1.一種檢測(cè)豬偽狂犬病毒的成套引物,包括如下引物對(duì):
所述引物對(duì)由序列表中序列1所示的單鏈DNA分子和序列表中序列2所示的單鏈DNA分子組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的成套引物,其特征在于:所述引物對(duì)中的一條引物末端生物素標(biāo)記。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的成套引物,其特征在于:所述成套引物還包括核苷酸序列為序列表中序列3的測(cè)序引物。
4.含有權(quán)利要求1-3任一所述成套引物的成套PCR試劑或含有所述成套引物或所述成套PCR試劑的試劑盒;
或序列4第81-135位所示的DNA分子。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的成套PCR試劑,其特征在于:
所述成套PCR試劑由PCR試劑1和PCR試劑2組成;
所述PCR試劑1為含有權(quán)利要求1-3任一所述成套引物中所述引物對(duì)的試劑;
或,所述引物對(duì)中每條引物在所述PCR試劑1中的濃度為20μM;
所述PCR試劑2為含有權(quán)利要求1-3任一所述成套引物中所述測(cè)序引物的試劑;
或,所述測(cè)序引物在所述PCR試劑2中的濃度為0.3μM。
6.權(quán)利要求1-3任一所述成套引物或權(quán)利要求4所述的成套PCR試劑或試劑盒或序列4第81-135位所示的DNA分子在檢測(cè)或輔助檢測(cè)豬偽狂犬病毒中的應(yīng)用;
或,權(quán)利要求1-3任一所述成套引物或權(quán)利要求4所述的成套PCR試劑或試劑盒或序列4第81-135位所示的DNA分子在制備檢測(cè)或輔助檢測(cè)豬偽狂犬病毒產(chǎn)品中的應(yīng)用;
或,權(quán)利要求1-3任一所述成套引物或權(quán)利要求4所述的成套PCR試劑或試劑盒或序列4第81-135位所示的DNA分子在檢測(cè)或輔助檢測(cè)待測(cè)樣本中是否含有豬偽狂犬病毒中的應(yīng)用;
或,權(quán)利要求1-3任一所述成套引物或權(quán)利要求4所述的成套PCR試劑或試劑盒或序列4第81-135位所示的DNA分子在制備檢測(cè)或輔助檢測(cè)待測(cè)樣本中是否含有豬偽狂犬病毒產(chǎn)品中的應(yīng)用。
7.一種檢測(cè)或輔助檢測(cè)待測(cè)樣本中是否含有豬偽狂犬病毒的方法,包括如下步驟:
1)用序列表中序列1所示的單鏈DNA分子和序列表中序列2所示的單鏈DNA分子組成的引物對(duì)對(duì)待測(cè)樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
2)用核苷酸序列為序列表中序列3的測(cè)序引物對(duì)所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行焦磷酸測(cè)序,得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果;
若所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與序列4第81-135位所示的DNA分子的同源性大于等于80%,則所述待測(cè)樣本中含有或候選含有豬偽狂犬病病毒,若所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與序列4第81-135位所示的DNA分子的同源性小于80%,則所述待測(cè)樣本中不含有或不候選含有豬偽狂犬病病毒。
8.一種檢測(cè)或輔助檢測(cè)待測(cè)樣本中是否含有豬偽狂犬病毒的方法,包括如下步驟:
檢測(cè)待測(cè)樣本的核酸中是否含有序列4第81-135位所示的DNA分子或與其同源性大于等于80%的DNA分子,若含有,則所述待測(cè)樣本含有或候選含有豬偽狂犬病毒,若不含有,則所述待測(cè)樣本不含有或候選不含有豬偽狂犬病毒。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于:所述檢測(cè)待測(cè)樣本的核酸中是否含有序列4第81-135位所示的DNA分子或與其同源性大于等于80%的DNA分子的方法包括如下步驟:權(quán)利要求7的步驟1)和步驟2),得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果,分析所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果是否含有序列4第81-135位所示的DNA分子。
10.根據(jù)權(quán)利要求7-9中任一所述的方法,其特征在于:
所述PCR擴(kuò)增的退火溫度為55℃,退火時(shí)間為30S;
或,所述PCR擴(kuò)增的模板為所述待測(cè)樣本的核酸。