一種腦靶向肽與抗腫瘤藥偶聯(lián)物的制備及應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及腫瘤相關的藥物領域，具體而言，本發(fā)明設及一種多膚與抗腫瘤藥偶 聯(lián)形成一種新藥物，該多膚本身不具有生理活性，但是具有透過血腦屏障的作用，本發(fā)明還 設及該多膚的制備方法及其應用。
【背景技術】
[0002] 腦瘤及腦轉(zhuǎn)移瘤的發(fā)病率逐年上升。在對其治療方面，血腦屏障被認為是阻止化 療藥物進入腦組織進而影響療效的主要原因。血腦屏障是機體參與固有免疫的內(nèi)部屏障之 一，由介于血循環(huán)與腦實質(zhì)間的軟腦膜、脈絡叢的腦毛細血管壁和包于壁外的膠質(zhì)膜所組 成，能阻擋病原生物和其他大分子物質(zhì)由血循環(huán)進入腦組織和腦室?；旧?00%的大分子 藥物，包括多膚、重組蛋白、單克隆抗體、基于RNA干擾技術的藥物、基因治療相關藥物等都 無法穿越血腦屏障，且大于98%的小分子藥物也無法穿過血腦屏障。目前，放射性治療與 化學療法只能延長患者生命4個月，因此本發(fā)明致力于研究使現(xiàn)有藥物更好的透過血腦屏 障。
[0003]多膚由于其具有極性末端和非極性末端，因此在體內(nèi)有較高的利用度，由于本身 是內(nèi)源性物質(zhì)所W毒性小，但是多膚直接作為藥物受到較大的限制，例如其穩(wěn)定性差，不能 口服。近年來，多膚作為藥物輔助功能的應用逐漸成為了新藥研制的熱點之一。細胞穿膜 膚是20世紀中期開始認識到的一類具特殊功能的多膚分子，英文學術名稱一般寫為cell 2-penetrating-peptides(CPPs)。它們通常由5~30個氨基酸組成，典型的一般由8~16 個氨基酸構(gòu)成，具有生物膜穿透功能，還可攜帶其它分子甚至超分子顆粒進入細胞中。正是 因為該種特殊的功能，它們被看作生物活性分子有效的細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運工具，具有廣泛的應用 前景。
[0004] 近些年來多膚和藥物通過共價方式形成組合物的例子很多，例如：多膚 化netratin和阿霉素共價禪合用于治療乳腺癌；多膚TAT和藥物P53共價禪合用于治療眼 癌轉(zhuǎn)移；多膚YTA4與甲氨蝶嶺共價禪合治療乳腺癌。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]W下是本發(fā)明的詳細描述：
[0006] (1)本發(fā)明所述的腦祀向膚
[0007] 本發(fā)明所述的腦祀向膚，由7個氨基酸組成，氨基酸序列為SEQIDNO;1。
[000引 （2)本發(fā)明所述的腦祀向膚的制備方法
[0009] 本發(fā)明所需多膚是采用固相的方法制備的，固相合成是W固相載體樹脂為載體， 從C端即駿基端向N端即氨基端逐漸添加氨基酸的過程。
[0010] 本發(fā)明中優(yōu)選樹脂；Fmoc-wang樹脂、2-d-trt樹脂，樹脂取代度0. 24~0. 4。
[0011] 本發(fā)明所使用的保護氨基酸為；Fmoc-Phe-OH，F(xiàn)moc-leu(tBu)-〇H， Fmoc-Arg(pbf) -〇H，F(xiàn)moc-Pr〇-〇H，F(xiàn)moc-Asn(t;rt) -〇H，反應過程中保護氨基酸 3 ~5 倍過 量。
[0012] 本發(fā)明所使用的脫保護試劑為：嗽晚/N，N-二甲基甲酯胺，比例為10:90~ 30:70。
[0013] 本發(fā)明所使用的偶聯(lián)試劑為；①苯并S氮挫-N，N，N'，N' -四甲基脈六氣磯酸鹽 /I-哲基苯并S挫（H0BT)，②2-(7-偶氮苯并S氮挫）-N，N，N'，N' -四甲基脈六氣磯酸醋 /I-哲基苯并S挫（H0BT)，⑨N，N' -二異丙基碳二亞胺/I-哲基苯并S挫（H0BT)。
[0014] 本發(fā)明中，若使用第①或者第②種偶聯(lián)試劑，那么反應中過程中應添加縛酸劑： WEA/NMP。
[00巧]本發(fā)明中所使用的切割試劑為；TFA/茵香硫離/水/苯酪/I，2-己二硫醇，比例 為；82. 5:5:5:5:2. 5。
[0016] 本發(fā)明中所使用MS-口-T0F確定分子量，使用HPLC純化粗膚。
[0017] (3)本發(fā)明所述腦祀向膚與抗腫瘤藥物阿霉素的偶聯(lián)方法
[0018]
【主權項】
1. 一種腦靶向肽，其特征在于，所述靶向肽是由7個氨基酸組成，其氨基酸序列是序列 表中SEQIDNO:1。
2. -種偶聯(lián)物，為權利要求1所述的腦靶向肽與抗腫瘤藥物通過化學鍵偶聯(lián)形成。
3. -種如權利要求2所述的偶聯(lián)物的制備方法，具體步驟如下： A. 使用Fmoc策略的固相多肽合成方法合成靶向肽； B. 將抗腫瘤藥物與酸酐反應，在藥物分子上構(gòu)建羧基； C. 將多肽片段的末端氨基與抗腫瘤藥物分子上的羧基反應，構(gòu)建酰胺鍵； D. 偶聯(lián)物的分離純化。
4. 根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟B中所述抗腫瘤藥物選自阿霉素 和紫杉醇。
5. 根據(jù)權利要求2所述的偶聯(lián)物，其特征在于偶聯(lián)物在制備治療腦瘤藥物中的應用。
【專利摘要】一種腦靶向肽與抗腫瘤藥偶聯(lián)物的制備及應用。本發(fā)明所述的腦靶向肽，由7個氨基酸組成，序列為FLFRPRN。本發(fā)明通過固相合成的方法得到所需多肽，并與抗腫瘤藥物通過化學合成的方法得到偶聯(lián)物。本發(fā)明還提供了偶聯(lián)物在制備治療腦瘤藥物中的應用。
【IPC分類】A61K47-48, A61P35-00, C07K1-06, C07K7-06, C07K1-04
【公開號】CN104774245
【申請?zhí)枴緾N201410417617
【發(fā)明人】孔維苓, 鄭學敏, 龔珉, 黃長江, 袁靜, 徐為人
【申請人】天津藥物研究院
【公開日】2015年7月15日
【申請日】2014年8月22日