一種具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及功能性食品加工領(lǐng)域，具體地說，涉及一種具有抗腫瘤功能的鱷魚血 清蛋白及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前豬、牛血液在食品工業(yè)上已有一定的應(yīng)用，主要是將血液經(jīng)降解、脫色、干燥、 粉碎工藝之后，制成富含鐵食品。利用血液制備水解蛋白、血色素、超氧化物歧化酶、免疫球 蛋白等方面產(chǎn)品也有一定的研宄。鱷魚是白堊紀(jì)生存下來的一種古老的爬行動物。從目前 有關(guān)動物血液的功能特性和利用開發(fā)方面可知，對于畜禽血液的利用已日趨成熟。而對于 爬行動物鱷魚，人們對它的認(rèn)識主要限于中藥寶典李時珍的《本草綱目》中的介紹，相關(guān)文 獻有報道鱷魚血的部分功能特性，如抗菌活性和抗氧化性，但關(guān)于鱷魚血抗腫瘤功能方面 的具體研宄還很少，更未見針對鱷魚血清蛋白的生產(chǎn)、研宄與相關(guān)功能的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種具有抗腫瘤功能的鱷 魚血清蛋白及制備方法。
[0004] 為了實現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明首先提供一種具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白，所 述鱷魚血清蛋白的制備方法為：將鱷魚血清溶液經(jīng)超聲波處理，加入風(fēng)味蛋白酶進行酶解 得到酶解液，冷凍干燥后即得。
[0005] 進一步地，所述超聲波處理條件為：80~130KHZ處理10~20分鐘。
[0006] 進一步地，所述酶解條件為：40~50°C下酶解反應(yīng)5~20分鐘。
[0007] 更進一步地，所述鱷魚血清溶液的制備方法包括如下步驟：
[0008] (1)采集鱷魚血液，添加血液總量0. 8~1. 2%的檸檬酸鈉溶液，冷卻至15~ 20°C，離心取上清；冷凍干燥，得到鱷魚血清粉；
[0009] (2)將鱷魚血清粉與水按8~12% (w/w)的比例混合，20~35°C攪拌10~20分 鐘，使其充分溶解，得到鱷魚血清溶液。
[0010] 其中，所述風(fēng)味蛋白酶的添加量為鱷魚血清粉重量的〇. 2~0. 5%。
[0011] 其中，所述檸檬酸鈉溶液的濃度為25 % (w/w)。
[0012] 進一步地，所述離心條件為：在8000~1000 Og條件下離心5~10分鐘。
[0013] 更進一步地，酶解結(jié)束后，在20分鐘內(nèi)冷卻至室溫，得到鱷魚血清酶解液；在60分 鐘內(nèi)開始冷凍干燥，得到具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白。
[0014] 本發(fā)明還提供了一種具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白的制備方法，所述方法為將 鱷魚血清溶液經(jīng)超聲波處理，加入風(fēng)味蛋白酶進行酶解得到酶解液，冷凍干燥后即得。
[0015] 進一步地，所述方法包括如下步驟：
[0016] (1)采集鱷魚血液，添加血液總量0. 8~1. 2 %的檸檬酸鈉溶液作為抗凝劑，冷卻 至15~20°C，在8000~1000 Og條件下離心5~10分鐘取上清；冷凍干燥，得到鱷魚血清 粉；
[0017] (2)將鱷魚血清粉與水按8~12% (w/w)的比例混合，20~35°C攪拌10~20分 鐘，使其充分溶解，得到鱷魚血清溶液；經(jīng)超聲波80~130KHz處理10~20分鐘；改變蛋白 的組織結(jié)構(gòu)；
[0018] (3)按照鱷魚血清粉重量0. 2~0. 5%的重量百分比比例向經(jīng)過超聲波處理的鱷 魚血清溶液中加入風(fēng)味蛋白酶，在40~50°C條件下進行酶解反應(yīng)5~20分鐘；酶解結(jié)束 后在20分鐘內(nèi)冷卻至室溫，得到鱷魚血清酶解液；
[0019] (4)將步驟（3)所得的鱷魚血清酶解液，在60分鐘內(nèi)開始凍結(jié)和冷凍干燥，得到具 有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白。
[0020] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0021] 本發(fā)明利用超聲波技術(shù)處理鱷魚血清蛋白，可以明顯提高血清蛋白的抗腫瘤功 能，并有效地控制腫瘤細(xì)胞的生長。
[0022] 本發(fā)明開發(fā)的產(chǎn)品安全，采用食品級風(fēng)味蛋白酶，經(jīng)在溫和條件下，經(jīng)過適度酶 解，不加任何添加劑，開發(fā)的鱷魚血清蛋白粉具有較好的風(fēng)味。
[0023] 本發(fā)明開發(fā)的鱷魚血清蛋白，能廣泛作為醫(yī)藥、功能食品的原料。
[0024] 本發(fā)明提供的鱷魚血清蛋白制備方法簡單，較易實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0025] 以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0026] 實施例1 一種具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白的制備方法
[0027] (1)50克鱷魚血采集于容器中，在容器中添加0. 4克的檸檬酸鈉溶液（檸檬酸鈉溶 液濃度為25% )作為抗凝劑，冷卻至15°C，在1000 Og條件下離心5分鐘，收集鱷魚血上清 液；上清液通過冷凍干燥，得到鱷魚血清粉3. 5克。
[0028] (2)取鱷魚血清粉3. 5克，按12%鱷魚血清粉（w/w)的比例與水混合，30°C攪拌 10分鐘，使其充分溶解，制備鱷魚血清溶液。然后于超聲波發(fā)生器中，經(jīng)超聲波（頻率為 130kH)處理10分鐘，改變蛋白的組織結(jié)構(gòu)。
[0029] (3)按照鱷魚血清粉重量的0. 5 %的重量百分比比例向經(jīng)過超聲波處理的鱷魚血 清粉液體中加入風(fēng)味蛋白酶〇. 0175克，在45°C條件下進行酶解反應(yīng)5分鐘；酶解結(jié)束后在 20分鐘內(nèi)冷卻至室溫，得到鱷魚血清酶解液；
[0030] (4)將步驟（3)所得的鱷魚血清酶解液，在60分鐘內(nèi)開始凍結(jié)和冷凍干燥，通過冷 凍干燥，得到具有較好風(fēng)味和抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白粉3. 3克。
[0031] 實施例2 -種具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白的制備方法
[0032] (1) 100克鱷魚血采集于容器中，在容器中添加1. 2克的檸檬酸鈉溶液（檸檬酸鈉 溶液濃度為25% )作為抗凝劑，冷卻至20°C，在8000g條件下離心10分鐘，收集鱷魚血上 清液；上清液通過冷凍干燥，得到鱷魚血清粉7. 2克。
[0033] (2)取鱷魚血清粉，按8 %鱷魚血清粉（w/w)的比例與水混合，20°C攪拌10~20 分鐘，使其充分溶解，制備鱷魚血清溶液。然后于超聲波發(fā)生器中，經(jīng)超聲波（頻率為90kH) 處理20分鐘，改變蛋白的組織結(jié)構(gòu)。
[0034] (3)按照鱷魚血清粉重量0. 2%的重量百分比比例向經(jīng)過超聲波處理的鱷魚血清 粉液體中加入風(fēng)味蛋白酶0. 0144克，在50°C條件下進行酶解反應(yīng)20分鐘；酶解結(jié)束后在 20分鐘內(nèi)冷卻至室溫，得到鱷魚血清酶解液；
[0035] (4)將步驟（3)所得的鱷魚血清酶解液，60分鐘內(nèi)開始凍結(jié)和冷凍干燥，通過冷凍 干燥，得到具有較好風(fēng)味和抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白粉6. 8克。
[0036] 實施例3 -種具有抗腫瘤功能的鱷魚血清蛋白的制備方法
[0037] (1) 10克鱷魚血采集于容器中，在容器中添加 0. 1克的檸檬酸鈉溶液（檸檬酸鈉溶 液濃度為25% )作為抗凝劑，冷卻至15°C，在1000 Og條件下離心10分鐘，收集鱷魚血上清 液；上清液通過冷凍干燥，得到鱷魚血清粉〇. 7克。
[0038] (2)取鱷魚血清粉，按10