本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種厄洛替尼-Cy7-殼聚糖聚合物。

背景技術(shù)：

癌癥是威脅人類健康和生命的重大疾病，其中肺癌是所有癌癥中引起死亡最多的癌癥之一。近年來，分子生物學(xué)的快速發(fā)展將癌癥的治療帶入分子靶向治療（Molecular Targeted Therapy）時代，給癌癥患者帶來了新希望。由于分子靶向藥物具有高效、低毒、特異性強(qiáng)等優(yōu)點，所以靶向治療已經(jīng)成為抗腫瘤藥物研發(fā)的重點方向。

EGFR 酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI) 是最先被成功開發(fā)成為靶向治療的抗腫瘤藥物之一。EGFR酪氨酸激酶調(diào)控細(xì)胞的生長、分化及凋亡抑制，該信號傳導(dǎo)在惡性腫瘤的生長發(fā)展中起到了至關(guān)重要的作用。EGFR-TKI代表藥物厄洛替尼分別于2004年、2005年及2007年被美國、歐洲及我國藥監(jiān)局批準(zhǔn)用于晚期轉(zhuǎn)移性或局限性NSCLC患者的二、三線治療。厄洛替尼（Erlotinib）通過與三磷酸腺苷（ATP）競爭EGFR上酪氨酸激酶（TK）催化區(qū)的結(jié)合位點，阻斷EGFR下游酪氨酸激酶的信號通路，從而抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。厄洛替尼為EGFR分子靶向藥物，因此我們利用厄洛替尼來達(dá)到主動靶向的作用。

活體成像技術(shù)是利用活體生物發(fā)光或熒光成像技術(shù)直接監(jiān)測活細(xì)胞在生物體內(nèi)的生物學(xué)行為及跟蹤分子信號，是一項可用于腫瘤發(fā)生機(jī)制研究的新技術(shù)?；铙w成像技術(shù)在腫瘤納米藥物研究中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在活體熒光轉(zhuǎn)基因小鼠模型成像、腫瘤內(nèi)環(huán)境成像、腫瘤轉(zhuǎn)移過程成像、休眠腫瘤細(xì)胞成像以及腫瘤治療應(yīng)答成像等方面?；铙w成像技術(shù)可以實時觀察活體動物體內(nèi)的腫瘤動態(tài)變化，包括腫瘤生長、轉(zhuǎn)移、細(xì)胞運(yùn)動性、侵襲性以及血管形成等。光動力療法（Photodynamic Therapy，PDT）是利用光動力效應(yīng)進(jìn)行疾病診斷和治療的一種新技術(shù)。其過程是，特定波長的激光照射使組織吸收的光敏劑受到激發(fā)，而激發(fā)態(tài)的光敏劑又把能量傳遞給周圍的氧，生成活性很強(qiáng)的單態(tài)氧，單態(tài)氧和相鄰的生物大分子發(fā)生氧化反應(yīng)，產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞受損乃至死亡。近紅外（NIR）熒光染料由于具有了良好的組織滲透性，吸收的近紅外光在生物組織中的穿透深度較大，而激發(fā)的熒光受生物組織本身的影響較小，所以可檢測到深層組織的熒光信號。該類染料作為非侵入性的分子影像試劑在癌癥的早期檢測中具有良好的應(yīng)用前景。其中最具代表性的為近紅外菁染料，能夠被腫瘤細(xì)胞攝取并富集，從而特異性成像。因此，我們選擇近紅外七甲川菁（Cy7）作為監(jiān)測藥物作用于活體動物的熒光標(biāo)記和光動力治療的光敏劑。

殼聚糖（Cs）是一種天然高分子多糖，其結(jié)構(gòu)中既有氨基又有羥基，易于化學(xué)修飾，因其具有良好的藥物緩釋性、生物相容性、生物可降解性且無毒廉價等特性而備受研究者的青睞。但殼聚糖分子內(nèi)與分子間存在強(qiáng)烈的氫鍵作用，不容于水和常見的有機(jī)溶劑。為了克服這一缺點，我們通過點擊化學(xué)反應(yīng)（Click）對其進(jìn)行改性，將具有功能性的集團(tuán)引入到殼聚糖中，得到兩親性的殼聚糖分子，并進(jìn)一步自組裝形成納米粒。點擊化學(xué)是由諾貝爾化學(xué)獎獲得者K.Barry Sharpless提出的一個模塊化合成概念，它具有反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)物收率高、速率快、選擇性高、產(chǎn)物易分離的特點。

基于以上背景，本發(fā)明本利用在一價銅催化的疊氮基與炔基的環(huán)加成“Click反應(yīng)”生成五元氮唑環(huán)的方法，先將疊氮基引入到殼聚糖分子，并對Cy7進(jìn)行炔基改造，最后通過一價銅的催化將厄洛替尼（本身結(jié)構(gòu)中含炔基）和炔基化的Cy7點擊至疊氮殼聚糖上合成厄洛替尼Cy7殼聚糖接枝聚合物（CE7）。由于CE7上連接了厄洛替尼和Cy7，而具備了厄洛替尼的靶向治療特點和Cy7的近紅外成像功能。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種具有腫瘤靶向性的厄洛替尼-Cy7-殼聚糖聚合物，其制成納米藥劑可主動靶向肺癌、進(jìn)行近紅外成像和光動力治療。

本發(fā)明提供了一種厄洛替尼-Cy7-殼聚糖聚合物（CE7），其結(jié)構(gòu)式為：

；

其中n為殼聚糖衍生物重復(fù)單元的個數(shù)。

本發(fā)明的聚合物CE7可以通過以下方法制備，反應(yīng)式如下：

其中n為殼聚糖衍生物重復(fù)單元的個數(shù)。

反應(yīng)式中，1為殼聚糖；2 為溴-N-鄰苯二甲亞胺基殼聚糖；3 疊氮-N-鄰苯二甲酰亞胺基-殼聚糖；4為聚合物CE7。

本發(fā)明的技術(shù)方案式是通過疊氮基與炔基的環(huán)加成“Click反應(yīng)”生成五元氮唑環(huán)的方法，先將疊氮基引入到殼聚糖分子，并對Cy7進(jìn)行炔基改造，最后通過一價銅的催化將厄洛替尼（本身結(jié)構(gòu)中含炔基）和炔基化的Cy7點擊至疊氮殼聚糖上合成厄洛替尼-Cy7-殼聚糖接枝聚合物（CE7）。

本發(fā)明制備聚合物CE7的方法，包括如下步驟：

步驟a：稱取殼聚糖1，溶于無水DMF，加入4-溴鄰苯二甲酸酐，氮氣保護(hù)，125℃油浴攪拌加熱。反應(yīng)體系澄清后，結(jié)束反應(yīng)，將反應(yīng)液直接倒入冰水中，析出黃白色沉淀。抽濾，固體用乙醚、丙酮洗滌，干燥，得到溴-N-鄰苯二甲亞胺基殼聚糖2；

步驟b：稱取產(chǎn)物2，溶于 N-甲基吡咯烷酮（NMP），加入疊氮化鈉（NaN3），氮氣保護(hù)，80℃反應(yīng)24小時。反應(yīng)體系呈紅棕色液體，結(jié)束反應(yīng)，將反應(yīng)液倒入乙醇中，析出固體。離心，收集產(chǎn)物，產(chǎn)物先后用乙醇、二次水、丙酮各洗滌三遍。干燥得到棕色固體3；

步驟c：稱取產(chǎn)物3，將其溶于二甲基亞砜（DMSO），室溫攪拌，然后加入厄洛替尼和Cy7，避光，氮氣保護(hù)，將無水硫酸銅和維生素C鈉鹽分別溶于水，之后慢慢滴加入燒杯。50℃反應(yīng)72個小時。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液加到透析袋中，用純水透析72h，收集固體，冷凍干燥，得到產(chǎn)物 4（CE7）；

其中Cy7是由苯肼和3-甲基-2-丁酮經(jīng)過一系列反應(yīng)得到（Yang, Z.; Lee, J. H.; Jeon, H. M.; Han, J. H.; Park, N.; He, Y.; Lee, H.; Hong, K. S.; Kang, C.; Kim, J. S., Folate-Based Near-Infrared Fluorescent Theranostic Gemcitabine Delivery. J Am Chem Soc 2013, 135, (31), 11657-11662）。

其中殼聚糖1（Cs）的重均分子量為10-1000千道爾頓。

其中Cy7是由苯肼和3-甲基-2-丁酮經(jīng)過一系列反應(yīng)得到（Yang, Z.; Lee, J. H.; Jeon, H. M.; Han, J. H.; Park, N.; He, Y.; Lee, H.; Hong, K. S.; Kang, C.; Kim, J. S., Folate-Based Near-Infrared Fluorescent Theranostic Gemcitabine Delivery. J Am Chem Soc 2013, 135, (31), 11657-11662）。

步驟c中，產(chǎn)物3和厄洛替尼和Cy7的質(zhì)量比為：6∶5∶1；透析袋截留分子量為8000~12000。

本發(fā)明中所述聚合物CE7的分子量為100-1000千道爾頓。

本發(fā)明中所述的聚合物CE7形成納米粒CE7Ns及其制備方法，具體步驟為：將本發(fā)明中所述的聚合物CE7用二甲基亞砜配成5~10毫克/毫升溶液，然后用注射器吸取1毫升，將其慢慢滴加入裝有10~20毫升純水的燒杯中，攪拌，室溫靜置0.5~1小時，聚合物通過自組裝形成CE7Ns。

本發(fā)明的納米粒CE7Ns用于腫瘤細(xì)胞的近紅外熒光成像和光動力治療。

本發(fā)明的有益效果在于：

1.本發(fā)明的聚合物及其形成的納米粒，既克服了殼聚糖溶解度差的缺陷，又保留了其無毒、生物相容性高的優(yōu)點；

2. 本發(fā)明的厄洛替尼-Cy7-殼聚糖聚合物形成的納米粒，既克服了厄洛替尼溶解度差的缺陷，又大大提高了其生物利用度；

3. 本發(fā)明的聚合物及其形成的納米粒，通過血液運(yùn)輸主動靶向到達(dá)腫瘤部位并蓄積，既增加了藥物在病灶部位的濃度，提高了藥物療效，也降低了用藥劑量和成本，減少了不良反應(yīng)的發(fā)生；

4.本發(fā)明的納米制劑具有主動靶向效果，還可以進(jìn)行近紅外熒光成像和光動力治療，提高治療效果。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實施例1制備的Cs(A)，Cs-Br(B)，Cs-N₃(C)，和CE7(D)的紅外圖譜。

圖2為本發(fā)明實施例1，實施例2，實施案例4制備的Cy7，C7和CE7的熒光圖譜。

圖3為本發(fā)明實施例1，實施例3，實施案例4制備的Erlotinib，CE，和CE7Ns的紫外吸收圖譜。

圖4為本發(fā)明實施例7中A549，H1975和PC-9細(xì)胞對C7Ns和CE7Ns的攝取圖。

圖5 為本發(fā)明實施例4的CE7Ns、實施例5的CENs、實施例6的C7Ns的體外細(xì)胞毒性。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明，有助于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。

實施例1

厄洛替尼-Cy7-殼聚糖聚合物（CE7）的合成：

步驟a：稱取200 mg殼聚糖Cs（殼聚糖購于上海伯奧生物科技有限公司，分子量為60千道爾頓，脫乙酰度為90%）溶于20 mL無水DMF中，隨后加入800mg 4-溴鄰苯二甲酸酐，氮氣保護(hù)，125℃油浴攪拌加熱。當(dāng)反應(yīng)液變澄清，溶液呈黃色時，終止反應(yīng)。趁熱過濾，然后直接將熱濾液倒入200mL冰水中，析出白色固體。抽濾，固體用乙醚、丙酮分別洗滌3次，除去多余的4-溴鄰苯二甲酸酐，通風(fēng)處干燥得產(chǎn)物2（Cs-Br）。

步驟b：稱取60 mg 產(chǎn)物2，加入6 mL N-甲基吡咯烷酮（NMP），加熱攪拌，使其完全溶解，加入100 mg 疊氮化鈉（NaN₃），氮氣保護(hù)，油浴80℃下攪拌加熱24小時。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液倒在60 mL 乙醇中，析出固體。通過離心（12000 r/min）收集產(chǎn)物，產(chǎn)物先后用乙醇、二次水、丙酮各洗滌三遍。得到固體通風(fēng)處干燥后得到棕色產(chǎn)物3（Cs-N₃）通過紅外譜圖分析，如圖1所示，產(chǎn)物3（Cs-N₃）在2100 cm^-1有紅外吸收峰，表明疊氮基已經(jīng)成功取代溴。

步驟d：稱取30mg產(chǎn)物3，溶于3 mL二甲亞砜，加入燒瓶，再加入25 mg 厄洛替尼和5 mg Cy7。燒瓶用橡膠塞密封，抽真空后，氮氣保護(hù)，用1 mL注射器往燒瓶先滴加4 mg五水硫酸銅（溶于200 μL二次水中），后滴加3 mg抗壞血酸鈉（溶于200 μL二次水中）。反應(yīng)物在50℃下，避光反應(yīng)72h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液用規(guī)格為10000的透析袋在二次水中透析72h。透析后，將產(chǎn)物凍干，得到聚合物CE7。如圖1所示，產(chǎn)物3（Cs-N₃）在2120cm^-1出現(xiàn)較大吸收峰，表明疊氮基已經(jīng)連接到Cs上，CE7在2120 cm^-1處紅外吸收峰消失，表明疊氮基已經(jīng)成功與炔基反應(yīng)生成五元氮唑環(huán)。

實施例2

殼聚糖-Cy7聚合物的合成：

稱取30mg產(chǎn)物3，溶于3 mL二甲亞砜，加入燒瓶，再加入5 mg Cy7。燒瓶用橡膠塞密封，抽真空后，氮氣保護(hù)，用1 mL注射器往燒瓶先滴加4 mg五水硫酸銅（溶于200 μL二次水中），后滴加3 mg抗壞血酸鈉（溶于200 μL二次水中）。反應(yīng)物在50 ℃下，避光反應(yīng)72h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液用規(guī)格為10000的透析袋在二次水中透析72h。透析后，將產(chǎn)物凍干，得到聚合物C7。將C7溶于二甲基亞砜，激發(fā)波長633nm，測其熒光強(qiáng)度。如圖2所示，C7在790-810nm處有Cy7的特征峰，表明Cy7已成功連接到殼聚糖骨架上。

實施例3

殼聚糖-厄洛替尼聚合物的合成：

稱取30mg產(chǎn)物3，溶于3 mL二甲亞砜，加入燒瓶，再加入25 mg 厄洛替尼Erlotinib。燒瓶用橡膠塞密封，抽真空后，氮氣保護(hù)，用1 mL注射器往燒瓶先滴加4 mg五水硫酸銅（溶于200 μL二次水中），后滴加3 mg抗壞血酸鈉（溶于200 μL二次水中）。反應(yīng)物在50 ℃下，避光反應(yīng)72h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液用規(guī)格為10000的透析袋在二次水中透析72h。透析后，將產(chǎn)物凍干，得到聚合物CE。將產(chǎn)物溶于二甲基亞砜測紫外吸收，如圖3所示，Erlotinib在330-350nm處有特征吸收峰，CE在340nm處有紫外吸收，表明Erlotinib已成功連接到殼聚糖骨架上。

實施例4

聚合物CE7用于藥物納米粒的制備方法：

將聚合物CE7溶于二甲基亞砜中，然后用注射器將其慢慢滴加入裝有二次水的燒杯中，攪拌混合，室溫靜置。CE7通過自組裝形成CE7Ns。具體步驟為：將本發(fā)明中所述的聚合物CE7用二甲基亞砜配成5~10毫克/毫升溶液，然后用注射器吸取1毫升，將其慢慢滴加入裝有10~20毫升純水的燒杯中，攪拌，室溫靜置0.5~1小時，聚合物通過自組裝形成CE7Ns。測CE7Ns得紫外吸收，如圖3所示CE7Ns在340nm處有紫外吸收。

實施例5

殼聚糖-厄洛替尼聚合物用于藥物納米粒的制備方法：

稱取30mg產(chǎn)物3，溶于3 mL二甲亞砜，加入30 mg Erlotinib。燒瓶用橡膠塞密封，抽真空后，氮氣保護(hù)，用1 mL注射器往燒瓶先滴加4 mg五水硫酸銅（溶于200 μL二次水中），后滴加3 mg抗壞血酸鈉（溶于200 μL二次水中）。反應(yīng)物在50 ℃下，避光反應(yīng)72h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液用規(guī)格為10000的透析袋在二次水中透析72h。透析后，將產(chǎn)物凍干，得到聚合物CE。將聚合物CE溶于二甲基亞砜中，然后用注射器將其慢慢滴加入裝有二次水的燒杯中，攪拌混合，室溫靜置。CE通過自組裝形成CENs。具體步驟為：將本發(fā)明中所述的聚合物CE用二甲基亞砜配成5~10毫克/毫升溶液，然后用注射器吸取1毫升，將其慢慢滴加入裝有10~20毫升純水的燒杯中，攪拌，室溫靜置0.5~1小時，聚合物通過自組裝形成CENs。

實施例6

殼聚糖-Cy7聚合物用于藥物納米粒的制備：

稱取30mg產(chǎn)物3，溶于3 mL二甲亞砜，加入5 mgCy7。燒瓶用橡膠塞密封，抽真空后，氮氣保護(hù)，用1 mL注射器往燒瓶先滴加4 mg五水硫酸銅（溶于200 μL二次水中），后滴加3 mg抗壞血酸鈉（溶于200 μL二次水中）。反應(yīng)物在50 ℃下，避光反應(yīng)72h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液用規(guī)格為10000的透析袋在二次水中透析72h。透析后，將產(chǎn)物凍干，得到聚合物C7。將聚合物C7溶于二甲基亞砜中，然后用注射器將其慢慢滴加入裝有二次水的燒杯中，攪拌混合，室溫靜置。C7通過自組裝形成C7Ns。具體步驟為：將本發(fā)明中所述的聚合物C7用二甲基亞砜配成5~10毫克/毫升溶液，然后用注射器吸取1毫升，將其慢慢滴加入裝有10~20毫升純水的燒杯中，攪拌，室溫靜置0.5~1小時，聚合物通過自組裝形成C7Ns。

實施例7

以人肺癌細(xì)胞系H1975細(xì)胞（EGFR突變型）、A549細(xì)胞（EGFR野生型）和PC-9（EGFR敏感型）為測試細(xì)胞系（細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究所細(xì)胞資源中心）。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：從液氮罐中取出H1975、A549和PC-9三種細(xì)胞保種管，在37℃水浴鍋中快速溶化解凍，然后1000 rpm離心5 min，吸棄上清液，取1 mL DMEM完全培養(yǎng)液將細(xì)胞沉淀吹打均勻，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中使得瓶中培養(yǎng)基為4 mL，置于37℃，5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞攝取實驗：將H1975細(xì)胞、A549細(xì)胞和PC-9細(xì)胞消化后鋪到6孔板中，過夜，細(xì)胞完全貼壁后，棄去培養(yǎng)基用PBS洗滌2遍，每種細(xì)胞分別設(shè)置空白對照和實驗組。實驗組1加入實施案例6的C7Ns，在37 ℃下孵育2 h。實驗組2加入實施案例4的CE7Ns，在37 ℃下孵育2 h。實驗組3預(yù)先加入含Erlotinib的培養(yǎng)基孵育15min，之后棄去培養(yǎng)基，用PBS洗滌2遍，再向孔板中加入實施例 4的 CE7Ns在37 ℃下孵育2 h。然后實驗組棄去培養(yǎng)基用PBS洗滌2遍，消化細(xì)胞于離心管中，離心棄消化液，然后PBS洗滌2遍，之后用PBS懸浮細(xì)胞，上流式細(xì)胞儀。

流式細(xì)胞儀測定攝取結(jié)果如圖4所示。從圖4中可以看出，在PC-9細(xì)胞中，CE7Ns的熒光強(qiáng)度（曲線2）比C7Ns（曲線1）強(qiáng)，且先用Erlotinib孵育后再加入CE7Ns（曲線3），熒光強(qiáng)度反而降低，說明CE7Ns可以靶向到EGFR敏感性突變的細(xì)胞株中。而在A549和H1975細(xì)胞中三個實驗組沒有明顯的變化，說明CE7Ns對EGFR野生型和耐藥性突變的靶向作用不明顯，但其有一定的熒光強(qiáng)度，表明A549和H1975細(xì)胞對CE7Ns有一定的攝取量，則可以通過光動力治療來達(dá)到治療效果。

實施例8

以人肺癌細(xì)胞系H1975細(xì)胞（EGFR突變型）、A549細(xì)胞（EGFR野生型）和PC-9（EGFR敏感型）為測試細(xì)胞系（細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究所細(xì)胞資源中心）。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：從液氮罐中取出H1975、A549和PC-9三種細(xì)胞保種管，在37℃水浴鍋中快速溶化解凍，然后1000 rpm離心5 min，吸棄上清液，取1 mL DMEM完全培養(yǎng)液將細(xì)胞沉淀吹打均勻，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中使得瓶中培養(yǎng)基為4 mL，置于37℃，5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞毒性實驗：取對數(shù)期生長且狀態(tài)良好的A549、H1975和PC-9細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶消化后，配制成細(xì)胞懸液。96孔板中每孔加入100ul細(xì)胞懸液（5×104細(xì)胞/孔）。在37℃、5% CO₂的培養(yǎng)箱中孵育24h后，加入5ug/ml的Erlotinib、5ug/ml實施例5的CENs、5ug/ml實施例4的CE7Ns、5ug/ml實施例6的C7Ns。由于藥物溶解在DMSO中，DMSO對細(xì)胞具有毒性，因此需要設(shè)置一個陰性對照組以證明其溶劑按相同比例稀釋后對細(xì)胞無毒性，每個濃度設(shè)四個復(fù)孔。并將加入CENs和CE7Ns的實驗組用或不用紅外光照射，用于比較光動力的治療效果。藥物作用48h后，用PBS洗兩遍，每孔加入100ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），繼續(xù)培養(yǎng)4h后終止培養(yǎng)，小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。每孔加入100ul DMSO，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD570 nm 處測量各孔的吸光值。并按下式計算細(xì)胞的存活率。存活率（%）=（實驗組吸收值-溶劑對照組吸收值）/（空白組吸收值-溶劑對照組吸收值）。

細(xì)胞毒性結(jié)果如圖5 所示。從圖5 中可以看出，Erlotinib 對A549和H1975兩種細(xì)胞毒性較小，對PC-9細(xì)胞的毒性較大。CENs 和CE7Ns 均可以在不同程度上殺死三種細(xì)胞，且與Erlotinib相比不同程度上逆轉(zhuǎn)了A549和H1975的耐藥性。當(dāng)細(xì)胞暴露在紅外燈下時，CENs+NIR的毒性與CENs相比，效果不明顯；當(dāng)細(xì)胞暴露在紅外燈下時，CE7Ns+NIR的毒性比CE7Ns 的毒性強(qiáng)。這表明Erlotinib修飾的CENs和CE7Ns可增加Erlotinib對肺癌細(xì)胞的毒性，從而提高抗腫瘤的治療效果。同時也表明加入Cy7的CE7Ns可進(jìn)行光動力治療，且治療效果更好。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。