本實(shí)用新型屬于一種細(xì)胞培養(yǎng)裝置,具體的是一種神經(jīng)干細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)換液培養(yǎng)裝置。
背景技術(shù):
神經(jīng)干細(xì)胞:神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell)是一種終身具有自我更新能力的細(xì)胞,其子細(xì)胞能分化產(chǎn)生神經(jīng)系統(tǒng)的各類(lèi)細(xì)胞,具有有限的自我更新能力,并自發(fā)分化產(chǎn)生成神經(jīng)元細(xì)胞和成膠質(zhì)細(xì)胞等,從而生成神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。移植后能在宿主的神經(jīng)組織中良好地生存、整和及分化,對(duì)于顱腦損傷的修復(fù)及其它疾病的治療有著廣泛的應(yīng)用前景。
目前神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)方式主要是在培養(yǎng)集中懸浮培養(yǎng),神經(jīng)干細(xì)胞會(huì)在培養(yǎng)過(guò)程中從單細(xì)胞慢慢聚集成球,并且在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量細(xì)胞殘?jiān)痛x廢物,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行換液會(huì)將培養(yǎng)液中的細(xì)胞殘?jiān)痛x廢物去除,從而對(duì)細(xì)胞增殖起到促進(jìn)的作用。
實(shí)驗(yàn)室對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞換液的主要方式是將培養(yǎng)瓶靜置,用普通移液管吸取培養(yǎng)基上層液體進(jìn)行換液去除。目前技術(shù)缺陷:目前神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)的方式主要是在培養(yǎng)集中懸浮培養(yǎng),換液時(shí)用移液管將培養(yǎng)瓶中的2/3體積的舊培養(yǎng)基吸出。因?yàn)樯窠?jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)聚集成細(xì)胞團(tuán),靜置會(huì)將一部分體積較大、質(zhì)量較重的細(xì)胞團(tuán)沉淀到瓶底,但仍有大部分細(xì)胞團(tuán)在培養(yǎng)集中做布朗運(yùn)動(dòng),會(huì)懸浮在培養(yǎng)基中,而目前利用常規(guī)移液管吸取上層2/3培養(yǎng)基廢棄,移液管的管口直徑一般在1mm左右,遠(yuǎn)大于細(xì)胞團(tuán)直徑,因此在換液過(guò)程中會(huì)有大量的細(xì)胞損失,并且在換液過(guò)程中去除的培養(yǎng)基過(guò)多,培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分尚未消耗,導(dǎo)致培養(yǎng)基浪費(fèi)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本實(shí)用新型的目的是為了解決上述問(wèn)題,提出一種神經(jīng)干細(xì)胞連續(xù)換液培養(yǎng)裝置,該神經(jīng)干細(xì)胞連續(xù)換液培養(yǎng)裝置解決在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)換液過(guò)程中,神經(jīng)干細(xì)胞懸浮在舊培養(yǎng)基中和細(xì)胞殘?jiān)黄鹪趽Q液過(guò)程中被換掉導(dǎo)致浪費(fèi),同時(shí)使培養(yǎng)基流動(dòng),使神經(jīng)球懸浮生長(zhǎng),防止細(xì)胞貼壁分化。
本實(shí)用新型的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:神經(jīng)干細(xì)胞連續(xù)換液培養(yǎng)裝置,其特征在于:設(shè)有細(xì)胞培養(yǎng)瓶,所述細(xì)胞培養(yǎng)瓶在底部的左側(cè)、右側(cè)分別設(shè)置有左側(cè)出液管、右側(cè)回液管,所述左側(cè)出液管、右側(cè)回液管通過(guò)一輸液管、蠕動(dòng)泵與設(shè)置在玻璃導(dǎo)管內(nèi)的篩網(wǎng)管相連通,所述輸液管上設(shè)有左端密封開(kāi)關(guān)、右端密封開(kāi)關(guān),所述篩網(wǎng)管上設(shè)有孔徑為50微米的微孔,所述細(xì)胞培養(yǎng)瓶上設(shè)有培新瓶培養(yǎng)液添加口,所述玻璃導(dǎo)管為一較粗的容器狀管道,所述容器狀管道在兩端分別通過(guò)收集管路蠕動(dòng)泵、收集循環(huán)管與收集器相連通,所述收集器上設(shè)有收集器新培養(yǎng)基添加口,所述收集器內(nèi)設(shè)有篩網(wǎng)膜,所述篩網(wǎng)膜的孔徑為10微米。
本實(shí)新型利用神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中聚集成細(xì)胞團(tuán)的特點(diǎn),根據(jù)細(xì)胞團(tuán)和細(xì)胞殘?jiān)w積大小差異進(jìn)行過(guò)濾分離換液;過(guò)濾裝置利用伯努利原理利用錯(cuò)向流進(jìn)行殘?jiān)蛛x提高分離效率;利用切向流進(jìn)行收集,防止殘?jiān)氯Y網(wǎng)并且可以使培養(yǎng)基循過(guò)濾后再循環(huán);采用有機(jī)高分子塑料和玻璃為材料,避免細(xì)胞粘連并且方便滅菌;閉合密封,保證細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的無(wú)菌狀態(tài);可以進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)的殘?jiān)蛛x換液,加入新培養(yǎng)基混合,換出殘?jiān)旌弦后w,不斷的純化培養(yǎng)基,提高培養(yǎng)瓶中神經(jīng)干細(xì)胞濃度;培養(yǎng)基在裝置中循環(huán)使用,提高培養(yǎng)基使用效率。
附圖說(shuō)明
圖1是本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖;
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步的說(shuō)明:
實(shí)施例:參見(jiàn)附圖1,神經(jīng)干細(xì)胞連續(xù)換液培養(yǎng)裝置,設(shè)有細(xì)胞培養(yǎng)瓶 1,所述細(xì)胞培養(yǎng)瓶在底部的左側(cè)、右側(cè)分別設(shè)置有左側(cè)出液管、右側(cè)回液管,所述左側(cè)出液管、右側(cè)回液管通過(guò)一輸液管、蠕動(dòng)泵2與設(shè)置在玻璃導(dǎo)管4內(nèi)的篩網(wǎng)管3相連通,所述輸液管上設(shè)有左端密封開(kāi)關(guān)7、右端密封開(kāi)關(guān)8,所述篩網(wǎng)管上設(shè)有孔徑為50微米的微孔,所述細(xì)胞培養(yǎng)瓶上設(shè)有培新瓶培養(yǎng)液添加口9,所述玻璃導(dǎo)管為一較粗的容器狀管道,所述容器狀管道在兩端分別通過(guò)收集管路蠕動(dòng)泵10、收集循環(huán)管與收集器相連通,所述收集器上設(shè)有收集器新培養(yǎng)基添加口6,所述收集器內(nèi)設(shè)有篩網(wǎng)膜5,所述篩網(wǎng)膜的孔徑為10微米。
神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)前期,神經(jīng)干細(xì)胞呈單細(xì)胞分布,此時(shí)將細(xì)胞接種在1 所示的培養(yǎng)瓶中,將圖中所示7和8位置的開(kāi)關(guān)閉合,使細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中靜置培養(yǎng),三天后細(xì)胞聚集成球后,將新培養(yǎng)液從圖中兩個(gè)添加口注入,打開(kāi) 7和8位置的開(kāi)關(guān),開(kāi)啟兩個(gè)蠕動(dòng)泵,使液體按照?qǐng)D中所示的方向循環(huán)進(jìn)行,并且兩個(gè)管內(nèi)液體流速大小有差異,保證連接培養(yǎng)瓶的液體管路流速小于連接過(guò)濾裝置的管路的液體流速,流速大壓強(qiáng)小,當(dāng)液體流經(jīng)液體交匯處,兩個(gè)管路形成流速不同的錯(cuò)向流,使直徑較小的細(xì)胞殘?jiān)高^(guò)濾膜過(guò)濾出去,而較大的神經(jīng)球則留在培養(yǎng)瓶管路繼續(xù)循環(huán),錯(cuò)向流過(guò)濾可以提高過(guò)濾效率并且沖洗篩網(wǎng)保持清潔,過(guò)濾后的細(xì)胞殘?jiān)S管路進(jìn)入收集器,在5形成的濾膜處形成切向流使細(xì)胞殘?jiān)^(guò)濾去除,并且保證殘?jiān)欢氯Y網(wǎng),整個(gè)實(shí)驗(yàn)裝置動(dòng)態(tài)循環(huán),保證神經(jīng)球懸浮培養(yǎng),并去除細(xì)胞殘?jiān)?,并且使培養(yǎng)基循環(huán)使用,提高培養(yǎng)基利用效率。
最后應(yīng)說(shuō)明的是:顯然,上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本實(shí)用新型所作的舉例,而并非對(duì)實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)需也無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見(jiàn)的變化或變動(dòng)仍處于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之中。