1.一種沙門氏菌的檢測試劑盒,其特征在于,包括氯高鐵血紅素、雜交緩沖液、顯色緩沖液體系、核酸內切酶和下列核酸序列:
核酸序列H1:依次具有A、B、C區(qū)域,其中A區(qū)是沙門氏菌的核酸適體,C與A部分互補形成莖環(huán)結構的莖部分,A與C不互補的序列凸起于莖環(huán)結構外側,B構成莖環(huán)結構的環(huán)部分,B中包含一段與H2的H區(qū)互補配對的核酸序列;
核酸序列H2:依次具有D、F、H、G、E區(qū)域,其中D和E區(qū)域互補形成莖環(huán)結構的莖部分,F(xiàn)和G區(qū)域是富含G堿基的序列,H區(qū)域為核酸內切酶的識別位點序列;H區(qū)域與H1的B區(qū)域部分核酸序列互補,形成部分雙鏈DNA。
2.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:A區(qū)的核酸序列為 3'-TGATGGCTGTAGTGTTTCCGGGTTATCACTAGTTTGGTGGCACCAATGTCAGTCTCCTC-5'。
3.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:B區(qū)的堿基數(shù)為7-15個,C區(qū)的堿基數(shù)6-10個,D和E區(qū)的堿基數(shù)為5-10個。
4.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:F和G區(qū)域包含有四組GGG序列,各組GGG序列中間隔1-3個非G堿基。
5.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:核酸內切酶包括Nt.BbvCI、Bmtl、BseYI 、BstUI 。
6.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:當核酸內切酶為Nt.BbvCI時,H2的H區(qū)域的核酸序列為5'-CCTCAGC-3',H1的B區(qū)域中包含一段與之互補的5'-GCTGAGG-3'序列。
7.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:當核酸內切酶為Bmtl時,H2的H區(qū)域的核酸序列為5'-GCTAGC-3',H1的B區(qū)域中包含一段與之互補的5'-GCTAGC-3'序列。
8.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于:顯色緩沖液體系由顯色緩沖液、底物以及雙氧水構成,包括四甲基聯(lián)苯胺-雙氧水緩沖液體系、鄰苯二胺-雙氧水緩沖液體系或2 ,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽-雙氧水緩沖液體系。
9.根據(jù)權利要求1所述的檢測試劑盒,其特征在于,包括核酸內切酶Nt.BbvCI和下列核酸序列:
核酸序列H1: 3'-TGATGGCTGTAGTGTTTCCGGGTTATCACTAGTTTGGTGGCACCAATGTCAGTCTCCTC-TTCGGAGTCGCTA-GAGGAGAC-5';
核酸序列H2: 5'-AGTACTAG-GGGTAGGGCGGGTTGGG-CCTCAGC-GGGTAGGGCGGGTTGGG-CTAGTACT-3'。
10.一種沙門氏菌的檢測方法,其特征在于,包括下列步驟:
1)先用雜交緩沖液分別溶解核酸H1和H2,將1 M的H1與待測溶液充分混勻,室溫反應30分鐘;
2)加入1 M的H2,分混勻,室溫反應30分鐘;
3)加入25 U的核酸內切酶,充分混勻,室溫反應90分鐘;
4)加入0.3 M的氯高鐵血紅素,室溫反應30分鐘;取出50 L反應液,加入到950 L顯色緩沖液體系中,室溫反應15分鐘,觀察顏色變化;如果待測溶液含有沙門氏菌時,溶液變色,如果待測溶液不含沙門氏菌時,溶液無色;
其中,雜交緩沖液體系、核酸內切酶、顯色緩沖液體系和核酸序列H1、H2如權利要求1-9任一項所述。