，將得到的復(fù)合膜放入烘箱，于55°C下干燥1.5h，再將其放入圓形容器中，加入適量濃度為0.lmol/L的氯化鈣溶液將復(fù)合膜浸沒，常溫下浸泡2.5h后再加入等體積的0.2mol/L的磷酸二氫鈉溶液，繼續(xù)常溫浸泡2.5天;將浸泡后的復(fù)合膜用雙蒸水和無水乙醇反復(fù)沖洗4次后，自然晾干，與5°C下保存，備用，制得的即為一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料。
[0018]所述的木醋桿菌編號為ATCC 23770。
[0019]所述的氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液是由氯化鈣、無水乙醇和蒸餾水按質(zhì)量比為2:5:10復(fù)配得到。
[0020]本發(fā)明制得的復(fù)合醫(yī)用敷料可以用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大5cm的復(fù)合醫(yī)用敷料覆蓋創(chuàng)面，之后再以無菌紗布包扎，使敷料與創(chuàng)面緊貼，更換時間根據(jù)創(chuàng)面滲出液而定，滲出液多，敷料吸收飽和應(yīng)及時更換，滲出液少，可隔2天更換即可。
[0021]首先將300g硫酸鹽紙漿廢料和500mLpH為8的檸檬酸緩沖溶液混合后倒入酶解罐中，向酶解罐中加入5g纖維素酶，用攪拌棒攪拌均勻后移入恒溫箱中，在50°C下酶解48h，將酶解物放入高速離心機，在6°C下以5000g的離心力離心15min，分離得到木漿酶解上清液，備用；稱取5g葡萄糖、2g酵母粉、lg蛋白胨和10mL蒸餾水放入滅菌后的培養(yǎng)皿中，用玻璃棒攪拌均勻，通過接種環(huán)挑取2環(huán)木醋桿菌菌株接種于培養(yǎng)皿中，于40°C下培養(yǎng)15h，制得木醋桿菌復(fù)壯種子液；取200mL木漿酶解上清液，向里加入3g酵母粉和3g胰蛋白胨，用濃度為
0.02mol/L的硫酸溶液調(diào)節(jié)pH至6，在110°C下滅菌30min，待其冷卻后以15%的接種量接入上述制得的復(fù)壯種子液，放入恒溫培養(yǎng)箱，在40°C下培養(yǎng)9天;培養(yǎng)結(jié)束后，用鑷子取出培養(yǎng)皿和空氣交界面形成的凝膠狀細菌纖維素，用蒸餾水反復(fù)沖洗5次后放入水浴鍋中，在90°C下水浴60min，去除殘余菌體，再用去離子水沖洗至中性，得細菌纖維素;將碎蠶繭和質(zhì)量濃度為5%的碳酸鈉溶液按固液比為1:50進行混合，在100°C下水浴脫膠40min，再放入氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液中浸泡，于80°C下水浴直至絲素蛋白完全溶解;將溶解的絲素蛋白溶液靜置過夜，裝入透析袋中，以雙蒸水為透析液進行透析70h，每3h更換一次透析液，透析結(jié)束后，將透析袋中溶液以7000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理，分離得到上清液;將細菌纖維素和上述得到的上清液按固液比為1:2進行混合后，倒入聚四氟乙烯模具中，進行冷凍干燥得復(fù)合膜，將得到的復(fù)合膜放入烘箱，于60°C下干燥2h，再將其放入圓形容器中，加入適量濃度為0.lmol/L的氯化鈣溶液將復(fù)合膜浸沒，常溫下浸泡3h后再加入等體積的0.2mol/L的磷酸二氫鈉溶液，繼續(xù)常溫浸泡3天;將浸泡后的復(fù)合膜用雙蒸水和無水乙醇反復(fù)沖洗5次后，自然晾干，與6°C下保存，備用，制得的即為一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料。
[0022]所述的木醋桿菌編號為ATCC 23770。
[0023]所述的氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液是由氯化鈣、無水乙醇和蒸餾水按質(zhì)量比為2:5:10復(fù)配得到。
[0024]本發(fā)明制得的復(fù)合醫(yī)用敷料可以用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大6cm的復(fù)合醫(yī)用敷料覆蓋創(chuàng)面，之后再以無菌紗布包扎，使敷料與創(chuàng)面緊貼，更換時間根據(jù)創(chuàng)面滲出液而定，滲出液多，敷料吸收飽和應(yīng)及時更換，滲出液少，可隔3天更換即可。
【主權(quán)項】
1.一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料的方法，其特征在于具體制備步驟為: (1)將200?300g硫酸鹽紙漿廢料和400?500mLpH為7?8的檸檬酸緩沖溶液混合后倒入酶解罐中，向酶解罐中加入3?5g纖維素酶，用攪拌棒攪拌均勻后移入恒溫箱中，在40?50°C下酶解36?48h，將酶解物放入高速離心機，在4?6°C下以4000?5000g的離心力離心10?15min，分離得到木楽酶解上清液，備用； (2)稱取3?5g葡萄糖、1?2g酵母粉、0.5?lg蛋白胨和5?10mL蒸饋水放入滅菌后的培養(yǎng)皿中，用玻璃棒攪拌均勻，通過接種環(huán)挑取1?2環(huán)木醋桿菌菌株接種于培養(yǎng)皿中，于30?40°C下培養(yǎng)12?15h，制得木醋桿菌復(fù)壯種子液； (3)取100?200mL木漿酶解上清液，向里加入1?3g酵母粉和2?3g胰蛋白胨，用濃度為0.02mol/L的硫酸溶液調(diào)節(jié)pH至5?6，在105?110°C下滅菌20?30min，待其冷卻后以10?15%的接種量接入上述制得的復(fù)壯種子液，放入恒溫培養(yǎng)箱，在30?40°C下培養(yǎng)7?9天； (4)培養(yǎng)結(jié)束后，用鑷子取出培養(yǎng)皿和空氣交界面形成的凝膠狀細菌纖維素，用蒸餾水反復(fù)沖洗3?5次后放入水浴鍋中，在80?90°C下水浴30?60min，去除殘余菌體，再用去離子水沖洗至中性，得細菌纖維素； (5)將碎蠶繭和質(zhì)量濃度為5%的碳酸鈉溶液按固液比為1:50進行混合，在95?100°C下水浴脫膠30?40min，再放入氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液中浸泡，于70?80°C下水浴直至絲素蛋白完全溶解； (6)將溶解的絲素蛋白溶液靜置過夜，裝入透析袋中，以雙蒸水為透析液進行透析60?70h，每2?3h更換一次透析液，透析結(jié)束后，將透析袋中溶液以6000?7000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理，分離得到上清液； (7)將細菌纖維素和上述得到的上清液按固液比為1:2進行混合后，倒入聚四氟乙烯模具中，進行冷凍干燥得復(fù)合膜，將得到的復(fù)合膜放入烘箱，于50?60°C下干燥1?2h，再將其放入圓形容器中，加入適量濃度為0.lmol/L的氯化鈣溶液將復(fù)合膜浸沒，常溫下浸泡2?3h后再加入等體積的0.2mol/L的磷酸二氫鈉溶液，繼續(xù)常溫浸泡2?3天； (8)將浸泡后的復(fù)合膜用雙蒸水和無水乙醇反復(fù)沖洗3?5次后，自然晾干，與4?6°C下保存，備用，制得的即為一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料的制備方法，其特征在于:所述的木醋桿菌編號為ATCC 23770。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料的制備方法，其特征在于:所述的氯化鈣、乙醇和水的三元組分溶液是由氯化鈣、無水乙醇和蒸餾水按質(zhì)量比為2:5:10復(fù)配得到。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種廢紙漿制備細菌纖維素復(fù)合醫(yī)用敷料的方法，屬于醫(yī)用敷料領(lǐng)域。本發(fā)明從廢紙漿中制備出細菌纖維素，再和從碎蠶繭中提取的絲素蛋白進行混合得復(fù)合膜，最后通過浸泡、沖洗、晾干得到復(fù)合醫(yī)用敷料，本發(fā)明即解決細菌纖維素不易貼合的問題，又改善絲素蛋白無紡布單獨作為敷料使用存在的保濕能力差、生物相容性不佳的不足，而且使廢紙漿得到綜合利用，生產(chǎn)成本低廉。
【IPC分類】C12P19/04, A61L15/42, A61L15/32, A61L15/28
【公開號】CN105483178
【申請?zhí)枴緾N201510987559
【發(fā)明人】高玉梅, 林大偉, 王志慧
【申請人】常州亞環(huán)環(huán)?？萍加邢薰?br>【公開日】2016年4月13日
【申請日】2015年12月27日