本申請(qǐng)屬于醫(yī)學(xué)臨床檢驗(yàn)中病源微生物熒光檢測(cè)，尤其涉及一種用于陰道微生物熒光檢測(cè)的試劑盒及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、陰道微生物增殖感染引發(fā)的感染類(lèi)型在臨床上主要分為細(xì)菌性陰道病、外陰陰道假絲酵母菌病、滴蟲(chóng)性陰道炎、需氧菌性陰道炎以及細(xì)胞溶解性陰道病等。患有陰道炎的女性在懷孕時(shí)會(huì)影響精子的質(zhì)量，甚至導(dǎo)致女性不孕；即使懷孕孕期也很容易引起宮內(nèi)感染、產(chǎn)道感染等環(huán)節(jié)感染胎兒、新生兒，造成流產(chǎn)、早產(chǎn)、先天發(fā)育畸形、智力低下等嚴(yán)重后果。還會(huì)誘發(fā)其他疾病，如生殖器感染、盆腔炎、肩周炎、性交痛等?？梢?jiàn)，女性的陰道炎的危害相當(dāng)大。

2、通過(guò)陰道分泌物對(duì)炎癥疾病作出快速準(zhǔn)確的診斷，是臨床治療的重要前提。陰道分泌物常規(guī)檢查是目前臨床最常用的一種檢驗(yàn)項(xiàng)目，在門(mén)診檢測(cè)中，通常采用浸于0.9%氯化鈉溶液涂濕片直接鏡檢，較為快速便捷。但是，該濕片鏡檢法是檢驗(yàn)師借助顯微鏡觀察，存在一定的主觀因素，且觀察后標(biāo)本直接扔掉，不利于日后溯源。也有醫(yī)院采用全自動(dòng)機(jī)器分析分泌物常規(guī)項(xiàng)目，但機(jī)器多根據(jù)細(xì)胞或細(xì)菌的大小來(lái)分析霉菌和滴蟲(chóng)，使得其漏檢率和誤診率較高。干化學(xué)酶法在陰道病原體的檢查中也有一定應(yīng)用，但其時(shí)效性不及傳統(tǒng)濕片，且干擾因素也較多。而目前較公認(rèn)的革蘭染色法相對(duì)準(zhǔn)確，但比較耗時(shí)，且與每個(gè)檢驗(yàn)工作者的操作手法有一定關(guān)系，不適宜在門(mén)診檢測(cè)推廣。因此，快速且準(zhǔn)確的陰道分泌物檢測(cè)方法也得到越來(lái)越多的關(guān)注，尤其是門(mén)診檢驗(yàn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N用于陰道微生物熒光檢測(cè)的試劑盒及其制備方法，所述試劑盒不僅可實(shí)現(xiàn)對(duì)微生物和細(xì)胞等的標(biāo)記與識(shí)別，且操作簡(jiǎn)便，靈敏度和準(zhǔn)確度高。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本申請(qǐng)?zhí)峁┮韵录夹g(shù)方案：

3、一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N用于陰道微生物熒光檢測(cè)的試劑盒，所述試劑盒包括a液和b液；

4、所述a液包括如下濃度的組分：

5、熒光染色劑0.005~1%，抑菌劑0.01~30%，抗熒光衰退劑0.02~20%，復(fù)染劑0.002~10%，純化水余量；

6、所述b液包括如下濃度的組分：

7、熒光素0.001~0.8%，緩沖溶液0.05~20%，防腐劑0.05~20%，穩(wěn)定劑0.001~3%，純化水余量。

8、可選地，所述熒光染色劑的濃度獨(dú)立地選自0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%、1%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

9、所述抑菌劑的濃度獨(dú)立地選自0.01%、0.02%、0.05%、0.1%、1%、5%、10%、20%、30%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

10、所述抗熒光衰退劑的濃度獨(dú)立地選自0.02%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

11、所述復(fù)染劑的濃度獨(dú)立地選自0.002%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

12、所述熒光素的濃度獨(dú)立地選自0.001%、0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

13、所述緩沖溶液的濃度獨(dú)立地選自0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

14、所述防腐劑的濃度獨(dú)立地選自0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

15、所述穩(wěn)定劑的濃度獨(dú)立地選自0.001%、0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、2%、3%中的任意值或任意兩者之間的范圍值。

16、可選地，所述熒光染色劑包括熒光增白劑28、異硫氰酸熒光素、多甲藻黃素-葉綠素-蛋白質(zhì)復(fù)合物中的至少一種。

17、可選地，所述抑菌劑包括二甲基亞砜、proclin?300、氫氧化鉀中的至少一種。

18、可選地，所述抗熒光衰退劑包括丙三醇、吐溫、沒(méi)食子酸鹽中的至少一種。

19、可選地，所述復(fù)染劑包括甲基綠、伊文思藍(lán)中的至少一種。

20、在本申請(qǐng)中，a液中的熒光染色劑與復(fù)染劑相互作用，能夠準(zhǔn)確并清晰的對(duì)真菌進(jìn)行標(biāo)記。

21、可選地，所述熒光素包括吖啶橙、羅丹明中的至少一種。

22、可選地，所述緩沖溶液包括磷酸鹽緩沖液、乙酸?乙酸鈉緩沖溶液中的至少一種。

23、可選地，所述緩沖溶液的ph為4。

24、可選地，所述磷酸鹽緩沖液由如下濃度的組分組成：磷酸氫二鈉0.05~20%，檸檬酸0.05~15%。

25、可選地，所述防腐劑包括proclin?300、np-40中的至少一種。

26、可選地，所述防腐劑的濃度為0.05~10%。

27、可選地，所述穩(wěn)定劑包括edta、二硫蘇糖醇中的至少一種。

28、可選地，所述穩(wěn)定劑的濃度為0.001~1%。

29、在本申請(qǐng)中，b液中的組分相互配合，能夠準(zhǔn)確并清晰的對(duì)細(xì)胞、細(xì)菌、滴蟲(chóng)等進(jìn)行標(biāo)記。

30、第二方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝松鲜鲈噭┖械闹苽浞椒?，包括如下步驟：

31、將a液和b液組合，得到所述用于陰道微生物熒光檢測(cè)的試劑盒。

32、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請(qǐng)包括以下有益效果：

33、本申請(qǐng)?zhí)峁┑脑噭┖邪╝液和b液，其中，a液中的熒光染色劑（如熒光增白劑28）與復(fù)染劑（與伊文思藍(lán)）等相互作用，能夠準(zhǔn)確并清晰的對(duì)真菌進(jìn)行標(biāo)記；b液中的組分相互配合，可對(duì)細(xì)胞、細(xì)菌、滴蟲(chóng)等進(jìn)行標(biāo)記，將a液和b液組合，可對(duì)陰道分泌物中的病原體進(jìn)行標(biāo)記，能夠更加全面且準(zhǔn)確的對(duì)陰道炎癥的類(lèi)型進(jìn)行判斷，從而使整個(gè)試劑盒更加準(zhǔn)確和靈敏。

技術(shù)特征：

1.一種用于陰道微生物熒光檢測(cè)的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括a液和b液；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光染色劑包括熒光增白劑28、異硫氰酸熒光素、多甲藻黃素-葉綠素-蛋白質(zhì)復(fù)合物中的至少一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述抑菌劑包括二甲基亞砜、proclin?300、氫氧化鉀中的至少一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述抗熒光衰退劑包括丙三醇、吐溫、沒(méi)食子酸鹽中的至少一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述復(fù)染劑包括甲基綠、伊文思藍(lán)中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光素包括吖啶橙、羅丹明中的至少一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述緩沖溶液包括磷酸鹽緩沖液、乙酸乙酸鈉緩沖溶液中的至少一種；

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述防腐劑包括proclin?300、np-40中的至少一種；

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述穩(wěn)定劑包括edta、二硫蘇糖醇中的至少一種；

10.權(quán)利要求1~9任意一項(xiàng)所述的試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

技術(shù)總結(jié)
本申請(qǐng)公開(kāi)了一種用于陰道微生物熒光檢測(cè)的試劑盒及其制備方法，屬于醫(yī)學(xué)臨床檢驗(yàn)中病源微生物熒光檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。本申請(qǐng)?zhí)峁┑脑噭┖?，包括A液和B液；所述A液包括熒光染色劑、抑菌劑、抗熒光衰退劑、復(fù)染劑、純化水；所述B液包括熒光素、緩沖溶液、防腐劑、穩(wěn)定劑、純化水。本申請(qǐng)將A液和B液組合成試劑盒，可對(duì)陰道分泌物中的病原體進(jìn)行標(biāo)記，能夠更加全面且準(zhǔn)確的對(duì)炎癥的類(lèi)型進(jìn)行判斷，從而使整個(gè)試劑盒更加準(zhǔn)確和靈敏。

技術(shù)研發(fā)人員：張志全,秦旭穎,孫艷妮,桂春爽,陳彥亨,朱紫龍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京億美諾生物科技股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19