抗體效價(jià)仍能維持一個(gè)多 月。
【具體實(shí)施方式】：
[0034] 下面對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】詳細(xì)說明。
[0035] 具體實(shí)施例1
[0036] 恩諾沙星抗原合成方法，包括以下步驟：
[0037] (1)分別稱取5mg恩諾沙星、lOmgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中，室溫下在磁 力攪拌器上攪拌24h，獲得反應(yīng)液，將反應(yīng)液以2000r/min離心10min，去沉淀，制成恩諾沙 星活化中間產(chǎn)物；
[0038] (2)稱取10mg的牛血清白蛋白，溶于5ml的pH為7. 4的PBS中，在磁力攪拌器上 邊攪拌邊將步驟（1)得到的恩諾沙星活化中間產(chǎn)物逐滴加入到牛血清白蛋白-PBS溶液中， 室溫下在磁力攪拌器上攪拌12h得到反應(yīng)液；
[0039] (3)將步驟（2)得到的反應(yīng)液置于透析袋中，透析袋的透析液PBS，4°C透析48h，每 隔8h換透析液一次；
[0040] (4)透析結(jié)束后，將透析袋內(nèi)液體離心，去沉淀，即得到恩諾沙星抗原。
[0041] 恩諾沙星-IgY抗體制備方法，所述方法包括以下步驟：
[0042] (1)合成恩諾沙星抗原，
[0043] (11)分別稱取5mg恩諾沙星、lOmgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中，室溫下在磁 力攪拌器上攪拌24h，獲得反應(yīng)液，將反應(yīng)液以2000r/min離心10min，去沉淀，制成恩諾沙 星活化中間產(chǎn)物；
[0044] (12)稱取10mg的牛血清白蛋白，溶于5ml的pH為7. 4的PBS中，在磁力攪拌器 上邊攪拌邊將步驟（11)得到的恩諾沙星活化中間產(chǎn)物逐滴加入到牛血清白蛋白-PBS溶液 中，室溫下在磁力攪拌器上攪拌12h得到反應(yīng)液；
[0045] (13)將步驟（12)得到的反應(yīng)液置于透析袋中，透析袋的透析液PBS，4°C透析48h， 每隔8h換透析液一次；
[0046] (14)透析結(jié)束后，將透析袋內(nèi)液體離心，去沉淀，即得到恩諾沙星抗原；
[0047] (2)制備含抗體的免疫蛋，
[0048] (21)、向20周禽類初次注射步驟（14)合成得到的恩諾沙星抗原，抗原用量為 300 y g/只，此后的12周中，每隔三周再進(jìn)行一次抗原注射，抗原用量為250 y g/只；
[0049] (22)、收集注射恩諾沙星抗原的禽類所生產(chǎn)的蛋，并做標(biāo)記于4°C保存；
[0050] (3)將步驟（22)收集的蛋分離，得到卵黃和卵清，提取卵黃獲得恩諾沙星-IgY抗 體。
[0051] 進(jìn)一步地，步驟（3)包括以下步驟：
[0052] (31)收集注射恩諾沙星抗原的禽類所生產(chǎn)的蛋，進(jìn)行卵黃與卵清分離，收集卵黃， 將10ml卵黃使用20mlPBS稀釋得到稀釋液；
[0053] (32)向步驟（31)得到的稀釋液中加入1ml質(zhì)量體積比為3. 5%的PEG-6000 (3. 5g 的PEG-6000加入100ml稀釋液中形成的溶液，以下類同），攪拌2小時(shí)后，室溫下置于搖床 搖晃30分鐘后得到混合液；
[0054] (33)將步驟（32)得到的混合液離心，收集上清，過濾，向?yàn)V液中加入等體積的質(zhì) 量體積比為8. 5%的PEG-6000,攪拌2小時(shí)后，室溫下置于搖床搖晃30分鐘得到混合液；
[0055] (34)將步驟（33)得到的混合液離心，棄去上清液，沉淀使用10毫升的PBS懸浮后 得到重懸液，再向重懸液中加入等體積的質(zhì)量體積比為12 %的PEG-6000，攪拌2小時(shí)后，室 溫置于搖床上搖晃30分鐘，再進(jìn)行離心獲得沉淀物；
[0056] (35)將步驟（34)獲得的沉淀物使用1. 2毫升PBS溶解后，先使用透析帶進(jìn)行透 析，再使用PBS透析12h，收集透析液中的恩諾沙星-IgY抗體即可。
[0057] 進(jìn)一步地，所述禽類為雞。
[0058] 進(jìn)一步地，恩諾沙星-IgY抗體在-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0059] 本實(shí)施例中，恩諾沙星-IgY抗體的合稱過程反應(yīng)時(shí)如下：
[0060]
[0061] 具體實(shí)施例2
[0062] 恩諾沙星抗原合成方法，包括以下步驟：
[0063] (1)分別稱取5mg恩諾沙星、lOmgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中，室溫下在磁 力攪拌器上攪拌24h，獲得反應(yīng)液，將反應(yīng)液以2000r/min離心10min，去沉淀，制成恩諾沙 星活化中間產(chǎn)物；
[0064] (2)稱取10mg的牛血清白蛋白，溶于5ml的pH為7. 4的PBS中，在磁力攪拌器上 邊攪拌邊將步驟（1)得到的恩諾沙星活化中間產(chǎn)物逐滴加入到牛血清白蛋白-PBS溶液中， 室溫下在磁力攪拌器上攪拌16h得到反應(yīng)液；
[0065] (3)將步驟（2)得到的反應(yīng)液置于透析袋中，透析袋的透析液PBS，4°C透析48h，每 隔8h換透析液一次；
[0066] (4)透析結(jié)束后，將透析袋內(nèi)液體離心，去沉淀，即得到恩諾沙星抗原。
[0067] 恩諾沙星-IgY抗體制備方法，所述方法包括以下步驟：
[0068] (1)合成恩諾沙星抗原，
[0069] (11)分別稱取5mg恩諾沙星、lOmgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中，室溫下在磁 力攪拌器上攪拌24h，獲得反應(yīng)液，將反應(yīng)液以2000r/min離心10min，去沉淀，制成恩諾沙 星活化中間產(chǎn)物；
[0070] (12)稱取10mg的牛血清白蛋白，溶于5ml的pH為7. 4的PBS中，在磁力攪拌器 上邊攪拌邊將步驟（11)得到的恩諾沙星活化中間產(chǎn)物逐滴加入到牛血清白蛋白-PBS溶液 中，室溫下在磁力攪拌器上攪拌16h得到反應(yīng)液；
[0071] (13)將步驟（12)得到的反應(yīng)液置于透析袋中，透析袋的透析液PBS，4°C透析48h， 每隔8h換透析液一次；
[0072] (14)透析結(jié)束后，將透析袋內(nèi)液體離心，去沉淀，即得到恩諾沙星抗原；
[0073] (2)制備含抗體的免疫蛋，
[0074] (21)、向20周禽類初次注射步驟（14)合成得到的恩諾沙星抗原，抗原用量為 300 y g/只，此后的12周中，每隔三周再進(jìn)行一次抗原注射，抗原用量為250 y g/只；
[0075](22)、收集注射恩諾沙星抗原的禽類所生產(chǎn)的蛋，并做標(biāo)記于4°C保存；
[0076] (3)將步驟（22)收集的蛋分離，得到卵黃和卵清，提取卵黃獲得恩諾沙星-IgY抗 體。
[0077] 進(jìn)一步地，步驟（3)包括以下步驟：
[0078] (31)收集注射恩諾沙星抗原的禽類所生產(chǎn)的蛋，進(jìn)行卵黃與卵清分離，收集卵黃， 將10ml卵黃使用20mlPBS稀釋得到稀釋液；
[0079] (32)向步驟（31)得到的稀釋液中加入2ml質(zhì)量體積比為3. 5%的PEG-6000,攪拌 5小時(shí)后，室溫下置于搖床搖晃30分鐘后得到混合液；
[0080] (33)將步驟（32)得到的混合液離心，收集上清，過濾，向?yàn)V液中加入等體積的質(zhì) 量體積比為8. 5%的PEG-6000,攪拌5小時(shí)后，室溫下置于搖床搖晃30分鐘得到混合液；
[0081] (34)將步驟（33)得到的混合液離心，棄去上清液，沉淀使用10毫升的PBS懸浮后 得到重懸液，再向重懸液中加入等體積的質(zhì)量體積比為12 %的PEG-6000，攪拌5小時(shí)后，室 溫置于搖床上搖晃30分鐘，再進(jìn)行離心獲得沉淀物；
[0082] (35)將步驟（34)獲得的沉淀物使用1. 2毫升PBS溶解后，先使用透析帶進(jìn)行透 析，再使用PBS透析16h，收集透析液中的恩諾沙星-IgY抗體即可。
[0083] 進(jìn)一步地，所述禽類為雞。
[0084] 進(jìn)一步地，恩諾沙星-IgY抗體在-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0085] 具體實(shí)施例3
[0086] 恩諾沙星抗原合成方法，包括以下步驟：
[0087] (1)分別稱取5mg恩諾沙星、lOmgNHS、15mgEDC溶解于1ml的DMF中，室溫下在磁 力攪拌器上攪拌24h，獲得反應(yīng)液，將反應(yīng)液以2000r/min離心10min，去沉淀，