~2倍柱體積。收集乙醇洗脫液，減 壓回收乙醇，調(diào)節(jié)至相對(duì)密度1. 02~1. 06 (30°C )，2~KTC冷藏12~24小時(shí)，濾過，濾液 用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至5. 0~6. 5,冷凍干燥，得提取物；將提取物用適量水溶解， 通過兩次半制備型RP-HPLC純化，即得純品。
[0141] 兩次半制備型RP-HPLC純化色譜條件同實(shí)施例1。
[0142] 實(shí)施例3丹酚酸Y的制備
[0143] 取丹參藥材，加水煎煮提取2次，第1次加6倍量水煮2小時(shí)，第2次加4倍量水 煮0. 5小時(shí)，合并煎液；冷卻至8~14°C，用鹽酸溶液調(diào)pH值至2. 0~3. 0,靜置8小時(shí)，取 上清液，濾過；濾液過聚酰胺柱（藥材重量：聚酰胺重量約為4 :1，徑高比為1 :4~6,聚酰 胺柱體積以Ikg聚酰胺6. 6L計(jì)算），用6倍柱體積的純化水沖洗，流速約為每小時(shí)1倍柱體 積，棄去流出液；再用8倍柱體積的0. 1 %碳酸氫鈉溶液洗脫，流速約為每小時(shí)1倍柱體積， 收集碳酸氫鈉洗脫液，用鹽酸溶液調(diào)PH值至3~4 ;過AB-8型大孔吸附樹脂柱（藥材重量： 大孔樹脂重量約為1 :1，徑高比約為1 :5~7)，用4倍柱體積的純化水沖洗，流速為每小時(shí) 約2倍柱體積，棄去水洗液；再用約2. 5倍柱體積80%乙醇洗脫，流速為每小時(shí)1~2倍柱 體積。收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，調(diào)節(jié)至相對(duì)密度1. 02~I. 06(30°C )，2~KTC冷 藏12~24小時(shí)，濾過，濾液用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至5. 0~6. 5,冷凍干燥，得提取 物；將提取物用適量水溶解，通過兩次半制備型RP-HPLC純化，即得純品。
[0144] 兩次半制備型RP-HPLC純化色譜條件同實(shí)施例1。
[0145] 實(shí)施例4丹酚酸Y的制備
[0146] 取丹參藥材，加水煎煮提取4次，第1次加3倍量水煮1小時(shí)，第2、3、4次各加4倍 量水、煮0. 5小時(shí)，合并煎液；冷卻至8~14°C，用鹽酸溶液調(diào)pH值至I. 0~2. 0,靜置4小 時(shí)，取上清液，濾過；濾液過聚酰胺柱（藥材重量：聚酰胺重量約為4 :1，徑高比為1 :4~6， 聚酰胺柱體積以Ikg聚酰胺6. 6L計(jì)算），用8倍柱體積的純化水沖洗，流速約為每小時(shí)1倍 柱體積，棄去流出液；再用6倍柱體積的0. 1 %碳酸氫鈉溶液洗脫，流速約為每小時(shí)1倍柱 體積，收集碳酸氫鈉洗脫液，用鹽酸溶液調(diào)PH值至2~2. 5 ;過AB-8型大孔吸附樹脂柱（藥 材重量：大孔樹脂重量約為I : 1，徑高比約為1 :5~7)，用2~3倍柱體積的純化水沖洗，流 速為每小時(shí)約2倍柱體積，棄去水洗液；再用約2. 5倍柱體積90%乙醇洗脫，流速為每小時(shí) 1~2倍柱體積。收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，調(diào)節(jié)至相對(duì)密度1. 02~1. 06 (30°C )， 2~KTC冷藏12~24小時(shí)，濾過，濾液用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至5. 0~6. 5,冷凍干 燥，得提取物；將提取物用適量水溶解，通過兩次半制備型RP-HPLC純化，即得純品。
[0147] 兩次半制備型RP-HPLC純化色譜條件同實(shí)施例1。
[0148] 實(shí)施例5含有丹酚酸Y的膠囊劑藥物組合物的制備
[0149] 處方 規(guī)格IOOmg
[0150] 丹酚酸Y 100g 乳糖 〗00g 微品纖維索 20g ?凇淀粉 100g 羧甲基淀粉鈉 聚乙烯妣咯烷圉 適量 mmmm_____________ig.…- .1000 較
[0151] 制備方法
[0152] 丹酚酸Y、乳糖、微晶纖維素、玉米淀粉、羧甲基淀粉鈉加入高效濕法制粒機(jī)中混 合，加入2%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液（80%)制粒。濕顆粒在流化床中干燥，經(jīng)18目篩整 粒。干顆粒中加入硬脂酸鎂適當(dāng)混合后裝入膠囊。
[0153] 實(shí)施例6顆粒劑藥物組合物的制備
[0154] 處方 'I OOmg 丹翰酸Y I OOg 乳糖 】〇〇g 微晶纖維素 20g 蔗糖 77〇t 羧甲基淀粉鈉 5g 聚乙烯吡略燦醒 適焉： 遞··...............................................................Sg.……… UKWg
[0155] 制備方法
[0156] 丹酚酸Y、乳糖、微晶纖維素、蔗糖、羧甲基淀粉鈉加入高效濕法制粒機(jī)中混合，加 入2%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液（80%)制粒。濕顆粒在流化床中干燥，經(jīng)18目篩整粒。干 顆粒中加入硬脂酸鎂適當(dāng)混合后包裝。
[0157] 實(shí)施例7片劑的制備
[0158] 處方 IOOvng 丹酸酸Y I OOg 乳糖 iOOg 微晶纖維素 20g 玉米淀粉 100g 羧甲基淀粉鈉 5g 聚乙烯吡略貌爾 避量 礙脂:酸儀_Ia i咖片
[0159] 制備方法
[0160] 丹酚酸Y、乳糖、微晶纖維素、玉米淀粉、羧甲基淀粉鈉加入高效濕法制粒機(jī)中混 合，加入2%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液（80%)制粒。濕顆粒在流化床中干燥，經(jīng)18目篩整 粒。干顆粒中加入硬脂酸鎂適當(dāng)混合后壓片。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種化合物，其化學(xué)名稱為2 (R)，3 (S) -4-[ (IE) -3-[1-羧基-2- (3, 4-二羥基苯基） 乙氧基]-3-氧-1-丙烯-1-基]-2-(3, 4-二羥基苯基）-2, 3-二氫-7-羥基-，3-[l-羧 基-2-(3, 4-二羥基苯基）乙氧基]酯。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其制備方法為：取丹參藥材，加水煎煮2-4次，合并 煎液，用鹽酸調(diào)PH值至1-3后，靜置，過濾去除沉淀，濾液通過聚酰胺柱，用6-8倍柱體積 水洗脫，棄去水液，再用6-8倍柱體積碳酸氫鈉溶液洗脫，收集洗脫液，再用鹽酸調(diào)pH值至 2-4,過大孔吸附樹脂柱，用2-4倍柱體積水沖洗，棄去水液，再用80% -95%乙醇洗脫，收集 洗脫液，濃縮至干，然后用適量水溶解，過制備型高效液相，得該化合物純品。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其制備方法為：取丹參藥材，加水煎煮提取3次，每 次加3~6倍量水、煎煮0. 5~2小時(shí)，合并煎液；冷卻至8~14°C，用鹽酸溶液調(diào)pH值至 I. 0~2. 0,靜置4~8小時(shí)，取上清液，濾過；濾液過聚酰胺柱，用7倍柱體積的純化水沖 洗，棄去流出液；再用7倍柱體積的0. 1 %碳酸氫鈉溶液洗脫，收集碳酸氫鈉洗脫液，用鹽酸 溶液調(diào)pH值至2. 5~3. 5 ;過AB-8型大孔吸附樹脂柱，用2~3倍柱體積的純化水沖洗， 棄去水洗液；再用約2. 5倍柱體積95%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，調(diào)節(jié)至 在30°C條件下相對(duì)密度1. 02~1. 06, 2~KTC冷藏12~24小時(shí)，濾過，濾液用10%氫氧 化鈉溶液調(diào)PH值至5. 0~6. 5,冷凍干燥，得提取物；將提取物用適量水溶解，通過兩次半 制備型RP-HPLC純化，即得純品。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物，其制備方法中，所述的兩次半制備型RP-HPLC純化， 色譜條件如下： 一次制備條件： 色譜柱：VenusilXBPC18(2)(5〇X25〇mm，10Umj(K)A') 流動(dòng)相A:0. 05%TFA，流動(dòng)相B:乙腈 梯度：波長：UV280nm; 流速：80mL/min; 進(jìn)樣量：Ig 收集28-30min餾分，45°C水浴減壓旋蒸濃縮至體積約5ml，進(jìn)行二次制備； 二次制備條件： 色譜柱：VenusilXBPC18 (2) (50X250mm，IOum:!m)A) 流動(dòng)相A:0. 05%TFA，流動(dòng)相B:乙腈 梯度：波長：UV280nm; 流速：80mL/min; 進(jìn)樣量：5ml 收集27. 5-30min餾分。5. 含有權(quán)利要求1化合物的藥物組合物。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，是任何一種可服用的藥物制劑形式。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，所述藥物制劑形式選自：片劑、糖衣片劑、薄膜 衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散 劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑、滴 丸劑、貼劑。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其中權(quán)利要求1化合物在制劑中所占重量百分 比是0. 01-99. 99%，其余為藥物可接受的載體。9. 權(quán)利要求1化合物在制備治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物中的應(yīng)用。10. 根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，所述應(yīng)用為神經(jīng)保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種丹參水溶性成分新化合物，其化學(xué)名稱為2(R),3(S)-4-[(1E)-3-[1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)乙氧基]-3-氧-1-丙烯-1-基]-2-(3,4-二羥基苯基)-2,3-二氫-7-羥基-，3-[1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)乙氧基]酯，體外抗過氧化氫誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷的活性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該化合物的保護(hù)率高達(dá)58.8％，具有很好的神經(jīng)保護(hù)作用，有望應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療，本發(fā)明還提供了該化合物的制備方法。
【IPC分類】A61K31/343, A61P25/00, C07D307/86
【公開號(hào)】CN105218495
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410226328
【發(fā)明人】宮俊, 李德坤, 鞠愛春, 葉正良, 周大錚
【申請(qǐng)人】天津天士力之驕藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年1月6日
【申請(qǐng)日】2014年5月27日