譜，其譜圖如圖3所示。
[0047]IR(KBr):3435,2927,1624,1450,1389,1310,1282,1253,1228,1161,1022,890， 755,731cm-1。
[0048] (2)元素分析結果如上述表1所示。
[0049] (3)晶體結構如圖4所示。
[0050] 由此，可以確定所得的墨綠色固體產物即為9-苯并噻蒽腙-釕(II)配合物（以下簡 稱配合物1)，其結構式如下：
[0051]
[0052] 實施例2
[0053] 準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與0.8mmol二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L溶解于55mL的ΙΟΟν/ν%乙醇中，將二氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)溶解于 10mL的丙酮中，兩種溶液混合，在80°C下反應36小時，濃縮蒸發(fā)除去大部分溶劑(溶劑加入 量的80%)后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配合物1(產率80%)。
[0054] 實施例3
[0055] 準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與1.5mmol二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L溶解于40mL的80v/v%甲醇和90v/v%乙醇(體積比為20:1)混合溶液中，將二 氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)溶解于20mL的丙酮中，兩種溶液混合，在50°C下反應6小時， 濃縮蒸發(fā)除去大部分溶劑(溶劑加入量的85%)后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配合物1 (產率83%)。
[0056]實施例4
[0057] 準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L溶解于20mL的80v/v%甲醇和75v/v%正丙醇(體積比為1:100)混合溶液中， 將二氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)溶解于20mL丙酮溶液中，兩種溶液混合，在70°C下反應 24小時，濃縮蒸發(fā)除去大部分溶劑(溶劑加入量的78%)后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配 合物1(產率75%)。
[0058]實施例5
[0059]準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與l.Ommol二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L溶解于15mL的85v/v%甲醇溶液中，將二氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)溶解 于5mL熱丙酮中，兩種溶液混合，在65°C下反應28小時，濃縮蒸發(fā)除去大部分溶劑(溶劑加入 量的90%)后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配合物1(產率86%)。
[0060] 實施例6
[0061 ] 準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L溶解于30mL的95v/v%甲醇和83v/v%乙醇(體積比為60:1)混合溶液中，將二 氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)溶解于1OmL的丙酮中，兩種溶液混合，在70°C下反應15小時， 濃縮蒸發(fā)除去大部分溶劑(溶劑加入量的86%)后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配合物1 (產率87%)。
[0062] 實施例7
[0063] 準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與l.Ommol二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L和二氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)溶解于40mL的丙酮中，于50°C下反應27小 時，濃縮蒸發(fā)除去大部分溶劑(溶劑加入量的75%)后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配合物 1(產率 77%)。
[0064] 實施例8
[0065] 準確稱量物質的量為2.0mmol的配體L與二氯?四（二甲基亞砜）合釕 (II)，將配體L和二氯?四（二甲基亞砜)合舒（II)溶解于20mL的極性溶劑（由50v/v%甲醇、 50v/v%異丙醇和丙酮按18:1:1的體積比組成）中，在40°C下反應20小時，濃縮蒸發(fā)除去大 部分溶劑(溶劑加入量的85% )后，冷卻至室溫靜置，析出墨綠色配合物1 (產率81 % )。
[0066]為了充分說明本發(fā)明所述的配合物1在制藥中的用途，申請人對配合物1對多種人 腫瘤細胞株的增殖抑制活性進行了實驗：
[0067] 1、細胞株與細胞培養(yǎng)
[0068] 本實驗選用人肝癌細胞BEL-7402和Hep-G2、卵巢癌細胞SK-0V-3、人肺癌細胞NCI-H460、人胃癌細胞MGC80-3以及人正常肝細胞HL-7702等6種人類細胞株。
[0069] 所有細胞株均培養(yǎng)在含10wt%小牛血、100U/mL青霉素、100U/mL鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)液內，置37°C含體積濃度5 %C02孵箱中培養(yǎng)。
[0070] 2、待測化合物的配制
[0071] 所用的配體L和配合物1的純度2 95%，將其DMS0儲液用生理緩沖液稀釋后配制成 20ymol/L的終溶液，其中助溶劑DMS0的終濃度< 1%，測試該濃度下化合物對各種腫瘤細胞 生長的抑制程度。
[0072] 3、細胞生長抑制實驗(MTT法）
[0073] (1)取對數(shù)生長期的腫瘤細胞，經(jīng)胰蛋白酶消化后，用含10%小牛血清的培養(yǎng)液配 制成濃度為5000個/mL的細胞懸液，以每孔190yL接種于96孔培養(yǎng)板中，使待測細胞密度至 1000~10000孔(邊緣孔用無菌PBS填充）；
[0074] (2)5%⑶2,37°C孵育24h，至細胞單層鋪滿孔底，每孔加入一定濃度梯度的藥物10 yL，每個濃度梯度設4個復孔；
[0075] (3) 5 %C02，37°C孵育48小時，倒置顯微鏡下觀察；
[0076] (4)每孔加入 10yL的MTT溶液(5mg/mLPBS，S卩0·5%ΜΤΤ)，繼續(xù)培養(yǎng)4h;
[0077] (5)終止培養(yǎng)，小心吸去孔內培養(yǎng)液，每孔加入150yL的DMS0充分溶解甲瓚沉淀，振 蕩器混勻后，在酶標儀用波長為570nm，參比波長為450nm測定各孔的光密度值；
[0078] (6)同時設置調零孔(培養(yǎng)基、MTT、DMSO)，對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介 質、培養(yǎng)液、MTT、DMS0)。
[0079] (7)根據(jù)測得的光密度值(0D值），來判斷活細胞數(shù)量，0D值越大，細胞活性越強。利 用公式：
[0080]腫瘤細胞生長抑制率
[0081]計算化合物對各細胞株生長的抑制率，其結果如以下表2所示。
[0082]表2:配體L和配合物1對不同細胞株的增殖抑制率（％ )
[0083]
[0084]從抗腫瘤活性測試結果來看，配合物1對多種人腫瘤細胞株均顯示出較強的增殖 抑制活性，顯著高于配體L。其中，配合物1對人肝癌細胞Hep-G2和BEL-7402、卵巢癌細胞SK-0V-3的抑制作用最強，其抑制率分別為73.34 ± 0.97 %、58.80 ± 0.64%和65.23 ± 1.37 %， 活性與配體L相比提高了23%~70%以上;而其對肺癌細胞NCI-H460的抑制率則較L提高了 2倍以上。配合物1肝癌細胞HepG2的抑制率也顯著高于順鉑，相對于順鉑，配合物1提高了約 75%。另一方面，配合物1對人正常肝臟細胞HL-7702的細胞毒性仍然較?。ㄔ鲋骋种坡蕿?40.02±1.48%)，略高于配體以36.59±0.61%)，而顯著低于順鉑（55.66±3.46%)，顯示 出對腫瘤細胞良好的毒性選擇性。
[0085] 綜上所述，本發(fā)明所述的9-苯并噻蒽腙-釕（II)配合物表現(xiàn)出優(yōu)異的體外抗腫瘤 活性和選擇性，對腫瘤細胞的細胞毒性優(yōu)于L配體，具有良好的潛在藥用價值，有望用于各 種抗腫瘤藥物的制備。
【主權項】
1. 下式(I)所示化合物或其藥學上可接受的鹽：2. 權利要求1所述化合物的合成方法，其特征在于:取9-苯并噻蒽腙和二氯?四（二甲 基亞砜)合釕(II)在極性溶劑中進行配位反應，即得到目標產物。3. 根據(jù)權利要求2所述的合成方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 取9-苯并噻蒽腙和二氯?四（二甲基亞砜)合釕（II)，溶解于極性溶劑中，得到混合 溶液； 2) 所得混合溶液于常溫至極性溶劑的回流溫度范圍內進行配位反應； 3) 將反應后溶液濃過濾，分離出固體，即得到目標產物。4. 根據(jù)權利要求2或3所述的合成方法，其特征在于:所述的極性溶劑為丙酮，或者是丙 酮與選自含1~3個碳原子的低碳醇中的一種或兩種的組合，所述低碳醇的濃度為50~ ΙΟΟv/v%;在極性溶劑的組成中，所述丙酮在極性溶劑中所占的比例為大于或等于5v/v%。5. 根據(jù)權利要求4所述的合成方法，其特征在于：在極性溶劑的組成中，所述丙酮在極 性溶劑中所占的比例為1 〇~60v/v%。6. 根據(jù)權利要求2或3所述的合成方法，其特征在于:配位反應在50°C至極性溶劑的回 流溫度范圍內進行。7. 權利要求1所述化合物或其藥學上可接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應用。8. 以權利要求1所述化合物或其藥學上可接受的鹽為有效成分制備的抗腫瘤藥物。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種9-苯并噻蒽腙-釕(II)配合物及其合成方法和應用。所述的配合物是以取9-苯并噻蒽腙和二氯·四(二甲基亞砜)合釕(II)為原料，在極性溶劑中進行配位反應，制得到目標產物。申請人的研究表明，該配合物具有較好的選擇性，對多種人腫瘤細胞株(包括Hep-G2、MGC80-3、SK-OV-3、BEL-7402和NCI-H460腫瘤細胞)具有顯著的體外抗腫瘤活性，具有較好的潛在藥用價值，有望用于各種抗腫瘤藥物的制備。本發(fā)明所述配合物的結構式如下式(I)所示。
【IPC分類】C07F15/00, A61P35/00, A61K31/555
【公開號】CN105440085
【申請?zhí)枴緾N201511025168
【發(fā)明人】劉延成, 黃克斌, 陳振鋒, 覃其品, 王海璐, 黃秋香, 唐上峰
【申請人】廣西師范大學
【公開日】2016年3月30日
【申請日】2015年12月30日