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一種前列腺癌干細(xì)胞培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和應(yīng)用

文檔序號(hào):40398836發(fā)布日期:2024-12-20 12:22閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種前列腺癌干細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加物組成,所述添加物由以下濃度的組分組成:1~3%(v/v)的胎牛血清、1xn2、1xb-27、10~50ng/ml的egf、10~50ng/ml?bfgf、1~10nm雄激素dht、20~100μm抗壞血酸、0.02~3μm?gsk3抑制劑、0.1~20μm?tgf-β抑制劑和0.1~20μm?rock抑制劑;

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前列腺癌干細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,所述gsk3抑制劑包括chir99021、azd1080或ly2090314,優(yōu)選為chir99021;

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的前列腺癌干細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,所述添加物還包括在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中濃度為100u/ml的青霉素和100μg/ml的鏈霉素。

4.一種前列腺癌干細(xì)胞的培養(yǎng)方法,其特征在于,包括使用權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)基從前列腺癌組織塊分離得到的原代前列腺癌干細(xì)胞中培養(yǎng)得到前列腺癌干細(xì)胞。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的培養(yǎng)方法,其特征在于,所述前列腺癌組織塊分離得到的原代前列腺癌干細(xì)胞的制備方法包括將前列腺癌組織塊在消化液i中消化,分離得到原代前列腺癌干細(xì)胞;

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的培養(yǎng)方法,其特征在于,所述將前列腺癌組織塊在消化液i中消化,分離得到原代前列腺癌干細(xì)胞的方法為循環(huán)消化方法;

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的培養(yǎng)方法,其特征在于,所述消化液i包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、膠原酶、抗壞血酸和rock抑制劑;

8.根據(jù)權(quán)利要求4~7任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法,其特征在于,所述培養(yǎng)的條件包括在37℃環(huán)境溫度下,95%濕度下培養(yǎng)至少1周。

9.權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)基或權(quán)利要求4~8任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法在構(gòu)建腫瘤原代細(xì)胞異種移植模型中的應(yīng)用。

10.一種構(gòu)建腫瘤原代細(xì)胞異種移植模型的方法,其特征在于,包括將權(quán)利要求4~8任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法培養(yǎng)得到的前列腺癌干細(xì)胞與基質(zhì)膠混合后移植至免疫缺陷小鼠體內(nèi),獲得腫瘤原代細(xì)胞異種移植模型;


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種前列腺癌干細(xì)胞培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和應(yīng)用,涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加物組成,所述添加物包括在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中為以下濃度的組分:1~3%(v/v)的胎牛血清、1xN2、1xB?27、10~50ng/ml的EGF、10~50ng/ml?bFGF、1~10nM雄激素DHT、20~100μM抗壞血酸、0.02~3μM?GSK3抑制劑、0.1~20μM?TGF?β抑制劑和0.1~20μMROCK抑制劑。能夠較好地使從前列腺癌組織塊中分離得到的原代前列腺癌干細(xì)胞在體外增殖并保留前列腺癌干細(xì)胞的生物學(xué)特征。可將這些擴(kuò)增的前列腺癌干細(xì)胞移植入免疫缺陷小鼠體內(nèi)構(gòu)建腫瘤異種移植模型。相比于直接移植腫瘤組織塊的方法,這種移植擴(kuò)增后的前列腺癌干細(xì)胞的方法可以提高異種移植成功率。

技術(shù)研發(fā)人員:王棟,祝海,李菁,牟潔,李睿智
受保護(hù)的技術(shù)使用者:青島大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2024/12/19
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