本發(fā)明涉及一種從天然產物中提取藥理活性成份的技術，具體涉及一種從蠶沙中提取1-脫氧野尻霉素的方法。

背景技術：

1-脫氧野尻霉素(dnj)，是一種存在于桑葉、蠶沙中的多羥基天然生物堿，含量約為0.1％，在已知植物中含量較高，其分子式為c6h13no4，分子量為163.17，是目前預防治療糖尿病市場上唯一獲得國際公認的零傷害生物制劑，在醫(yī)藥、保健品、功能性食品等領域有著廣泛的應用前景。

目前國內提取1-脫氧野尻霉素主要有以下幾種方法：1、將桑葉粉碎后進行提取、無機酸進行酸化，然后過陽離子交換樹脂，氨水洗脫，經濃縮干燥，得到dnj產品，其工藝雖簡單，但過陽離子交換樹脂，損失較大。2、將桑葉進行提取、濃縮、微孔過濾、經有機超濾膜過濾，然后過大孔吸附樹脂以及陽離子交換樹脂，最后濃縮、干燥得產品，產品純度可達50％以上，但是工藝繁瑣、過程復雜、設備投入大、不利工業(yè)生產。3、以桑葉為原料，經過前處理、酶解、過濾、連續(xù)組合提取(罐組間歇式)、濃縮、醇沉、離心、膜濾、濃縮、干燥，該方法存在工藝繁瑣、過程復雜、成本高等缺陷。

綜上所述，目前的提取方法存在以下問題，一是以桑葉為原料，與家蠶爭食，資源利用率低，原料成本高，二是工藝繁瑣、過程復雜、設備投入大、成本高，費工費時、污染環(huán)境，不利于工業(yè)化生產。

技術實現要素：

有鑒于此，本申請?zhí)峁┮环N用蠶沙提取1-脫氧野尻霉素的方法，該方法利于資源節(jié)約、操作簡便、成本低、節(jié)能環(huán)保、并且能進行工業(yè)化生產。

為解決以上技術問題，本發(fā)明提供的技術方案是一種從蠶沙中提取1-脫氧野尻霉素的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：(1)將干凈的蠶沙進行連續(xù)逆流提取得到蠶沙提取液和糊狀混合物；(2)將所述提取液進行絮凝沉淀得到澄清液；(3)將所述澄清液進行超濾除雜得到超濾透過液；(4)將所述超濾透過液進行納濾濃縮得到納濾濃縮液；(5)將所述納濾濃縮液進行萃取分離得到萃取液；(6)將所述萃取液進行濃縮干燥得到含有1-脫氧野尻霉素的成品，成品中所述1-脫氧野尻霉素的質量分數為20～30％。

優(yōu)選的，所述步驟(1)具體為將干凈的蠶沙加水潤濕均勻，用乙醇進行連續(xù)逆流提取1～3小時，得到第一提取液，將所述第一提取液減壓濃縮回收乙醇得到第二提取液，將所述第二提取液冷卻分離得到蠶沙提取液與糊狀混合物。

優(yōu)選的，所述干凈的蠶沙是將蠶沙進行干法處理，除去鐵釘、石子、玻璃、粉塵、泥土等雜質后得到的。

優(yōu)選的，所述加水潤濕后的蠶沙含水率為30～50％，所述連續(xù)逆流提取的溫度為30～50℃。

更優(yōu)選的，所述加水潤濕后的蠶沙的含水率為35～45％，所述連續(xù)逆流提取的溫度為35～45℃。

優(yōu)選的，所述糊狀混合物用于制備葉綠素衍生物。

更優(yōu)選的，所述連續(xù)逆流提取得到的尾渣可以用于生產牛羊飼料和有機肥。

優(yōu)選的，所述步驟(2)具體為將所述提取液加入質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌1～2小時，然后加入質量分數為0.3％聚丙烯酰胺后攪拌20～40分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物。

更優(yōu)選的，所述步驟(2)具體為將所述提取液加入質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌1小時，然后加入質量分數為0.3％聚丙烯酰胺后攪拌30分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物。

更優(yōu)選的，所述固態(tài)混合物還可以進行壓濾得到濾液和濾餅，所述濾餅用作有機肥，所述濾液可以再次進行絮凝沉淀。

優(yōu)選的，所述提取液、聚合氯化鋁、聚丙烯酰胺加入的體積份數的比例為50:(1～2)：(2～3)。

更優(yōu)選的，所述提取液、聚合氯化鋁、聚丙烯酰胺加入的體積份數的比例為50:1：2.5。

優(yōu)選的，所述步驟(3)將所述澄清液進行超濾除雜主要除去澄清液中的膠體和大分子雜質。

優(yōu)選的，所述步驟(4)具體為將所述超濾透過液經納濾1:5濃縮，去除鹽、灰份、水及小分子雜質，再經刮板薄膜減壓1:(2～4)倍濃縮，得到納濾濃縮液。

優(yōu)選的，所述(5)具體為將所述納濾濃縮液加入堿溶液調節(jié)ph至9～11，使dnj呈游離狀，加入與所述納濾濃縮液等體積的親脂性溶劑，常溫下攪拌萃取1～2小時，靜置4小時分層得到萃取液。

更優(yōu)選的，所述堿溶液為氫氧化鈉溶液。

優(yōu)選的，所述步驟(6)具體為將萃取液在30～60℃減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精和純水，攪拌溶解，經過噴霧干燥得到1-脫氧野尻霉素成品。

更優(yōu)選的，所述步驟(6)具體為將萃取液在40～50℃減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精和純水，攪拌溶解，經過噴霧干燥得到1-脫氧野尻霉素成品，所述成品中1-脫氧野尻霉素的質量分數為20～30％。

優(yōu)選的，所述麥芽糊精的重量為所述膏狀萃取液的30％～40％，所述純水的重量為所述膏狀萃取液的5～7倍。

本申請與現有技術相比，其詳細說明如下：

1、桑葉本是家蠶的食物，家蠶食用大量桑葉，主要吸收蛋白用于自身成長和吐絲，而其它有益成分通過排泄物形成蠶沙，其中也包括脫氧野尻霉素。經檢測，蠶沙與桑葉中的脫氧野尻霉素含量相差不大。本發(fā)明采用蠶沙作為原料，蠶沙為其他產業(yè)鏈的廢棄物，具有不與家蠶爭食桑葉，充分利用廢棄物、成本低、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)點；2、本發(fā)明采用連續(xù)逆流提取工藝對蠶沙進行提取，連續(xù)逆流提取工藝具有溶耗低、提取時間短、提取率高的特點，且脂溶性提取物用于生產葉綠素衍生物，水溶性提取物用于生產脫氧野尻霉素，提取殘渣用于生產牛羊飼料和有機肥，充分合理利用資源，不產生浪費并且不會污染環(huán)境；3、本發(fā)明采用超濾和納濾的膜分離工藝，該工藝既有分離、濃縮、純化和精制的功能，又有高效、節(jié)能、環(huán)保的優(yōu)點，并且是分子級過濾，過濾過程簡單、易于控制；4、采用萃取工藝進行分離，簡單易操作，避免了柱層析分離的繁瑣與高成本，有利于工業(yè)化大生產。

附圖說明

圖1為本發(fā)明提供的一種蠶沙工業(yè)化生產1-脫氧野尻霉素的方法的工藝流程圖

具體實施方式

為了使本領域的技術人員更好地理解本發(fā)明的技術方案，下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。

實施例1

一種蠶沙工業(yè)化生產1-脫氧野尻霉素的方法，包括以下步驟：

a、連續(xù)逆流提?。喝∫欢ㄙ|量的蠶沙，經過干法清理，除去鐵釘、石子、玻璃、粉塵、泥土等雜質，加水潤濕均勻，使蠶沙的含水率為35％，進入連續(xù)逆流提取器，溫度控制在35-45℃，乙醇連續(xù)逆流提取1小時，得到第一提取液，將所述第一提取液減壓濃縮回收乙醇得到第二提取液，將所述第二提取液冷卻分離得到蠶沙提取液與糊狀混合物，所述糊狀混合物用于制備葉綠素衍生物，所述蠶沙提取液用于制備1-脫氧野尻霉素。

b、絮凝沉淀：取蠶沙提取液50立方，加入1立方質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌1小時，加入2.5立方質量分數為0.3％的聚丙烯酰胺攪拌20分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物，將所述固態(tài)混合物壓濾，濾餅用作有機肥，濾液返再次進行絮凝沉淀。

c、超濾除雜：將所述澄清液經超濾去除膠體、大分子雜質得到超濾透過液。

d、納濾濃縮：將所述超濾透過液經納濾1:5濃縮，去除鹽、灰份、水及小分子雜質，得納濾濃縮液約10立方，再經刮板薄膜減壓1:3濃縮，得最終納濾濃縮液約3.3立方。

e、萃取分離：將所述納濾濃縮液加入naoh溶液，調ph＝10，加入3.3立方親脂性溶劑常溫攪拌萃取1小時，靜置4小時分層得到萃取液。

f、濃縮干燥：取萃取液約3.3立方在45℃溫度下減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精20kg、純水300l，攪拌溶解1小時，噴霧干燥得含量約25％的1-脫氧野尻霉素成品約70kg。

實施例2

一種蠶沙工業(yè)化生產1-脫氧野尻霉素的方法，包括以下步驟：

a、連續(xù)逆流提?。喝∫欢ㄙ|量的蠶沙，經過干法清理，除去鐵釘、石子、玻璃、粉塵、泥土等雜質，加水潤濕均勻，使蠶沙的含水率為45％，進入連續(xù)逆流提取器，溫度控制在35-45℃，乙醇連續(xù)逆流提取2小時，得到第一提取液，將所述第一提取液減壓濃縮回收乙醇得到第二提取液，將所述第二提取液冷卻分離得到蠶沙提取液與糊狀混合物，所述糊狀混合物用于制備葉綠素衍生物，所述蠶沙提取液用于制備1-脫氧野尻霉素。

b、絮凝沉淀：取蠶沙提取液50立方，加入2立方質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌2小時，加入3立方質量分數為0.3％的聚丙烯酰胺攪拌40分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物，將所述固態(tài)混合物壓濾，濾餅用作有機肥，濾液返再次進行絮凝沉淀。

c、超濾除雜：將所述澄清液經超濾去除膠體、大分子雜質得到超濾透過液。

d、納濾濃縮：將所述超濾透過液經納濾1:5濃縮，去除鹽、灰份、水及小分子雜質，得納濾濃縮液約10立方，再經刮板薄膜減壓1:2濃縮，得最終納濾濃縮液約5立方。

e、萃取分離：將所述納濾濃縮液加入naoh溶液，調ph＝9，加入5立方親脂性溶劑常溫攪拌萃取1小時，靜置4小時分層得到萃取液。

f、濃縮干燥：取萃取液約5立方在50℃溫度下減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精15kg、純水300l，攪拌溶解1小時，噴霧干燥得含量約30％的1-脫氧野尻霉素成品約75kg。

實施例3

一種蠶沙工業(yè)化生產1-脫氧野尻霉素的方法，包括以下步驟：

a、連續(xù)逆流提?。喝∫欢ㄙ|量的蠶沙，經過干法清理，除去鐵釘、石子、玻璃、粉塵、泥土等雜質，加水潤濕均勻，使蠶沙的含水率為30％，進入連續(xù)逆流提取器，溫度控制在35-45℃，乙醇連續(xù)逆流提取1.5小時，得到第一提取液，將所述第一提取液減壓濃縮回收乙醇得到第二提取液，將所述第二提取液冷卻分離得到蠶沙提取液與糊狀混合物，所述糊狀混合物用于制備葉綠素衍生物，所述蠶沙提取液用于制備1-脫氧野尻霉素。

b、絮凝沉淀：取蠶沙提取液50立方，加入1立方質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌1小時，加入2立方質量分數為0.3％的聚丙烯酰胺攪拌30分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物，將所述固態(tài)混合物壓濾，濾餅用作有機肥，濾液返再次進行絮凝沉淀。

c、超濾除雜：將所述澄清液經超濾去除膠體、大分子雜質得到超濾透過液。

d、納濾濃縮：將所述超濾透過液經納濾1:5濃縮，去除鹽、灰份、水及小分子雜質，得納濾濃縮液約10立方，再經刮板薄膜減壓1:4濃縮，得最終納濾濃縮液約2.5立方。

e、萃取分離：將所述納濾濃縮液加入naoh溶液，調ph＝11，加入2.5立方親脂性溶劑常溫攪拌萃取1小時，靜置4小時分層得到萃取液。

f、濃縮干燥：取萃取液約2.5立方在40℃溫度下減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精10kg、純水250l，攪拌溶解1小時，噴霧干燥得含量約20％的1-脫氧野尻霉素成品約60kg。

實施例4

一種蠶沙工業(yè)化生產1-脫氧野尻霉素的方法，包括以下步驟：

a、連續(xù)逆流提取：取一定質量的蠶沙，經過干法清理，除去鐵釘、石子、玻璃、粉塵、泥土等雜質，加水潤濕均勻，使蠶沙的含水率為50％，進入連續(xù)逆流提取器，溫度控制在35-45℃，乙醇連續(xù)逆流提取2小時，得到第一提取液，將所述第一提取液減壓濃縮回收乙醇得到第二提取液，將所述第二提取液冷卻分離得到蠶沙提取液與糊狀混合物，所述糊狀混合物用于制備葉綠素衍生物，所述蠶沙提取液用于制備1-脫氧野尻霉素。

b、絮凝沉淀：取蠶沙提取液50立方，加入1立方質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌2小時，加入2.5立方質量分數為0.3％的聚丙烯酰胺攪拌40分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物，將所述固態(tài)混合物壓濾，濾餅用作有機肥，濾液返再次進行絮凝沉淀。

c、超濾除雜：將所述澄清液經超濾去除膠體、大分子雜質得到超濾透過液。

d、納濾濃縮：將所述超濾透過液經納濾1:5濃縮，去除鹽、灰份、水及小分子雜質，得納濾濃縮液約10立方，再經刮板薄膜減壓1:3濃縮，得最終納濾濃縮液約3.3立方。

e、萃取分離：將所述納濾濃縮液加入naoh溶液，調ph＝10，加入3.3立方親脂性溶劑常溫攪拌萃取1小時，靜置4小時分層得到萃取液。

f、濃縮干燥：取萃取液約3.3立方在30℃溫度下減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精15kg、純水300l，攪拌溶解1小時，噴霧干燥得含量約25％的1-脫氧野尻霉素成品約70kg。

實施例5

一種蠶沙工業(yè)化生產1-脫氧野尻霉素的方法，包括以下步驟：

a、連續(xù)逆流提?。喝∫欢ㄙ|量的蠶沙，經過干法清理，除去鐵釘、石子、玻璃、粉塵、泥土等雜質，加水潤濕均勻，使蠶沙的含水率為45％，進入連續(xù)逆流提取器，溫度控制在35-45℃，乙醇連續(xù)逆流提取1.5小時，得到第一提取液，將所述第一提取液減壓濃縮回收乙醇得到第二提取液，將所述第二提取液冷卻分離得到蠶沙提取液與糊狀混合物，所述糊狀混合物用于制備葉綠素衍生物，所述蠶沙提取液用于制備1-脫氧野尻霉素。

b、絮凝沉淀：取蠶沙提取液50立方，加入1立方質量分數為5％的聚合氯化鋁，攪拌1小時，加入2立方質量分數為0.3％的聚丙烯酰胺攪拌50分鐘，靜置分層得到澄清液和固態(tài)混合物，將所述固態(tài)混合物壓濾，濾餅用作有機肥，濾液返再次進行絮凝沉淀。

c、超濾除雜：將所述澄清液經超濾去除膠體、大分子雜質得到超濾透過液。

d、納濾濃縮：將所述超濾透過液經納濾1:5濃縮，去除鹽、灰份、水及小分子雜質，得納濾濃縮液約10立方，再經刮板薄膜減壓1:3濃縮，得最終納濾濃縮液約3.3立方。

e、萃取分離：將所述納濾濃縮液加入naoh溶液，調ph＝10，加入3.3立方親脂性溶劑常溫攪拌萃取1小時，靜置4小時分層得到萃取液。

f、濃縮干燥：取萃取液約3.3立方在60℃溫度下減壓濃縮至所述萃取液呈膏狀，在所述膏狀萃取液中加入麥芽糊精15kg、純水300l，攪拌溶解1小時，噴霧干燥得含量約20％的1-脫氧野尻霉素成品約70kg。

以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出的是，上述優(yōu)選實施方式不應視為對本發(fā)明的限制，本發(fā)明的保護范圍應當以權利要求所限定的范圍為準。對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。