一種采用硅烷化試劑純化7-酮石膽酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化合物的純化，具體涉及一種采用硅烷化試劑純化7-酮石膽酸的方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 熊去氧膽酸（Ursodeoxycgolic Acid，UDCA)，是熊膽的主要成分，其化學(xué)名稱為 (3 α，7β)_ 二羥基-5 β 膽燒酸，是鶴去氧膽酸（Chenodeoxycholic Acid，（DCA)的 7-輕 基差向異構(gòu)體。自從20世紀(jì)80年代，發(fā)明熊去氧膽酸具有有效溶解膽固醇性結(jié)石作用以 來(lái)，不斷有新的研宄顯示熊去氧膽酸在利膽、護(hù)肝中具有積極的作用。近年來(lái)，國(guó)外報(bào)道了 UDCA不僅對(duì)治療原發(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、慢性活動(dòng)性肝炎具有良好療 效，還可用與治療慢性肝炎和肝移植后排斥反應(yīng)。目前，在臨床上熊去氧膽酸主要應(yīng)用于治 療各種肝膽、消化道疾病。隨著分子生物學(xué)、以及熊去氧膽酸基礎(chǔ)和臨床研宄的不斷進(jìn)步， 人們發(fā)現(xiàn)熊去氧膽酸在促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)、治療冠心病等方面也有積極作用。因此，隨著研宄的 深入，熊去氧膽酸的利用價(jià)值越來(lái)越被認(rèn)識(shí)和受到人們的重視，對(duì)熊去氧膽酸的需求量也 在逐年升尚。
[0003] 目前國(guó)內(nèi)外合成熊去氧膽酸的起始原料有鵝去氧膽酸和牛羊膽酸兩種，而無(wú)論采 用何種原料合成熊去氧膽酸都需要先制取7-酮石膽酸（7K-LCA)，再經(jīng)過(guò)還原得到熊去氧 膽酸。
[0004] 出口歐盟成員國(guó)的UDCA多數(shù)要求起始物料為⑶CA。隨著歐洲藥典的升版，對(duì)UDCA 的標(biāo)準(zhǔn)中雜質(zhì)的要求也越來(lái)越高。雜質(zhì)的來(lái)源取決于中間體7K-LCA相關(guān)雜質(zhì)的去除以及 終產(chǎn)品UDCA的純化，而其中H雜質(zhì)（歐洲藥典熊去氧膽酸的雜質(zhì)之一）則跟中間體7K-LCA 混合物中雙氧化物的生成量密切相關(guān)。目前根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)，CDCA經(jīng)7位羥基選擇性氧化后 轉(zhuǎn)變成中間體7K-LCA，但同時(shí)也有部分3位羥基被氧化的情況，結(jié)果是7K-LCA的產(chǎn)品中大 約有4~7%的⑶CA羥基雙氧化物出現(xiàn)，而此雙氧化物在之后的還原過(guò)程中大部分轉(zhuǎn)變?yōu)?H雜質(zhì)，在HPLC圖譜中此雜質(zhì)與產(chǎn)品UDCA的位置極為接近，用現(xiàn)有的溶劑溶解和重結(jié)晶過(guò) 程很難除去，因此盡量減少中間體7K-LCA中雙氧化物雜質(zhì)的含量是保證UDCA中減少H雜 質(zhì)含量的一條有效途徑。
[0005] 相關(guān)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
[0006]
[0007] CDCA (3, 7-dihydroxy-5-cholan-24-〇ic
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種采用硅烷化試劑純化7-酮石膽酸的方法，所述方法包括以下步驟： (1) 將7-酮石膽酸混合物充分溶解于有機(jī)溶劑中，在攪拌狀態(tài)下加入硅烷化試劑，緩 慢加熱至20~80°C，進(jìn)行硅烷化反應(yīng)； (2) 硅烷化反應(yīng)完全后，將溶液冷卻至0~4°C，待沉淀完全析出，過(guò)濾，收集沉淀； (3) 在步驟（2)所得沉淀中，加入10~15倍于沉淀體積、濃度為2~5%的無(wú)機(jī)酸，充 分?jǐn)嚢栊纬蓱覞嵋海? (4) 將懸濁液在30~50°C下靜置10~15min，冷卻至0~4°C，待沉淀完全析出，過(guò)濾， 收集沉淀； (5) 取步驟（4)所得沉淀，用水洗至中性，用混合溶劑進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，即得純化的 7-酮石膽酸。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1)所述有機(jī)溶劑為酯類，優(yōu)選為乙 酸乙酯。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步驟（1)中，7-酮石膽酸混合物 與有機(jī)溶劑的質(zhì)量體積比1~l〇g/ml。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述硅烷化試劑的烷基碳原子不超過(guò)5 個(gè)，選自2-，3_甲硅烷基鹵化物、2-三羥基-甲硅烷基脲、六甲基二硅氮烷中的一種或多種 混合物；優(yōu)選為三甲基氯硅烷或六甲基二硅氮烷。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于，每克7-酮石膽酸混合物所需硅烷化 試劑的量為〇. 5~5ml。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1)還包括以下步驟：在加入硅烷化 試劑之前，先加入三乙胺；所述三乙胺與7-酮石膽酸混合物的重量比為1:5~9。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1~6任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（5)中用于重結(jié)晶的混 合溶劑由乙酸乙酯、丙酮、乙腈和二甲基亞砜按體積比1~20 :1~8. 5 :1~12 :0. 05~3 混合而成。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 將7-酮石膽酸混合物以質(zhì)量體積比lg/ml充分溶解乙酸乙酯中，在攪拌狀態(tài)下先 加入三乙胺，所述三乙胺與7-酮石膽酸混合物的重量比為1 :6~7 ;再加入六甲基二硅氮 烷，每克7-酮石膽酸混合物所需六甲基二硅氮烷的量為1~2ml ;緩慢加熱至20~30°C， 進(jìn)行硅烷化反應(yīng)； (2) 反應(yīng)完全后，將溶液冷卻至0~4°C，待沉淀完全析出，過(guò)濾，收集沉淀； (3) 在步驟⑵所得沉淀中，加入10~15倍于沉淀體積、濃度為5%的HCl或H2SO4, 充分?jǐn)嚢栊纬蓱覞嵋海? (4) 將懸濁液在40~50°C下靜置10~15min，冷卻至0~4°C，待沉淀完全析出，過(guò)濾， 收集沉淀； (5) 取步驟⑷所得沉淀，用水洗至中性，用由乙酸乙酯、丙酮、乙腈和二甲基亞砜按體 積比9~11 :1. 5~2. 5 :2. 5~3. 5 :3混合而成的混合溶劑進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，即得純化的 7-酮石膽酸。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1~8任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述7-酮石膽酸混合物為： 以鵝去氧膽酸為原料、合成熊去氧膽酸過(guò)程中的中間體；所述7-酮石膽酸混合物中，7-酮 石膽酸含量為80~90 %，雙氧化物含量為4~7 %。
10.權(quán)利要求1~9任意一項(xiàng)所述方法所得純化的7-酮石膽酸。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種采用硅烷化試劑純化7-酮石膽酸的方法，所述方法包括以下步驟：將7-酮石膽酸混合物充分溶解于有機(jī)溶劑中，在攪拌狀態(tài)下加入硅烷化試劑，緩慢加熱至20～80℃，進(jìn)行硅烷化反應(yīng)；反應(yīng)完全后，將溶液冷卻至0～4℃，待沉淀完全析出，過(guò)濾，收集沉淀；在沉淀中加入10～15倍于沉淀體積、濃度為2～5％的無(wú)機(jī)酸，充分?jǐn)嚢栊纬蓱覞嵋?；將懸濁液?0～50℃下靜置10～15min，冷卻至0～4℃，待沉淀完全析出，過(guò)濾，收集沉淀；將沉淀用水洗至中性，用混合溶劑進(jìn)行重結(jié)晶，干燥，即得純化的7-酮石膽酸。本發(fā)明通過(guò)對(duì)試劑的優(yōu)選和參數(shù)的優(yōu)化，實(shí)現(xiàn)了7-酮石膽酸混合物中雙氧化物雜質(zhì)的有效去除。本發(fā)明提供的方法步驟簡(jiǎn)單、原料易得、效果顯著，適宜大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。
【IPC分類】C07J9-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104804055
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510119223
【發(fā)明人】陳炅然, 陸其華
【申請(qǐng)人】蘇州天綠生物制藥有限公司
【公開(kāi)日】2015年7月29日
【申請(qǐng)日】2015年3月18日