本發(fā)明涉及一種曲霉屬真菌feyqsj2及其發(fā)酵液粗提物的應(yīng)用，屬于微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

1、滇重樓parispolyphylla?var.yunnanensis.為延齡草科trilliaceae重樓屬paris?l多年生草本植物，是云南道地藥材，在云南藥用歷史悠久，據(jù)《滇南本草》記載“此乃外科之至藥也，主治一切無名腫毒，攻各種瘡毒癰疽”。滇重樓被歷版《中國藥典》所收載，以干燥根莖入藥，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚之功效。滇重樓不僅是中藥方劑及民間家庭的常用藥物，還是云南白藥系列、宮血寧膠囊、季德勝蛇藥片、樓蓮膠囊、熱毒清等40余種著名國藥準(zhǔn)字號(hào)中成藥的原料?，F(xiàn)代研究還發(fā)現(xiàn)，滇重樓具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗菌消炎、止血、調(diào)節(jié)血管和抗氧化等作用，是金復(fù)康口服液(非小細(xì)胞肺癌)、樓蓮膠囊(肝癌)、肝復(fù)樂片(肝癌)等的主要原料。

2、云南是滇重樓的原產(chǎn)區(qū)和主產(chǎn)區(qū)，種植面積和產(chǎn)量均占全國90％以上，人工種植已經(jīng)成為滇重樓的主要來源。但是，隨著滇重樓種植產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，由于盲目引種、種植模式、氣候及土壤等生態(tài)環(huán)境因素等改變，不僅影響滇重樓品質(zhì)，還致使滇重樓病害問題日益凸顯，其中根腐病和莖腐病(產(chǎn)地稱：滇重樓癌癥)對(duì)滇重樓種植危害最大。尖孢鐮刀菌(fusarium?oxysporum)是引起滇重樓根腐病和莖腐病的主要病原菌之一，主要侵染滇重樓的藥用部位根莖，造成根莖表皮發(fā)黑、變軟、腐爛，發(fā)病初期，無明顯病癥，隨著根莖腐爛程度加重，地上部分葉片開始出現(xiàn)發(fā)黃、枯萎、干枯，直到植株枯萎死亡。

3、近年來微生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，許多植物的內(nèi)生菌可以產(chǎn)生與寄主藥用植物相同的藥用成分。通過內(nèi)生菌一定規(guī)模發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)活性物質(zhì)被認(rèn)為是尋找新型抗菌先導(dǎo)化合物的一種方法，而滇重樓具有豐富的內(nèi)生菌資源。因此，本發(fā)明對(duì)采集自云南大理滇重樓內(nèi)生菌進(jìn)行研究，通過微生物純培養(yǎng)手段和基于測序技術(shù)對(duì)滇重樓內(nèi)生菌進(jìn)行物種多樣性探究，并利用hplc、uplc-ms對(duì)菌株次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行化學(xué)多樣性篩選，結(jié)合“微量肉湯稀釋法”等進(jìn)行抗菌活性篩選，獲得了一種可生產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)的曲霉屬真菌。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一是提供了一株曲霉屬真菌feyqsj2，所述曲霉屬真菌feyqsj2為煙曲霉，已于2024年5月27日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)：cgmcc?no.41243，分類學(xué)命名：aspergillus?fumigatus，保藏單位地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。

2、本發(fā)明的另一目的是提供了一種曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物。

3、優(yōu)選的，所述發(fā)酵液粗提物的制備方法如下所述：

4、(1)培養(yǎng)得到曲霉屬真菌feyqsj2發(fā)酵液。

5、(2)將發(fā)酵液和菌體分離，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液后減壓濃縮、干燥，即得所述粗提物。

6、優(yōu)選的，步驟(1)中發(fā)酵液的制備方法為：將曲霉屬真菌feyqsj2接種至pdb培養(yǎng)基中，28℃搖床培養(yǎng)3d得種子液；將種子液轉(zhuǎn)接到大米培養(yǎng)基中，置于28℃靜置培養(yǎng)28-30d得發(fā)酵物。

7、優(yōu)選的，步驟(1)中所述搖床培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為150-180r/min。

8、優(yōu)選的，步驟(1)中種子液的轉(zhuǎn)接量優(yōu)選10％-12％。

9、優(yōu)選的，步驟(2)中乙酸乙酯的用量為發(fā)酵液體積的1-2倍。

10、本發(fā)明還提供了一種曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物在制備防治滇重樓根腐病或莖腐病藥劑中的應(yīng)用。

11、優(yōu)選的，所述滇重樓根莖腐病由尖孢鐮刀菌fusarium?oxysporum引起。

12、本發(fā)明的有益效果

13、(1)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了一株可以防治滇重樓根腐病和莖腐病的曲霉屬真菌feyqsj2，拓寬了滇重樓根腐病和莖腐病的生物學(xué)防治方法。

14、(2)本發(fā)明利用微生物對(duì)滇重樓根腐病和莖腐病進(jìn)行防治，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成影響和破壞。

技術(shù)特征：

1.一種曲霉屬真菌feyqsj2，其特征在于：所述曲霉屬真菌feyqsj2為煙曲霉，保藏編號(hào)：cgmcc?no.41243，分類學(xué)命名：aspergillusfumigatus。

2.利用權(quán)利要求1所述曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物。

3.權(quán)利要求2所述曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物在制備防治滇重樓根腐病或莖腐病藥劑中的應(yīng)用。

4.權(quán)利要求2所述曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物的制備方法，其特征在于：所述制備方法具體包括如下步驟：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種曲霉屬真菌FEYQSJ2及其發(fā)酵液粗提物的應(yīng)用，屬于微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物領(lǐng)域。本發(fā)明所述曲霉屬真菌FEYQSJ2已于2024年5月27日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)：CGMCC?No.41243，分類學(xué)命名：Aspergillusfumigatus，保藏單位地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，所述曲霉屬真菌FEYQSJ2發(fā)酵液粗提物可用于制備防治滇重樓根莖腐病藥劑，為滇重樓根腐病和莖腐病的防治提供了新思路。

技術(shù)研發(fā)人員：李海峰,王開玲,彭安忠,王靜,舒清,阮麗萍,尹姣,顧斯嫚,吳鈺穎,張瑩瑩,郭染,王玉娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者：大理大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19