本發(fā)明涉及一種抗真菌化合物，更具體地說，本發(fā)明涉及紅貝菌素(scabrosone)的制備方法及其在制備抗真菌藥物中的應用。
背景技術：
真菌感染是由真菌引起的人和動物的感染性疾病。真菌感染性疾病根據(jù)真菌侵犯人體的部位分為4類：淺表真菌病、皮膚真菌病、皮下組織真菌病和系統(tǒng)性真菌病；前二者合稱為淺部真菌病，后二者又稱為深部真菌病。
近年來，由于廣譜抗生素、抗腫瘤藥物、放射治療、器官移植、激素治療、介入治療及多種侵入性操作的廣泛應用，艾滋病和老齡化等多種因素引起的免疫力低下的人群比例逐年增加，導致真菌感染的發(fā)病率呈上升趨勢，感染菌種也產(chǎn)生了變異，真菌耐藥現(xiàn)象愈趨嚴重，真菌感染的治療也愈加困難。因此人們迫切需要研發(fā)出新型抗真菌藥物。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種具有藥用價值的紅貝菌素(scabrosone)的制備方法。
本發(fā)明的另一目的是提供紅貝菌素(scabrosone)在制備抗真菌藥物中的應用。
本發(fā)明為了達到上述目的采用的技術解決方案如下：
本發(fā)明所述紅貝菌素(scabrosone)是一種二萜，其結(jié)構(gòu)式為
其中1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20為碳原子序數(shù)編號。
本發(fā)明提供了一種紅貝菌素(scabrosone)的制備方法，該方法包含以下步驟：
(1)取藥用真菌紅貝俄氏孔菌(earliellascabrosa(pers.)gilb.&ryvarden)子實體，用有機溶劑提取；
(2)所得粗提物用硅膠柱層析粗分得洗脫物；
(3)所得洗脫物用飽和亞硫酸氫鈉或飽和亞硫酸氫鉀處理，得飽和亞硫酸氫鈉或飽和亞硫酸氫鉀水層；
(4)所得飽和亞硫酸氫鈉或飽和亞硫酸氫鉀水層用飽和碳酸鈉或稀鹽酸處理后用有機溶劑萃取，得萃取液；
(5)萃取液減壓回收溶劑后得紅貝菌素(scabrosone)。
其中步驟(1)所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的一種，或它們的混合物。
其中步驟(3)所述有機溶劑選自乙醚、石油醚、乙酸乙酯、氯仿中的一種，或它們的混合物。
同時，本發(fā)明還提供了所述紅貝菌素(scabrosone)在制備抗真菌藥物中的應用。
本發(fā)明所述紅貝菌素(scabrosone)用在醫(yī)藥上時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用?？赏ㄟ^噴霧、口服、注射(靜脈注射、肌肉注射)方式給藥。
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用本發(fā)明式(i)所述化合物的體外抗真菌活性試驗結(jié)果來說明它在制備抗真菌藥物中的應用。
a.材料和方法
1.試劑：二甲基亞砜(dmso)，對碘硝基四唑紫(int)。
2.培養(yǎng)基：麥芽提取肉湯。
3.化合物：檢測化合物為紅貝菌素(scabrosone)。
4.供試病原真菌：灰葡萄孢菌(botrytiscinerea)、腐皮鐮刀菌(fusariumsolani)、赭曲霉(aspergillusochraceus)、白色念珠菌(candidaalbicans)、須毛蘚菌(trichophytonmentagrophytes)。
5.紅貝菌素(scabrosone)體外抗真菌活性試驗
通過微量稀釋法測定化合物體外對供試病原真菌的抗真菌活性，氟康唑為陽性對照。首先制作供試菌菌懸液。將供試病原真菌接種于麥芽提取肉湯培養(yǎng)基中，于30℃下靜置培養(yǎng)48h，得菌懸液，用麥芽提取肉湯培養(yǎng)基稀釋成0.5麥氏濁度接種液。然后將化合物樣品用dmso溶解并配制成起始濃度為1280μg/ml的藥液，并用針頭濾器濾菌?？咕囼炘跓o菌96微孔板中進行。先在96微孔板外圍孔上加200μl無菌水，其余孔加100μl麥芽提取肉湯培養(yǎng)基。然后將100μl濾菌后藥液加到各行的第一孔中，對藥液進行倍半稀釋。最后將100μl接種液加到各檢測孔中以及無藥對照孔中。最終藥液檢測濃度范圍為320～0μg/ml。培養(yǎng)板在30℃孵育72h后，每孔加20μl的5％int水溶液，繼續(xù)孵育1h后觀察。粉紅色的板孔為陽性生長。最低抑菌濃度(mic)定義為阻止顏色變?yōu)榉奂t色的最低藥物濃度。試驗重復三次。
b.試驗結(jié)果
1.紅貝菌素(scabrosone)對灰葡萄球菌、腐皮鐮刀菌、赭曲霉的mic值均為160μg/ml。
2.紅貝菌素(scabrosone)對白色念珠菌、須毛蘚菌的mic值均為320μg/ml。
3.體外抗真菌試驗結(jié)果匯總?cè)绫?所示。
表1紅貝菌素(scabrosone)體外抗真菌活性試驗結(jié)果匯總表
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下有益效果：
1.迄今為止，尚未有關于從紅貝俄氏孔菌(earliellascabrosa(pers.)gilb.&ryvarden)子實體制備式(i)所示紅貝菌素(scabrosone)的報道。
2.體外抗真菌試驗結(jié)果表明，紅貝菌素(scabrosone)能顯著抑制供試病原真菌的生長，對灰葡萄球菌、腐皮鐮刀菌、赭曲霉的mic值均為160μg/ml，對白色念珠菌、須毛蘚菌的mic值均為320μg/ml。表明紅貝菌素(scabrosone)可用于制備抗真菌藥物。
3.本發(fā)明所述紅貝菌素(scabrosone)的原料來源豐富，不僅可通過人工種植，也可以通過發(fā)酵生產(chǎn)?；衔镏苽涔に嚭唵?，既可通過噴霧給藥，也可以通過口服和注射給藥，為人類治療真菌性感染疾病提供了一種新的候選藥物。
附圖說明
無。
具體實施方式
下面將結(jié)合具體實施例來詳細說明本發(fā)明，在此本發(fā)明的示意性實施例以及說明用來解釋本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。
實施例1
取1000g風干的紅貝俄氏孔菌子實體，粉碎，用乙酸乙酯和甲醇室溫下各浸泡提取三次，于50℃真空旋轉(zhuǎn)回收溶劑得粗提物，粗提物進行硅膠(200-300目)柱層析，用石油醚-乙酸乙酯梯度(100∶0，80∶20，60∶40，40∶60，20∶80，0∶100，v/v)洗脫，石油醚-乙酸乙酯(80∶20)洗脫組分回收溶劑后用石油醚溶解，在攪拌下加入熱的飽和亞硫酸氫鈉水溶液，分液，水層在攪拌下慢慢加入飽和碳酸鈉水溶液至無氣泡產(chǎn)生，然后用乙醚萃取三次，乙醚萃取液回收溶劑后得紅貝菌素(scabrosone)純品135mg。
該方法分離出來的紅貝菌素(scabrosone)為無色油狀液體，分子量為334。易溶于乙醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇等有機溶劑。有關核磁共振波譜數(shù)據(jù)見表2。
表2紅貝菌素(scabrosone)的核磁共振波譜數(shù)據(jù)
(1hnmr，13cnmr，cdcl3，δinppm，jinhz)
實施例2
軟膏劑：紅貝菌素(scabrosone)100mg
羊毛脂適量
凡士林適量
實施例3
實施例4
膠囊劑：按實施例1制得化合物紅貝菌素(scabrosone)，按常規(guī)膠囊制劑方法制得膠囊。
上述實施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟悉此技術的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實施例進行修飾或改變。因此，舉凡所屬技術領域中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。