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一種抗大棚蔬菜灰霉枯草芽孢桿菌的篩選和菌劑制備方法與流程

文檔序號(hào):12644495閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種抗大棚蔬菜灰霉枯草芽孢桿菌的篩選和菌劑制備方法。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述大棚蔬菜灰霉的篩選和孢子制備:將大棚蔬菜土壤或蔬菜根置于100-500ml無(wú)菌水中,室溫下150-250rpm震蕩1-3h,用無(wú)菌水稀釋至10-1-10-8八個(gè)梯度,然后接種于PDA固體培養(yǎng)基,27℃培養(yǎng)5-8天,用無(wú)菌水將孢子沖洗下來(lái),用無(wú)菌紗布過(guò)濾,得到孢子懸液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述抗大棚蔬菜灰霉枯草芽孢桿菌篩選:將大棚蔬菜土壤或蔬菜根置于100-500ml無(wú)菌水中,室溫下150-250rpm震蕩1-3h,用無(wú)菌水稀釋至10-1-10-8八個(gè)梯度,涂布于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,在25-35℃培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)24-48h,將細(xì)菌置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述抗大棚蔬菜灰霉枯草芽孢桿菌的16SRNA基因序列如SEQ ID NO:1所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述抗大棚蔬菜灰霉枯草芽孢桿菌篩選:將根據(jù)權(quán)利要求2制備的灰霉孢子懸液涂布在PDA固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)12-36h后,在平板中央放入紙碟,紙碟上加入25μl根據(jù)權(quán)利要求3制備的細(xì)菌懸浮液,30℃培養(yǎng),觀察并測(cè)定抑菌圈的大小。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述抗大棚蔬菜灰霉枯草芽孢桿菌菌劑制備方法:菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基:胰蛋白胨:10-20g/L,酵母提取物:10-20g/L,氯化鈉:5-10g/L,轉(zhuǎn)速200-300rpm,溫度25-35℃,培養(yǎng)12-24h。

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