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一種從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法與流程

文檔序號:12778866閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟如下:

1)取新鮮馬血,加入混合緩沖提取液,在4℃冰浴、100-200rpm的轉(zhuǎn)速下攪拌混合15-20min,獲得第一混合液;

2)將第一混合液在0-4℃下靜置12-24小時,獲得第二混合液;

3)將第二混合液在4℃冰浴、300-400rpm的轉(zhuǎn)速下勻漿8-12min,獲得第三混合液;

4)將第三混合液在4℃、7500-8000rpm的條件下冷凍離心23-28min,取上清液,獲得第四混合液;

5)采用Procainamide親和層析法對第四混合液進行純化處理,獲得初次純化物;

6)采用SephadexG-200凝膠柱對初次純化物進行純化處理,獲得最終純化物;

7)將最終純化物濃縮,干燥,即得產(chǎn)品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟1)中,所述混合緩沖提取液的加入量為所用的新鮮馬血體積的3-5倍。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟1)中,所述混合緩沖提取液中含有質(zhì)量百分比為0.5-0.8%的聚乙二醇辛基苯基醚,余量為磷酸鹽緩沖液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟1)中,所述混合緩沖提取液的pH為7.2-7.6。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟5)中,體系pH為7.3。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟6)中,體系pH為7.5。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的從馬血中提取乙酰膽堿酯酶的方法,其特征在于,步驟7)中,采用透析法于4℃下濃縮最終純化物,然后進行真空冷凍干燥。

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