本發(fā)明涉及一類新型的喹唑啉衍生物及其鹽和其溶劑化物；并涉及該類化合物的制備方法和它們在制備抗腫瘤藥物方面的用途。

背景技術(shù)：

臨床上常用的抗腫瘤藥物主要是細(xì)胞毒類藥物，具有難以避免的毒副作用。近來興起的靶向腫瘤治療給腫瘤患者帶來福音。靶向腫瘤治療藥物進(jìn)入體內(nèi)能特異性地與致癌靶標(biāo)相結(jié)合而發(fā)揮作用，使腫瘤細(xì)胞特異性死亡，而不會波及周圍的正常細(xì)胞。表皮生長因子受體是一種受體酪氨酸激酶，研究表明表皮因子生長受體(egfr)是一個治療癌癥的重要靶點(diǎn)。隨著人們對egfr信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的認(rèn)知，現(xiàn)階段已經(jīng)開發(fā)出了一些靶向egfr的藥物，包括單克隆抗體、小分子酪氨酸激酶抑制劑，反義寡核苷酸、抗霉素軛合物等。其中小分子酪氨酸激酶抑制劑是最具潛力且應(yīng)用最為廣泛的egfr抑制劑。

喹唑啉類化合物作為一種有效的egfr抑制劑(tki)，受到了普遍的重視。4-苯氨基喹唑啉是一類較早發(fā)現(xiàn)的表皮生長因子受體酪氨酸激酶的抑制劑。一系列的報(bào)道表明4-苯氨基喹唑啉化合物通過與egfr的atp結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，高度選擇性地抑制egfr的磷酸化，進(jìn)而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖的效果。目前egfr酪氨酸抑制劑已經(jīng)發(fā)展到第三代。這些egfr抑制劑與egfr的作用方式可分為兩種，即可逆型和不可逆型抑制劑。第一代為可逆型抑制劑以gefitinib、erlotinib、icotinib(liud,zhangl,wuy,etal.lungcancer,2015,89(3):262-267.)等為代表。這些第一代egfr抑制劑在腫瘤治療的過程中，產(chǎn)生egfr的t790m突變會對第一代egfr抑制劑產(chǎn)生耐藥性。t790m突變是由蘇氨酸t(yī)hr790變成體積更大的蛋氨酸met790，改變了egfr激酶域的構(gòu)象，增強(qiáng)了atp與egfr激酶口袋的結(jié)合能力，大大降低了egfrtkis的結(jié)合能力(susumuk,boggontj,tajhald,etal.newenglandjournalofmedicine,2005,352(8):786-792.)。針對這種突變，藥物化學(xué)家開發(fā)出了第二代不可逆型egfrtkis。作為不可逆型egfrtkis，這些藥物包含了一個michael受體，與位于atp結(jié)合口袋入口處的半胱氨酸殘基(cys797)發(fā)生共價(jià)鍵結(jié)合，產(chǎn)生不可逆抑制酪氨酸激酶的活性作用(changs,zhangl,xus,etal.journalofmedicinalchemistry,2012,55(6):2711-2723.)。第二代不可逆egfr抑制劑中以afatinib(dungort,keatinggm.drug,2013,73(13):1503-1515.)、dacomitinib、neratinib(hwei-rut,etal.journalofmedicinalchemistry,2005,48(4):1107-1131.)為代表，雖然它們在治療t790m突變的非小細(xì)胞肺癌有較好的療效，但其與劑量相關(guān)的副作用較為嚴(yán)重，如腹瀉，皮疹等(wenjunz,daliae,liangc,etal.nature,2009,462(7276):1070-1074.)?；谝陨显?，第三代egfrtkis便應(yīng)運(yùn)而生，如co-1686及azd9291等。盡管第三代egfrtkis的臨床研究展現(xiàn)出高的活性，但接受azd9291治療的患者有將近三分之一出現(xiàn)了一種新的突變egfr^c797s突變(第三次點(diǎn)突變)。這種新出現(xiàn)的egfr^c797s突變對第三代egfrtkis產(chǎn)生了新的耐藥性(zopiap,etal.cancerdiscovery,2015,5(7):713-722.)，因此，開發(fā)新型高效的egfrtkis具有極其重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一類具有抗腫瘤活性的喹唑啉衍生物，以及這些化合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。

解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：該類具有抗腫瘤活性的喹唑啉衍生物為結(jié)構(gòu)式如下的化合物：

式中r¹、r²各自獨(dú)立地代表氫、鹵素、乙炔基、丙烯-1-基、鹵代的芐氧基中的任意一種；r³代表氟、哌嗪基、1-甲基哌嗪基、嗎啉基、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基、1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基、1-丙烯?；哙夯械娜我庖环N。

本發(fā)明喹唑啉衍生物優(yōu)選下列化合物1～28中的任意一種：

化合物1：6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物2：6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物3：6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物4：6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物5：6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物6：6-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物7：6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物8：6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物9：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物10：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物11：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物12：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物13：6-氟-7-嗎啉基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物14：6-氟-7-嗎啉基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物15：6-氟-7-嗎啉基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物16：6-氟-7-嗎啉基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物17：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物18：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物19：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物20：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物21：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物22：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物23：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物24：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物25：6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物26：6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物27：6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物28：6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

上述具有抗腫瘤活性的喹唑啉衍生物中，r³代表氟時(shí)，其是以4,5-二氟-2-氨基苯甲酸為原料，通過與甲酰胺環(huán)化成酮后，與氯化亞砜發(fā)生親電取代反應(yīng)，再與取代芳胺反應(yīng)制備而成，具體合成路線如下：

上述具有抗腫瘤活性的喹唑啉衍生物中，r³代表哌嗪基、1-甲基哌嗪基、嗎啉基、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基或1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基時(shí)，其是將式i化合物在縛酸劑二異丙基乙基胺(dipea)存在下，分別與哌嗪、1-甲基哌嗪、嗎啉、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪、1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪進(jìn)行親核取代反應(yīng)制備而成，具體合成路線如下：

上述具有抗腫瘤活性的喹唑啉衍生物中，r³代表1-丙烯酰基哌嗪基時(shí)，其是將丙烯酰氯與6-氟-7-哌嗪基-4-芳氨基喹唑啉發(fā)生親核取代反應(yīng)制備而成，具體合成路線如下：

本發(fā)明喹唑啉衍生物在制備抗腫瘤藥物中的用途，其按常規(guī)藥用制劑，與藥學(xué)上可接受的載體按照各種制劑的常規(guī)制備工藝制成，可以是片劑、顆粒劑、膠囊劑。

本發(fā)明的喹唑啉衍生物對腫瘤細(xì)胞的增殖具有良好的抑制作用，其中一些化合物活性明顯優(yōu)于現(xiàn)臨床使用的抗腫瘤藥物吉非替尼和拉帕替尼，表明其可用于制備抗腫瘤藥物。該類化合物既可以獨(dú)自用藥，也可與其它藥物聯(lián)合使用，也可以其鹽或溶劑化物的形式用于抗腫瘤藥物的制備。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不僅限于這些實(shí)施例。

下面實(shí)施例中所用試劑均為分析純。化合物結(jié)構(gòu)確定所用的核磁共振數(shù)據(jù)由brukeravance600超導(dǎo)核磁共振儀測定，tms作為內(nèi)標(biāo)；紅外光譜數(shù)據(jù)采用brukertensor2733紅外光譜儀測定；熔點(diǎn)采用x-6顯微熔點(diǎn)測定儀(北京泰克儀器有限公司)測定(溫度未進(jìn)行校正)；質(zhì)譜數(shù)據(jù)用brukeresquire3000plus質(zhì)譜儀測定。

本發(fā)明中所用原料6,7-二氟-4-氯喹唑啉根據(jù)下述方法合成：

將4,5-二氟-2-氨基苯甲酸(2.0g，11.6mmol)、甲酰胺(18ml)和醋酸(2.5ml)的混合液在125℃下回流反應(yīng)24h，冷卻至室溫，加入15ml蒸餾水，抽濾后用水洗滌，干燥，得到白色固體6,7-二氟喹唑啉-4(3h)酮(1.76g，9.7mmol)。將得到的6,7-二氟喹唑啉-4(3h)酮置于50ml圓底燒瓶中，加入氯化亞砜(28ml)和無水dmf(300μl)，80℃反應(yīng)2h，反應(yīng)由渾濁液變?yōu)榈S色澄清液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸去溶劑，得到黃色固體6,7-二氟-4-氯喹唑啉(1.89g，9.4mmol)，以4,5-二氟-2-氨基苯甲酸計(jì)算，其產(chǎn)率為81.0％。

實(shí)施例1：合成6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

將6,7-二氟-4-氯喹唑啉(740mg，3.7mmol)、3-氯-4-氟苯胺(537mg，3.7mmol)加入異丙醇(16ml)中，90℃加熱回流反應(yīng)4h，反應(yīng)液冷卻后，抽濾，用異丙醇洗滌，干燥濾餅，得到淡黃色固體6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(977mg，3.16mmol)，其產(chǎn)率為85.3％。m.p.：233.6-234.4℃，hrms(c14h7clf3n3)m/z[m+h]⁺:310.0361(計(jì)算值:310.0353)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.80(s,1h),8.63(s,1h),8.58(dd,j＝11.6,8.6hz,1h),8.16(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.82-7.77(m,2h),7.44(t,j＝9.1hz,1h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.92(d,j＝3.7hz),154.85,153.47(d,j＝243.7hz),153.28(dd,j＝254.9,15.2hz),148.28(dd,j＝248.2,14.9hz),147.87(d,j＝11.4hz),136.05,123.50,122.30(d,j＝6.9hz),118.85(d,j＝18.6hz),116.58(d,j＝21.7hz),114.72(d,j＝16.2hz),111.73(d,j＝6.2hz),110.32(d,j＝18.8hz)；νmax(kbr)cm^-1:3418,3044,2895,1628,1574,1506,1454,1379,1308,1215,1053,906,868,831。

實(shí)施例2：合成6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

將6,7-二氟-4-氯喹唑啉(800mg，4.0mmol)、3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯胺(1.0g，4.0mmol)加入異丙醇(16ml)中，90℃加熱回流反應(yīng)4h，反應(yīng)液冷卻后，抽濾，用異丙醇洗滌，干燥濾餅，得到黃色固體6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(1.5g，3.6mmol)，其產(chǎn)率為90.2％。m.p.：207.2-208.9℃，hrms(c21h13clf3n3o)m/z[m+h]⁺:416.0768(計(jì)算值:416.0772)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.72(s,1h),8.61-8.57(m,2h),8.01(s,1h),7.79(dd,j＝11.0,8.1hz,1h),7.70(dd,j＝8.8,1.9hz,1h),7.48(dd,j＝14.2,7.5hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.27(d,j＝8.9hz,1h),7.20-7.17(m,1h),5.26(s,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.99,161.37,157.05(d,j＝3.8hz),155.08,153.20(dd,j＝254.3,15.2hz),149.83,148.20(dd,j＝247.4,14.7hz),147.83(d,j＝11.3hz),139.59(d,j＝7.4hz),132.76,130.51(d,j＝8.2hz),123.97,123.25(d,j＝2.5hz),122.13,121.08,114.65(d,j＝20.3hz),114.30,113.97(d,j＝22.0hz),111.74(d,j＝6.3hz),110.32(d,j＝19.6hz),69.38；νmax(kbr)cm^-1:3294,3109,2914,3044,1612,1585,1508,1431,1346,1283,1217,1061,883,794。

實(shí)施例3：合成6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

將6,7-二氟-4-氯喹唑啉(500mg，2.5mmol)、3-乙炔基苯胺(293mg，2.5mmol)加入異丙醇(10ml)中，90℃加熱回流反應(yīng)4h，反應(yīng)液冷卻后，抽濾，用異丙醇洗滌，干燥濾餅，得到黃色固體7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(572mg，2.0mmol)，其產(chǎn)率為81.3％。m.p.：233.7-234.8℃，hrms(c16h9f2n3)m/z[m+h]⁺:282.0834(計(jì)算值:282.0837)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.85(s,1h),8.70-8.67(m,1h),8.65(s,1h),8.05(s,1h),7.89(d,j＝8.1hz,1h),7.83-7.79(m,1h),7.43(t,j＝7.9hz,1h),7.27(d,j＝7.6hz,1h),4.22(s)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):158.97(d,j＝2.9hz),154.32(dd,j＝260.1,15.8hz),151.61,149.08(dd,j＝251.0,14.0hz),137.67(d,j＝9.5hz),136.85,129.61,129.11,127.02,125.02,122.00,113.69(d,j＝21.1hz),111.04(d,j＝7.1hz),108.49(d,j＝20.1hz),82.76,81.34；νmax(kbr)cm^-1:3296,3109,3038,1622,1580,1528,1431,1348,903,795,646。

實(shí)施例4：合成6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

將6,7-二氟-4-氯喹唑啉(700mg，3.5mmol)、4-(e)-丙烯基苯胺(466mg，3.5mmol)加入異丙醇(14ml)中，90℃加熱回流反應(yīng)4h，反應(yīng)液冷卻后，抽濾，用異丙醇洗滌，干燥濾餅，得到黃色固體6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(865mg，2.9mmol)，其產(chǎn)率為83.1％。m.p.：188.0-189.6℃，hrms(c17h13f2n3)m/z[m+h]⁺:298.1150(計(jì)算值:298.1150)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.15(s,1h),8.80(dd,j＝11.7,8.5hz,1h),8.65(s,1h),7.81(dd,j＝11.3,7.8hz,1h),7.78(d,j＝8.5hz,2h),7.41(d,j＝8.5hz,2h),6.41(d,j＝15.8,1h),6.27(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),1.86(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):157.32(d,j＝2.9hz),154.43,153.37(dd,j＝255.4,15.0hz),148.34(dd,j＝248.4,14.7hz),145.92(d,j＝10.3hz),137.03,133.68,130.31,125.74,124.78,122.64,113.42(d,j＝16.8hz),111.75(d,j＝6.8hz),111.07(d,j＝19.8hz),18.22；νmax(kbr)cm^-1:3427,3049,2961,1626,1574,1512,1450,1377,1045,903,851,785。

實(shí)施例5：合成6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

將6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(150mg，0.48mmol)、無水哌嗪(413mg，4.8mmol)、二異丙基乙基胺(69mg，0.53mmol)溶于正丁醇(4ml)中，130℃回流反應(yīng)6h，向反應(yīng)液中加入3mlh2o，振蕩后分液，除去水層，將有機(jī)層蒸除溶劑，以甲醇與二氯甲烷體積比為1:6的混合液為展開劑進(jìn)行柱色譜分離，得到白色固體6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(127mg，0.34mmol)，其產(chǎn)率為70.8％。m.p.：258.9-260.1℃，hrms(c18h16clf2n5)m/z[m+h]⁺:376.1137(計(jì)算值:376.1135)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.62(s,1h),8.55(s,1h),8.29(d,j＝14.4hz,1h),8.23(dd,j＝6.8,2.6hz,1h),7.84-7.80(m,1h),7.42(t,j＝9.0hz,1h),7.16(d,j＝8.4hz,1h),3.12(t,j＝4.6hz,4h),2.89(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.48(d,j＝2.7hz),153.93,153.51(d,j＝248.5hz),153.07(d,j＝242.9hz),148.22,145.97(d,j＝10.4hz),136.70(d,j＝1.6hz),122.82,121.64(d,j＝6.8hz),118.72(d,j＝18.3hz),116.44(d,j＝21.7hz),114.61(d,j＝3.4hz),108.68(d,j＝8.9hz),108.12(d,j＝24.0hz),50.92,45.43；νmax(kbr)cm^-1:3254,3171,3082,3045,2947,2826,1624,1566,1502,1429,1232,874,804。

實(shí)施例6：合成6-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例5中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例5相同，得到淡黃色固體-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(185mg，0.38mmol)，其產(chǎn)率為80％。m.p.：240.2-241.3℃，hrms(c25h22clf2n5o)m/z[m+h]⁺:482.1547(計(jì)算值:482.1554)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.50(s,1h),8.51(s,1h),8.29(d,j＝14.4hz,1h),8.06(d,j＝2.6hz,1h),7.73(dd,j＝8.9,2.6hz,1h),7.47(dd,j＝14.4,7.2hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.25(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.15(m,2h),5.25(s,2h),3.12(t,j＝4.6hz,4h),2.89(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.18(d,j＝243.9hz),156.67,154.17,153.45(d,j＝248.0hz),149.32,148.16,145.85(d,j＝10.6hz),139.65(d,j＝7.4hz),133.51,130.49(d,j＝8.3hz),123.39,123.25(d,j＝2.6hz),121.53,121.03,114.69(d,j＝2.4hz),114.61(d,j＝14.6hz),114.30,113.97(d,j＝21.9hz),108.71(d,j＝9.0hz),108.13(d,j＝24.1hz),69.37,50.90,45.38；νmax(kbr)cm^-1:3265,3175,3088,3040,2947,2822,1628,1564,1502,1427,1238,1024,874,779。

實(shí)施例7：合成6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替換實(shí)施例5中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例5相同，得到白色固體6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(105mg，0.30mmol)，其產(chǎn)率為62.6％。m.p.：230.0-231.1℃，hrms(c20h18fn5)m/z[m+h]⁺:348.1618(計(jì)算值:348.1619)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.58(s,1h),8.56(s,1h),8.37(d,j＝14.5hz,1h),8.10-8.09(m,1h),7.92(d,j＝8.1hz,1h),7.39(t,j＝7.9hz,1h),7.20(d,j＝7.6,1h),7.18(d,j＝8.6hz,1h),4.20(s,1h),3.13(t,j＝4.6hz,4h),2.89(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.75(d,j＝3.4hz),154.09,153.52(d,j＝248.2hz),148.31,146.00(d,j＝10.6hz),139.74,128.84,126.33,124.41,122.20,121.70,114.61(d,j＝3.0hz),108.89(d,j＝8.8hz),108.38(d,j＝24.2hz),83.55,80.44,50.97,45.43；νmax(kbr)cm^-1:3420,3288,3042,2922,2841,2467,1626,1566,1502,1435,1242,897,789。

實(shí)施例8：合成6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例5中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例5相同，得到淡黃色固體6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(121mg，0.33mmol)，其產(chǎn)率為69.3％。m.p.：231.5-232.9℃，hrms(c21h22fn5)m/z[m+h]⁺:364.1931(計(jì)算值:364.1932)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.51(s,1h),8.52(s,1h),8.36(d,j＝14.5hz,1h),7.82(d,j＝8.3hz,2h),7.38(d,j＝8.3hz,2h),7.16(d,j＝8.5hz,1h),6.39(d,j＝15.7hz,1h),6.24(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.13(t,j＝4.6hz,4h),2.90(t,j＝4.6hz,4h),1.85(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.69(d,j＝3.8hz),154.24,153.46(d,j＝247.8hz),148.26,145.82(d,j＝10.5hz),138.10,132.57,130.45,125.71,124.07,121.72,114.68(d,j＝3.1hz),108.93(d,j＝8.9hz),108.25(d,j＝23.9hz),50.86,45.37,18.23；νmax(kbr)cm^-1:3435,3260,3170,3024,2916,2827,1626,1566,1518,1427,1240,1123,885,787。

實(shí)施例9：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

用等摩爾1-甲基哌嗪替換實(shí)施例5中的無水哌嗪，以甲醇與二氯甲烷體積比為1∶10的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，其他步驟與實(shí)施例5相同，得到淺黃色固體6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(136mg，0.35mmol)，其產(chǎn)率為72.9％。m.p.：257.9-259.4℃，hrms(c19h18clf2n5)m/z[m+h]⁺:390.1290(計(jì)算值:390.1292)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.57(s,1h),8.55(s,1h),8.29(d,j＝14.5hz,1h),8.22(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.42(t,j＝9.1hz,1h),7.18(d,j＝8.7hz,1h),3.22(t,j＝4.5hz,4h),2.53(t,j＝4.5hz,4h),2.26(s,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.52(d,j＝3.9hz),153.99,153.44(d,j＝248.4hz),153.07(d,j＝243.2hz),148.22,145.35(d,j＝10.6hz),136.66(d,j＝2.8hz),122.87,121.70(d,j＝6.7hz),118.74(d,j＝18.3hz),116.48(d,j＝21.6hz),114.86,108.79(d,j＝8.9hz),108.15(d,j＝24.0hz),54.31,49.43,45.61；νmax(kbr)cm^-1:3250,3165,3040,2945,2847,2791,1626,1566,1502,1431,1342,1242,1140,876。

實(shí)施例10：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩爾1-甲基哌嗪替換實(shí)施例6中的無水哌嗪，回流反應(yīng)時(shí)間延長至8h，以甲醇與二氯甲烷體積比為1∶10的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，其他步驟與實(shí)施例6相同，得到白色固體6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(211mg，0.42mmol)，其產(chǎn)率為87.5％。m.p.：213.5-214.9℃，hrms(c26h24clf2n5o)m/z[m+h]⁺:496.1702(計(jì)算值:496.1710)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.45(s,1h),8.51(s,1h),8.28(d,j＝14.6hz,1h),8.05(d,j＝2.6hz,1h),7.73(dd,j＝9.0,2.6hz,1h),7.47(dd,j＝14.0,7.6hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.24(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.16(m,2h),5.24(s,2h),3.22(t,j＝6.,7hz,4h),2.52(t,j＝6.7hz,4h),2.26(s,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.17(d,j＝243.9hz),156.67,156.54,154.21,153.39(d,j＝249.1hz),148.13,145.26(d,j＝10.7hz),139.65(d,j＝7.4hz),133.40,130.51(d,j＝8.3hz),123.42,123.27(d,j＝2.6hz),121.57,121.02,114.87(d,j＝3.5hz),114.65(d,j＝20.9hz),114.32,113.98(d,j＝22.0hz),108.81(d,j＝8.8hz),108.16(d,j＝24.1hz),69.36,54.33,49.46,45.64；νmax(kbr)cm-¹:3300,3105,2934,2824,1622,1566,1502,1425,1286,1234,1142,930,814。

實(shí)施例11：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩爾1-甲基哌嗪替換實(shí)施例7中的無水哌嗪，回流反應(yīng)時(shí)間延長至8h，以甲醇與二氯甲烷體積比為1∶10的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，其他步驟與實(shí)施例7相同，得到淡黃色固體6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(88mg，0.244mmol)，其產(chǎn)率為50.8％。m.p.：231.5-232.4℃，hrms(c21h20fn5)m/z[m+h]⁺:362.1774(計(jì)算值:362.1776)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.64(s,1h),8.57(s,1h),8.35(d,j＝14.5hz,1h),8.11-8.10(m,1h),7.93(dd,j＝8.2,1.2hz,1h),7.40(t,j＝7.9hz,1h),7.21(dt,j＝7.6,1.2hz,1h),7.19(d,j＝8.7hz,1h),4.20(s,1h),3.22(t,j＝4.6hz,4h),2.52(t,j＝4.6hz,4h),2.25(s,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.67(d,j＝3.9hz),154.25,153.42(d,j＝248.3hz),148.25,145.33(d,j＝10.7hz),139.65,128.87,126.36,124.35,122.12,121.73,114.85(d,j＝3.2hz),108.93(d,j＝8.9hz),108.24(d,j＝24.0hz),85.53,80.49,54.32,49.41,45.63；νmax(kbr)cm-¹:3293,3204,3044,2941,2814,1632,1562,1508,1431,1242,1144,893,787。

實(shí)施例12：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩爾1-甲基哌嗪替換實(shí)施例8中的無水哌嗪，回流反應(yīng)時(shí)間延長至10h，以甲醇與二氯甲烷體積比為1∶10的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，其他其他步驟與實(shí)施例8相同，得到淡黃色固體6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(88mg，0.234mmol)，其產(chǎn)率為48.8％。m.p.：241.1-241.9℃，hrms(c22h24fn5)m/z[m+h]⁺:378.2088(計(jì)算值:378.2089)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.57(s,1h),8.51(s,1h),8.39(d,j＝14.5hz,1h),7.83(d,j＝8.4hz,2h),7.37(d,j＝8.4hz,2h),7.17(d,j＝8.7hz,1h),6.39(d,j＝15.7hz,1h),6.23(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.38(t,j＝4.5hz,4h),3.20(t,j＝4.5hz,4h),2.24(s,3h),1.85(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.70(d,j＝4.5hz),154.26,153.39(d,j＝243.1hz),148.21,145.20(d,j＝10.6hz),138.13,132.55,130.46,125.69,124.05,121.74,114.84,109.06(d,j＝8.9hz),108.36(d,j＝24.1hz),54.36,49.49,45.68,18.24；νmax(kbr)cm^-1:3248,3163,3030,2930,2845,2791,1626,1564,1518,1429,1246,1142,895,785。

實(shí)施例13：合成6-氟-7-嗎啉基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

將6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(155mg，0.50mmol)、嗎啉(436mg，5.00mmol)、二異丙基乙基胺(71mg，0.55mmol)溶于正丁醇(5ml)中，130℃回流反應(yīng)5h，向反應(yīng)液中加入3mlh2o，振蕩后分液，除去水層，將有機(jī)層蒸除溶劑，以乙酸乙酯與石油醚體積比為1:1的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，得到淡黃色固體6-氟-7-嗎啉基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(130mg，0.35mmol)，其產(chǎn)率為70.0％。m.p.：254.8-256.4℃，hrms(c18h15clf2n4o)m/z[m+h]⁺:377.0975(計(jì)算值:377.0975)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.61(s,1h),8.59(s,1h),8.32(d,j＝14.4hz,1h),8.24(dd,j＝6.8,2.6hz,1h),7.86-7.83(m,1h),7.45(t,j＝9.1hz,1h),7.22(d,j＝8.6hz,1h),3.83(t,j＝4.6hz,4h),3.23(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.53(d,j＝4.0hz),154.04(d,j＝0.76hz),153.40(d,j＝248.4hz),153.09(d,j＝242.9hz),148.17,145.30(d,j＝10.5hz),136.60,122.90,121.73(d,j＝6.6hz),118.70(d,j＝18.4hz),116.50(d,j＝21.6hz),114.75,108.96(d,j＝8.9hz),108.23(d,j＝24.0hz),65.90(s),49.95；νmax(kbr)cm^-1:3260,3173,3042,2970,2845,1628,1566,1502,1427,1240,1119,935,812。

實(shí)施例14：合成6-氟-7-嗎啉基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例13中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，回流反應(yīng)時(shí)間延長至7h，以乙酸乙酯與石油醚體積比為2:1的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，其他步驟與實(shí)施例13相同，得到淡黃色固體6-氟-7-嗎啉基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(187mg，0.39mmol)，其產(chǎn)率為78.0％。m.p.:239.9-240.8℃，hrms(c25h21clf2n4o2)m/z[m+h]⁺:483.1384(計(jì)算值:483.1394)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.54(s,1h),8.56(s,1h),8.34(d,j＝14.5hz,1h),8.10(d,j＝2.5hz,1h),7.76(dd,j＝8.9,2.5hz,1h),7.51(dd,j＝14.0,7.8hz,1h),7.33-7.30(m,2h),7.23(d,j＝8.9hz,1h),7.19-7.15(m,2h),5.28(s,2h),3.79(t,j＝4.4hz,4h),3.18(t,j＝4.4hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.17(d,j＝243.9hz),156.61(d,j＝3.8hz),154.20(d,j＝9.7hz),152.35(d,j＝239.5hz),149.32,148.06,145.07(d,j＝10.7hz),139.63(d,j＝7.5hz),133.40,130.47(d,j＝8.3hz),123.38,123.22,121.50,121.02,114.87(d,j＝3.4hz),114.62(d,j＝21.0hz),114.21,113.94(d,j＝21.9hz),109.00(d,j＝8.9hz),108.21(d,j＝23.9hz),69.34,65.90,49.94；νmax(kbr)cm^-1:3254,3165,3040,2961,2851,1624,1506,1429,1238,1122,1022,878,798。

實(shí)施例15：合成4-(3-乙炔基苯氨基)-6-氟-7-嗎啉基喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替換實(shí)施例14中的6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉，回流反應(yīng)時(shí)間延長至10h，其他步驟與實(shí)施例14相同，得到淡黃色固體6-氟-7-嗎啉基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(164mg，0.47mmol)，其產(chǎn)率為94.7％。m.p.:254.3-256.1℃，hrms(c20h17fn4o)m/z[m+h]⁺:349.1459(計(jì)算值:349.1459)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.58(s,1h),8.58(s,1h),8.37(d,j＝14.5hz,1h),8.13-8.12(m,1h),7.94(d,j＝8.0hz,1h),7.42(t,j＝8.0hz,1h),7.24(d,j＝7.6hz,1h),7.21(d,j＝8.6hz,1h),4.24(s),3.82(t,j＝4.4hz,4h),3.22(t,j＝4.4hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.70,154.12,153.39(d,j＝248.3hz),148.17,145.22(d,j＝10.6hz),139.59,128.88,126.62,124.39,122.16,121.73,114.70(d,j＝3.4hz),109.10(d,j＝9.0hz),108.34(d,j＝24.0hz),83.51,80.50,65.90,49.92；νmax(kbr)cm^-1:3398,3288,3036,2972,2851,1627,1564,1433,1228,1101,897,788。

實(shí)施例16：合成6-氟-7-嗎啉基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例14中的6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉，回流反應(yīng)時(shí)間縮短至5h，其他步驟與實(shí)施例14相同，得到淡黃色固體6-氟-7-嗎啉基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(108mg，0.30mmol)，其產(chǎn)率為59.3％。m.p.：244.3-245.2℃，hrms(c21h21fn4o)m/z[m+h]⁺:365.1772(計(jì)算值:365.1772)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.55(s,1h),8.56(s,1h),8.41(d,j＝14.4hz,1h),7.85(d,j＝8.1hz,2h),7.42(d,j＝8.1hz,2h),7.24(d,j＝8.4hz,1h),6.44(d,j＝15.7hz,1h),6.29(dq,j＝15.7,6.2hz,1h),3.84(t,j＝4.5hz,4h),3.25(t,j＝4.5hz,4h),1.89(d,j＝6.2hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.71(d,j＝4.4hz),154.32,153.35(d,j＝248.5hz),148.15,145.13(d,j＝11.1hz),137.93,132.64,130.41,125.72,124.17,121.78,114.77,109.18(d,j＝7.6hz),108.37(d,j＝24.5hz),65.91,49.98,18.25；νmax(kbr)cm^-1:3250,3163,3030,2963,2849,1626,1564,1518,1427,1244,1119,932,789。

實(shí)施例17：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

將6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(155mg，0.50mmol)、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪(79mg，0.55mmol)、二異丙基乙基胺(71mg，0.55mmol)溶于正丁醇(5ml)中，130℃回流反應(yīng)24h，將反應(yīng)液蒸除溶劑，以甲醇與二氯甲烷體積比為1:10的混合液為展開劑進(jìn)行柱色譜分離，得到白色固體6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(125mg，0..29mmol)，其產(chǎn)率為57.5％。m.p.：235.5-236.7℃，hrms(c21h22clf2n5o)m/z[m+h]⁺:434.1553(計(jì)算值:434.1554)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.57(s,1h),8.55(s,1h),8.27(d,j＝14.4hz,1h),8.21(dd,j＝6.7,2.5hz,1h),7.82-7.80(m,1h),7.41(t,j＝9.1hz,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),3.48(t,j＝5.6hz,2h),3.26(s,1h),3.20(t,j＝4.8hz,4h),2.64(t,j＝4.8hz,4h),2.57(t,j＝5.6hz,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.48(d,j＝3.6hz),153.96,153.42(d,j＝248.4hz),153.05(d,j＝243.1hz),148.17,145.29(d,j＝10.9hz),136.64(d,j＝2.7hz),122.82,121.65(d,j＝6.8hz),118.73(d,j＝18.4hz),116.46(d,j＝21.6hz),114.78(d,j＝3.3hz),108.77(d,j＝8.7hz),108.11(d,j＝24.2hz),69.74,57.98,56.87,52.75,49.44；νmax(kbr)cm^-1:3302,3044,2914,2827,1626,1566,1502,1425,1240,1113,872,814。

實(shí)施例18：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例17中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例17相同，得到淡黃色固體6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(169mg，0.29mmol)，其產(chǎn)率為58.3％。m.p.：201.8-203.2℃，hrms(c28h28clf2n5o2)m/z[m+h]⁺:540.1963(計(jì)算值:540.1972)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.52(s,1h),8.52(s,1h),8.30(d,j＝14.5hz,1h),8.07(d,j＝2.5hz,1h),7.74(dd,j＝9.0,2.5hz,1h),7.47(dd,j＝14.0,7.9hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.25(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.16(m,2h),5.24(s,2h),3.49(t,j＝5.7hz,2h),3.26(s,3h),3.21(t,j＝4.8hz,4h),2.65(t,j＝4.8hz,4h),2.59(t,j＝5.7hz,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.17(d,j＝243.9hz),156.62(d,j＝3.6hz),154.17,153.35(d,j＝247.9hz),149.31,148.09,145.16(d,j＝10.9hz),139.64(d,j＝7.5hz),133.43,130.48(d,j＝8.3hz),123.38,123.22(d,j＝2.6hz),121.51,121.01,114.79(d,j＝3.1hz),114.62(d,j＝20.9hz),114.24,113.94(d,j＝21.9hz),108.83(d,j＝8.9hz),108.16(d,j＝24.1hz),69.72,69.35,57.98,56.84,52.75,49.47；νmax(kbr)cm^-1:3252,3165,3084,3042,2924,2812,1626,1566,1502,1429,1236,1113,876,791。

實(shí)施例19：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替換實(shí)施例17中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例17相同，得到淡黃色固體6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(94mg，0.23mmol)，其產(chǎn)率為46.5％。m.p.：198.6-199.8℃，hrms(c23h24fn5o)m/z[m+h]⁺:406.2040(計(jì)算值:406.2038)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.58(s,1h),8.57(s,1h),8.37(d,j＝14.5hz,1h),8.12-8.11(m,1h),7.94(d,j＝9.1hz,1h),7.40(t,j＝7.9hz,1h),7.22(d,j＝7.6hz,1h),7.19(d,j＝8.7hz,1h),4.22(s,1h),3.50(t,j＝5.5hz,2h),3.27(s,3h),3.23(t,j＝4.5hz,4h),2.67(t,j＝4.5hz,4h),2.60(t,j＝5.5hz,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.70(d,j＝3.8hz),154.10,153.41(d,j＝248.2hz),148.24,145.23(d,j＝10.7hz),139.66,128.84,126.36,124.38,122.14,121.73,114.81(d,j＝3.1hz),108.98(d,j＝8.9hz),108.29(d,j＝24.1hz),83.51,80.43,69.63,57.99,56.81,52.71,49.39；νmax(kbr)cm^-1:3275,3049,2924,2814,1626,1562,1502,1435,1240,1113,885,789。

實(shí)施例20：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例17中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例17相同，得到黃色固體6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(70mg，0.17mmol)，其產(chǎn)率為33.2％。m.p.：218.2-219.5℃，hrms(c24h28fn5o)m/z[m+h]⁺:422.2350(計(jì)算值:422.2351)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.51(s,1h),8.52(s,1h),8.36(d,j＝14.5hz,1h),7.82(d,j＝8.5hz,2h),7.38(d,j＝8.5hz,2h),7.18(d,j＝8.7hz,1h),6.39(d,j＝15.7hz,1h),6.24(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.48(t,j＝5.7hz),3.26(s,3h),3.21(t,j＝4.5hz,4h),2.63(t,j＝4.5hz,4h),2.56(t,j＝5.7hz,2h),1.85(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.67(d,j＝3.1hz),154.26,153.38(d,j＝247.9hz),148.21,145.22(d,j＝10.8hz),138.06,132.56,130.44,125.71,124.08,121.71,114.82,109.01(d,j＝8.7hz),108.25(d,j＝24.0hz),69.87,57.99,56.93,52.84,49.58,18.26；νmax(kbr)cm^-1:3342,3190,3022,2885,2824,1626,1564,1514,1423,1238,1113,957,843,783。

實(shí)施例21：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

將無水哌嗪(300mg，3.48mmol)、二乙氨基氯乙烷鹽酸鹽(599mg，3.48mmol)溶于無水乙醇(6ml)中，60℃下加熱反應(yīng)1h。蒸除溶劑后加入6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(155mg，0.50mmol)、二異丙基乙基胺(129mg，1.00mmol)、正丁醇(6ml)，130℃下回流反應(yīng)24h。將反應(yīng)液蒸除溶劑，以甲醇與二氯甲烷體積比為1:4的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，得到淡黃色固體6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(110mg，0.23mmol)，其產(chǎn)率為46.3％。m.p.：226.3-227.8℃，hrms(c24h29clf2n6)m/z[m+h]⁺:475.2189(計(jì)算值:475.2183)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.62(s,1h),8.55(s,1h),8.31(d,j＝14.5hz,1h),8.23(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.43(t,j＝9.1hz,1h),7.18(d,j＝8.7hz,1h),3.20(t,j＝4.6hz,4h),2.60(t,j＝4.6hz,4h),2.56(t,j＝7.0hz,2h),2.49(q,j＝7.1hz,4h),2.44(t,j＝7.0hz,2h),0.97(t,j＝7.1hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.55(d,j＝4.0hz),154.02,153.45(d,j＝248.6hz),153.08(d,j＝243.1hz),148.23,145.40(d,j＝10.7hz),136.66(d,j＝2.7hz),122.90,121.75(d,j＝6.8hz),118.74(d,j＝18.3hz),116.52(d,j＝21.5hz),114.79(d,j＝3.4hz),108.77(d,j＝8.8hz),108.18(d,j＝24.1hz),55.81,52.86,49.87,49.59,46.74,11.65；νmax(kbr)cm^-1:3300,3123,3038,2963,2816,1624,1566,1502,1425,1238,1136,900,818。

實(shí)施例22：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例21中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例21相同，得到黃色固體6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(151mg，0.26mmol)，其產(chǎn)率為51.9％。m.p.：216.8-218.4℃，hrms(c31h35clf2n6o)m/z[m+h]⁺:581.2596(計(jì)算值:581.2602)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.91(s,1h),8.59(d,j＝14.5hz,1h),8.50(s,1h),8.14(s,1h),7.82(d,j＝9.0hz,1h),7.47(dd,j＝14.1,7.5hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.25(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.15(m,2h),5.25(s,2h),3.19(t,j＝4.5hz,4h),2.60(t,j＝4.5hz,4h),2.54(t,j＝6.9hz,2h),2.47(q,j＝7.0hz,4h),2.43(t,j＝6.9hz,2h),0.95(t,j＝7.0hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.16(d,j＝243.9hz),156.79(d,j＝4.1hz),154.20,153.32(d,j＝248.2hz),149.25,148.15,145.26(d,j＝10.6hz),139.70(d,j＝7.5hz),133.58,130.52(d,j＝8.2hz),123.49,123.28(d,j＝2.6hz),121.72,120.88,114.69(d,j＝4.1hz),114.61(d,j＝13.7hz),114.26,113.96(d,j＝18.3hz),108.93(d,j＝9.7hz),108.80(d,j＝24.0hz),69.36,55.96,52.90,49.97,49.63,46.73,11.82；νmax(kbr)cm^-1:3303,3045,2964,2824,1624,1568,1504,1429,1235,1138,872,787。

實(shí)施例23：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替換實(shí)施例21中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例21相同，得到黃色固體6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(109mg，0.245mmol)，其產(chǎn)率為49.0％。m.p.：205.8-207.6℃，hrms(c26h31fn6)m/z[m+h]⁺:447.2671(計(jì)算值:447.2667)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.92(s,1h),8.63(d,j＝14.6hz,1h),8.54(s,1h),8.16-8.15(m,1h),8.00(d,j＝8.0hz,1h),7.37(t,j＝8.0hz,1h),7.18(d,j＝7.5hz,2h),4.16(s,1h),3.21(t,j＝4.5hz,4h),2.61(t,j＝4.5hz,4h),2.54(t,j＝7.0hz,2h),2.48(q,j＝7.1hz,4h),2.44(t,j＝7.0hz,2h),0.96(t,j＝7.1hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.85(d,j＝4.6hz),154.11,153.38(d,j＝248.1hz),148.30,145.36(d,j＝10.9hz),139.80,128.74,126.29,124.51,122.35,121.61,114.66(d,j＝3.1hz),109.06(d,j＝8.9hz),108.89(d,j＝24.4hz),83.58,80.45,56.02,52.90,49.98,49.63,46.74,11.82；νmax(kbr)cm^-1:3310,3269,3049,2963,2806,1626,1560,1502,1433,1242,1134,885,785。

實(shí)施例24：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例21中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例21相同，得到黃色固體6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(127mg，0.274mmol)，其產(chǎn)率為54.8％。m.p.：243.0-244.4℃，hrms(c27h35fn6)m/z[m+h]⁺:463.2980(計(jì)算值:463.2980)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.69(s,1h),8.50(s,1h),8.49(d,j＝14.5hz,1h),7.85(d,j＝8.5hz,2h),7.37(d,j＝8.5hz,2h),7.17(d,j＝8.7hz,1h),6.40(d,j＝15.6hz,1h),6.24(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.20(t,j＝4.5hz,4h),2.61(t,j＝4.5hz,4h),2.54(t,j＝7.0hz,2h),2.48(t,j＝7.1hz,4h),2.43(t,j＝7.0hz,2h),1.85(d,j＝6.5hz,3h),0.96(t,j＝7.1hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.76(d,j＝3.6hz),154.26,153.35(d,j＝248.1hz),148.20,145.24(d,j＝10.8hz),138.12,132.55,130.46,125.66,124.08,121.83,114.67(d,j＝4.9hz),109.05(d,j＝8.9hz),108.57(d,j＝24.4hz),56.00,52.91,49.96,49.63,46.74,18.24,11.80；νmax(kbr)cm^-1:3306,3030,2926,2818,1624,1566,1516,1425,1238,1113,962,851,785。

實(shí)施例25：合成6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

將6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(150mg，0.40mmol)、三乙胺(49mg，0.48mmol)溶于二氯甲烷(9ml)中，在冰浴下滴加丙烯酰氯(36mg，0.40mmol)，滴加完后攪拌30min。將反應(yīng)液蒸除溶劑，以甲醇與二氯甲烷體積比為1:15的混合液為流動相進(jìn)行柱色譜分離，得到淡黃色固體6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(102mg，0.24mmol)，其產(chǎn)率為59.4％。m.p.：252.3-253.5℃，hrms(c21h18clf2n5o)m/z[m+h]⁺:430.1245(計(jì)算值:430.1241)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.62(s,1h),8.57(s,1h),8.34(d,j＝14.3hz,1h),8.22(dd,j＝6.8,2.6hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.44(t,j＝9.1hz,1h),7.23(d,j＝8.6hz,1h),6.87(dd,j＝16.7,10.5hz,1h),6.17(dd,j＝16.7,2.3hz,1h),5.74(dd,j＝10.5,2.3hz,1h),3.79(s,2h),3.75(s,2h),3.24(s,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.32,156.60(d,j＝3.9hz),154.11,153.37(d,j＝248.4hz),153.14(d,j＝243.0hz),148.17,145.02(d,j＝10.7hz),136.61,128.06,127.59,122.95,121.83(d,j＝6.8hz),118.78(d,j＝18.4hz),116.56(d,j＝21.7hz),115.26(d,j＝2.7hz),109.09(d,j＝9.0hz),108.29(d,j＝24.2hz),49.97,49.44,44.78,41.16；νmax(kbr)cm^-1:3439,3319,3042,2926,1636,1574,1504,1431,1234,868,800,546。

實(shí)施例26：合成6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例25中的6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例25相同，得到白色固體6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-[3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯氨基]喹唑啉(116mg，0.22mmol)，其產(chǎn)率為53.9％。m.p.：246.8-247.7℃，hrms(c28h24clf2n5o2)m/z[m+h]⁺:536.1662(計(jì)算值:536.1659)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.51(s,1h),8.52(s,1h),8.31(d,j＝13.9hz,1h),,8.05(s,1h),7.72(d,j＝7.7hz,1h),7.47(dd,j＝14.1,7.5hz,1h),7.33-7.30(m,2h),7.25(d,j＝8.3hz,1h),7.21-7.16(m,2h),6.85(dd,j＝16.4,10.2hz,1h),6.17(d,j＝16.4hz,1h),5.73(d,j＝10.2hz,1h),5.24(s,2h),3.77(s,2h),3.75(s,2h),3.23(s,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.35,162.18(d,j＝243.9hz),156.69(d,j＝2.0hz),154.27,153.29(d,j＝247.9hz),149.42,148.07,144.85(d,j＝10.6hz),139.64(d,j＝7.4hz),133.38,130.50(d,j＝8.6hz),128.04,127.56,123.47,123.25(d,j＝1.9hz),121.62,121.08,115.24,114.63(d,j＝21.1hz),114.38,113.96(d,j＝22.3hz),109.11(d,j＝9.1hz),108.25(d,j＝23.6hz),69.56,49.99,49.45,44.81,41.17；νmax(kbr)cm^-1:3447,3337,3044,2920,1636,1576,1502,1429,1229,1015,937,868,789。

實(shí)施例27：合成6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(27)

用等摩爾6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替換實(shí)施例25中的6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例25相同，得到白色固體6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(53mg，0.13mmol)，其產(chǎn)率為32.9％。m.p.：229.5-230.9℃，hrms(c23h20fn5o)m/z[m+h]⁺:402.1724(計(jì)算值:402.1725)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.56(s,1h),8.58(s,1h),8.38(d,j＝14.3hz,1h),,8.10-8.09(m,1h),7.92(d,j＝8.0hz,1h),7.40(t,j＝7.9hz,1h),7.23(d,j＝8.0hz,1h),7.22(d,j＝6.8hz,1h),6.87(dd,j＝16.6,10.5hz,1h),6.18(dd,j＝16.6,1.6hz,1h),5.74(dd,j＝10.5,1.6hz,1h),4.21(s,1h),3.79(s,2h),3.76(s,2h),3.24(s,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.31,156.72(d,j＝3.9hz),154.19,153.36(d,j＝250.4hz),148.20,144.96(d,j＝10.9hz),139.60,128.89,128.05,127.59,126.43,124.40,122.17,121.75,115.26(d,j＝3.0hz),109.24(d,j＝8.8hz),108.35(d,j＝24.2hz),83.50,80.50,49.97,49.44,44.79,41.17；νmax(kbr)cm^-1:3339,3252,3032,2924,2812,1632,1593,1566,1502,1431,1238,1018,883,785,648.。

實(shí)施例28：合成6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩爾6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替換實(shí)施例25中的6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步驟與實(shí)施例25相同，得到淡黃色固體6-氟-7-(1-丙烯?；哙夯?-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(68mg，0.16mmol)，其產(chǎn)率為40.6％。m.p.：256.8-257.9℃，hrms(c24h24fn5o)m/z[m+h]⁺:418.2038(計(jì)算值:418.2038)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.52(s,1h),8.52(s,1h),8.38(d,j＝14.3hz,1h),7.82(d,j＝8.1hz,2h),7.38(d,j＝8.1hz,2h),7.21(d,j＝8.4hz,1h),6.86(dd,j＝16.5,10.5hz,1h),6.39(d,j＝15.6hz,1h),6.24(dq,j＝15.6,6.0hz,1h),6.17(d,j＝16.5hz,1h),5.74(d,j＝10.5,1h),3.78(s,2h),3.75(s,2h),3.23(s,4h),1.85(d,j＝6.0hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.32,156.72(d,j＝3.3hz),154.34,153.30(d,j＝247.9hz),148.16,144.83(d,j＝11.0hz),137.99,132.66,130.44,128.05,127.59,125.73,124.15,121.77,115.27(d,j＝3.5hz),109.32(d,j＝9.1hz),108.37(d,j＝23.5hz),49.99,49.47,44.81,40.97,18.27；νmax(kbr)cm^-1:3360,3032,2905,2843,1632,1595,1514,1420,1385,1232,1015,962,859,783,517。

實(shí)施例29：化合物1～28對腫瘤細(xì)胞的生長抑制實(shí)驗(yàn)

1、細(xì)胞株

人皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株a431、人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株a549、人結(jié)腸癌細(xì)胞株sw480，人肺癌細(xì)胞株nci-h1975(egfrt790m/l858r雙突變)均購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。

2、試劑和材料

mtt(mpbio)、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(costar)、胎牛血清(gibco)、培養(yǎng)基(gibco)、酶標(biāo)儀(perkinelmerenspire)。

3、實(shí)驗(yàn)步驟

化合物1～28對腫瘤細(xì)胞的生長抑制活性利用mtt法進(jìn)行測定。分別取對數(shù)生長期的人腫瘤細(xì)胞sw480、a549、a431、nci-h1975，用0.25％的胰蛋白酶消化液消化、離心、重懸后計(jì)數(shù)，制備細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為2×10⁴～5×10⁴個/ml。取細(xì)胞懸液接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中(100μl/孔)，置飽和濕度、37℃和5％co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。用培養(yǎng)基稀釋受試化合物至所需濃度，加入已接種人腫瘤細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中(100μl/孔)，dmso終濃度為0.5％，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。將mtt加入96孔板中(20μl/孔)，培養(yǎng)箱中反應(yīng)4h。吸棄孔內(nèi)液體，加入dmso(150μl/孔)，搖床上震蕩10min，使甲臜完全溶解。然后用酶標(biāo)儀測定570nm波長處的吸光度(od570)，630nm波長處的吸光度(od630)作為參比，以相應(yīng)溶劑作為對照，計(jì)算細(xì)胞生長抑制率。

受試化合物對腫瘤細(xì)胞生長抑制率的計(jì)算方式如下：

腫瘤細(xì)胞生長抑制率％＝[1-(ods-odnc)/(odpc-odnc)]×100％

其中：ods表示樣品孔的吸光度值(細(xì)胞+待測化合物+mtt)；odpc表示對照孔的吸光度值(細(xì)胞+dmso+mtt)；odnc表示調(diào)零孔的吸光度值(培養(yǎng)基+dmso+mtt)；ods＝od570s-od630s；odpc＝od570pc-od630pc；odnc＝od570nc-od630nc。

受試化合物對腫瘤細(xì)胞生長抑制曲線的擬合及ic50的計(jì)算：

采用graphpadprism5擬合受試化合物對腫瘤細(xì)胞生長的抑制曲線，并得出ic50值。每組設(shè)置3個復(fù)孔，實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3次。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

以臨床使用的抗腫瘤藥物吉非替尼(gefitinib)和拉帕替尼(lapatinib)為陽性對照，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

表1受試化合物抑制腫瘤細(xì)胞增殖的ic50(μmol/l)

由表1中實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可見，大部分受試化合物對5種腫瘤細(xì)胞株的增殖都具有很好的抑制作用，其中一些化合物的效果明顯優(yōu)于臨床抗腫瘤藥物gefitinib和lapatinib。