1.一種利用L-谷氨酸脫氫酶催化生產(chǎn)α-酮戊二酸的方法,其特征在于,它包括如下步驟:
在緩沖溶液中和過(guò)氧化氫清除劑的存在下,經(jīng)輔因子和L-谷氨酸脫氫酶的催化,L-谷氨酸或其鹽經(jīng)氧化反應(yīng)生成α-酮戊二酸;
其中,所述的輔因子依賴有機(jī)小分子再生催化劑實(shí)現(xiàn)同步催化再生,輔因子的濃度為0.5~3mM。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的緩沖溶液為0.1mmol/L的磷酸緩沖液、0.1mmol/L的Tris-HCl緩沖液、0.05mmol/L的碳酸鹽緩沖液、0.1mmol/L的檸檬酸緩沖液或0.1mmol/L的巴比妥鈉-HCl緩沖液;其中,所述的緩沖溶液的pH為8~10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的過(guò)氧化氫清除劑為過(guò)氧化氫酶,濃度為500~3000U/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的輔因子為NAD+或NADP+。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的輔因子與有機(jī)小分子再生催化劑的摩爾比為1:0.5~3。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的輔因子的濃度為0.5~3mmol/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的L-谷氨酸脫氫酶的濃度為5~50U/ml。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的有機(jī)小分子再生催化劑為FAD、FMN、7-三氟甲基-1,10-乙撐基異咯嗪氯化鹽、7-甲基-1,10-乙撐基異咯嗪氯化鹽或8-甲基-1,10-乙撐基異咯嗪氯化鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的L-谷氨酸鹽為L(zhǎng)-谷氨酸堿金屬鹽、L-谷氨酸堿性氨基酸鹽和L-谷氨酸銨鹽中的任意一種或幾種的組合。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的L-谷氨酸或其鹽的初始反應(yīng)濃度為15~50mmol/L。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的氧化反應(yīng)的溫度為25~35℃,反應(yīng)時(shí)間為24~72h。
12.一種組合產(chǎn)品,其特征在于,它包括如下組分:
(1)L-谷氨酸脫氫酶;
(2)過(guò)氧化氫清除劑;
(3)輔因子;
(4)有機(jī)小分子催化劑;
其中,所述的過(guò)氧化氫清除劑為過(guò)氧化氫酶,所述的輔因子為NAD+或NADP+,所述的有機(jī)小分子催化劑為FAD、FMN、7-三氟甲基-1,10-乙撐基異咯嗪氯化鹽、7-甲基-1,10-乙撐基異咯嗪氯化鹽或8-甲基-1,10-乙撐基異咯嗪氯化鹽。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的組合產(chǎn)品,其特征在于,L-谷氨酸脫氫酶和過(guò)氧化氫清除劑的濃度之比為1U/ml:100~1500U/ml,輔因子或有機(jī)小分子催化劑與L-谷氨酸脫氫酶的用量比為1mmol/L:5~50U/ml。
14.權(quán)利要求11所述的組合產(chǎn)品在制備α-酮戊二酸中的應(yīng)用。