本發(fā)明涉及一種精制脫油磷脂的方法，尤其是用于生產(chǎn)藥用高純磷脂酰膽堿的精制脫油磷脂的制備方法，屬于化學(xué)提純
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：磷脂是一類(lèi)存在于生物界的含磷脂肪物質(zhì)，是一種混合物，主要由磷脂酰膽堿(卵磷脂，PC)、磷脂酰乙醇胺(腦磷脂，PE)、磷脂酰絲氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(肌醇磷脂，PI)和磷脂酸(PA)等組成。磷脂是天然的乳化劑和表面活性劑，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和特殊的生理特性，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飼料、纖維、化妝品、皮革、染色、化工、環(huán)保等領(lǐng)域。磷脂不耐高溫，80℃開(kāi)始變棕色，120℃開(kāi)始分解，易氧化酸敗而使顏色變深，不易保存。其中磷脂酰膽堿是磷脂的主要成分之一，是一種兩性分子，由親水的頭部和疏水的尾部組成，亦稱(chēng)卵磷脂。卵磷脂被譽(yù)為與蛋白質(zhì)、維生素并列的第三營(yíng)養(yǎng)素。卵磷脂含量在55％以下的大部分應(yīng)用在保健食品、營(yíng)養(yǎng)食品中，也可應(yīng)用做醫(yī)藥輔料。60％-80％用在化妝品、藥用輔料中，90％以上的主要應(yīng)用在制藥行業(yè)。按其純度高低，一般分為PC50、PC60、PC70、PC80、PC90、PC95。隨著對(duì)磷脂在醫(yī)藥學(xué)方面作用的研究不斷深入，制藥業(yè)對(duì)高純磷脂分級(jí)產(chǎn)品的需求量日益增大。尤其是高純磷脂酰膽堿，它不僅具有減少動(dòng)脈粥樣硬化等重要的生理作用，而且可用于制備靜脈脂肪乳輸液；作為抗癌藥物和基因藥物載體的脂質(zhì)體，在提高藥效和減少毒副作用方面療效顯著；還可作為青霉素添加劑，起到促進(jìn)藥物吸收、減輕疼痛增加療效、抗過(guò)敏的作用。通常情況下，磷脂混合物經(jīng)過(guò)提取后得到脫油磷脂，再進(jìn)一步通過(guò)提取純化得到藥用高純磷脂酰膽堿。目前，藥用磷脂酰膽堿的提取方法主要為有機(jī)溶劑萃取法、層析分提法和超臨界CO2萃取法，且由于采用CO2無(wú)毒氣體可避免采用有機(jī)溶劑帶來(lái)的污染問(wèn)題，所以通常認(rèn)為后者較理想，但是此法不但成本高，而且脫油不徹底，要得到高純藥用磷脂酰膽堿，最后還得采用溶劑如丙酮等脫油。需要注意的是，為了得到高純磷脂酰膽堿，需要將脫油磷脂作為原料進(jìn)一步提取純化，因而其提取純化的原料的難易程度及成本高低等，對(duì)是否能夠快速、低成本的得到高純度的磷脂酰膽堿至關(guān)重要。現(xiàn)有技術(shù)中得到的脫油磷脂，均有丙酮不溶物低、過(guò)氧化值高、溶血卵磷脂含量高等問(wèn)題，在后續(xù)提取藥用高純磷脂酰膽堿時(shí)，還要采取降低溶血磷脂酰膽堿的和脫除大豆油的工藝步驟，導(dǎo)致提取工藝復(fù)雜，成本過(guò)高。因而研究一種用于提取高純度藥用磷脂酰膽堿的精制脫油磷脂的方法，是解決高純度磷脂酰膽堿提取純化工藝的一個(gè)至關(guān)重要的因素。鑒于此，研究一種色澤淺、過(guò)氧化值低，特別是丙酮不溶物含量高且溶血磷脂酰膽堿含量低的脫油磷脂的制備方法，是本發(fā)明亟待解決的問(wèn)題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：因此，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的脫油磷脂過(guò)氧化值高、丙酮不溶物低、溶血磷脂酰膽堿含量高的技術(shù)缺陷，從而提供一種更簡(jiǎn)便、成本低、可大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)的色澤淺、過(guò)氧化值低，特別是丙酮不溶物高且溶血磷脂酰膽堿含量低的精制脫油磷脂的方法。為此，本發(fā)明提供一種精制脫油磷脂的制備方法，包括：A、將高純度丙酮加入萃取罐中，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加入TBHQ及有機(jī)酸，攪拌，緩慢加入液體磷脂，開(kāi)啟冷凝水，進(jìn)行萃??；B、將步驟A中萃取液靜止沉淀，抽出上層母液，再加入高純度丙酮一起加入萃取罐中，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加入TBHQ及有機(jī)酸，攪拌，進(jìn)行萃??；重復(fù)步驟B4次；C、將步驟B中萃取液靜止沉淀，抽出上層母液，再加入高純度丙酮一起加入萃取罐中，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝猓偌尤隩BHQ，攪拌，進(jìn)行萃??；重復(fù)步驟C3次；D、抽取上層母液后，下層漿料去離心分離，母液精餾得到濾餅，旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到粉末狀精制脫油磷脂。上述精制脫油磷脂的制備方法中，所述步驟A中液體磷脂：高純度丙酮:TBHQ:有機(jī)酸比例為質(zhì)量體積比(W/V/W/W)1:2:0.0002:0.002-1:6:0.0006:0.006，優(yōu)選1:3:0.0003:0.003-1:5:0.0005:0.005，最優(yōu)選1:4:0.0004:0.004。上述精制脫油磷脂的制備方法中，步驟A中的液體磷脂相對(duì)于所述步驟B中高純度丙酮的加入比例為質(zhì)量體積比(W/V)1:1-1:3，優(yōu)選1:2。上述精制脫油磷脂的制備方法中，所述步驟A、B中有機(jī)酸為檸檬酸、酒石酸、蘋(píng)果酸中的一種或多種。上述精制脫油磷脂的制備方法中，所述步驟A、B、C中攪拌轉(zhuǎn)速為400-800r/min，優(yōu)選600r/min。上述精制脫油磷脂的制備方法中，所述步驟A、B、C中萃取溫度≤20℃，優(yōu)選萃取溫度≤15℃，步驟A中萃取攪拌時(shí)間為20-40min，優(yōu)選30min，步驟B、C中萃取攪拌時(shí)間為10-30min，優(yōu)選20min。上述精制脫油磷脂的制備方法中，所述步驟D中真空干燥條件為：干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥。上述精制脫油磷脂的制備方法中，所述步驟A中液體磷脂的成分為：丙酮不溶物62.3％、過(guò)氧化值0.3meq/kg，LPC溶血磷脂酰膽堿1.12％，琥珀色粘稠流體；所述步驟D中精制脫油磷脂的成分為：丙酮不溶物99.2％，LPC0.2％，過(guò)氧化值0.2，淺黃色粉末。本申請(qǐng)人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究發(fā)現(xiàn)，在使用丙酮進(jìn)行脫油的過(guò)程中，一般萃取溫度較高，時(shí)間較長(zhǎng)。然而，即便簡(jiǎn)單的控制萃取溫度保持低溫萃取，由于磷脂極易氧化，即使添加了TBHQ等抗氧化劑，或者通入氮?dú)獗Ｗo(hù)防止氧化水解，萃取得到的脫油磷脂中仍容易有部分磷脂被氧化，產(chǎn)生一定程度的氧化產(chǎn)物，在后續(xù)萃取、干燥過(guò)程中有殘留，導(dǎo)致最終脫油磷脂產(chǎn)品色澤深、過(guò)氧化值高、丙酮不溶物低、溶血磷脂酰膽堿含量高。因而，本發(fā)明人在添加TBHQ等抗氧化劑、通入氮?dú)獗Ｗo(hù)防止氧化水解等保護(hù)措施的基礎(chǔ)上，特別在前四次萃取中選用了有機(jī)酸添加至丙酮溶液中，增加丙酮的極性從而增加溶血磷脂酰膽堿在丙酮中的溶解度，將原料中的溶血磷脂酰膽堿去除，使成品脫油磷脂中的溶血磷脂酰膽堿含量大為降低。本發(fā)明的上述技術(shù)方案相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：1、本發(fā)明所述精制脫油磷脂的制備方法中，通過(guò)在丙酮中添加有機(jī)酸，增加溶血磷脂酰膽堿在丙酮中的溶解度，從而降低溶血磷脂酰膽堿在脫油磷脂中的含量，降低了后續(xù)精制純化提取藥用磷脂酰膽堿的難度及成本，且本工藝所得脫油磷脂的制備全部流程中均為天然原料，且本工藝所得脫油磷脂的色澤淺、過(guò)氧化值低，僅經(jīng)多次萃取后便可得到丙酮不溶物含量高、溶血磷脂酰膽堿含量低、過(guò)氧化值低的粉末狀精制脫油磷脂，產(chǎn)率高、純度高、色澤淺。2、萃取過(guò)程中，選用丙酮作為脫油溶劑，添加抗氧劑作為保護(hù)劑，增加脫油磷脂的保質(zhì)期，同時(shí)通入氮?dú)庖苑乐姑撚瓦^(guò)程中原料或產(chǎn)物氧化水解。3、通常認(rèn)為，萃取溫度過(guò)高或干燥溫度高，均會(huì)使得脫油磷脂中磷脂酰膽堿的含量降低，然而發(fā)明人通過(guò)有機(jī)酸的添加，并結(jié)合萃取器溫度的控制以及干燥溫度和真空度的控制，保證了磷脂在脫油過(guò)程中去除溶血磷脂酰膽堿的同時(shí)氧化程度低。具體實(shí)施方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例中所用檸檬酸、酒石酸、蘋(píng)果酸等有機(jī)酸均為市售純度大于99％的食品級(jí)產(chǎn)品。高純度丙酮溶液純度99.5％。實(shí)施例1-3添加檸檬酸制備精制脫油磷脂實(shí)施例1在1500L的萃取罐中，先加入800L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ及800g檸檬酸，開(kāi)啟攪拌，攪拌速度是600r/min，緩慢加入200kg液體磷脂(丙酮不溶物62.3％，LPC1.12％,過(guò)氧化值0.3)，開(kāi)啟冷凝水，萃取溫度控制在15℃以?xún)?nèi)，萃取攪拌30min。靜止沉淀30min，抽取上層母液400L，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ及400g檸檬酸，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟4次。抽取上層母液400L后，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟3次。抽取上層母液400L后，下層漿料去離心分離，母液去精餾得到純度99.5％的丙酮重復(fù)使用，濾餅180kg，去旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到120kg的精制脫油磷脂，丙酮不溶物99.2％，LPC0.2％，過(guò)氧化值0.2。實(shí)施例2在1500L的萃取罐中，先加入600L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ及800g檸檬酸，開(kāi)啟攪拌，攪拌速度是400r/min，緩慢加入200kg液體磷脂(丙酮不溶物62.3％，LPC1.12％,過(guò)氧化值0.3)，開(kāi)啟冷凝水，萃取溫度控制在20℃以?xún)?nèi)，萃取攪拌40min。靜止沉淀30min，抽取上層母液400L，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ及400g檸檬酸，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟4次。抽取上層母液400L后，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝猓偌尤?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟3次。抽取上層母液400L后，下層漿料去離心分離，母液去精餾得到純度99.5％的丙酮重復(fù)使用，濾餅183kg，去旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到122kg的精制脫油磷脂，丙酮不溶物99.0％，LPC0.3％，過(guò)氧化值0.3。實(shí)施例3在1500L的萃取罐中，先加入1000L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ及300g檸檬酸，開(kāi)啟攪拌，攪拌速度是600r/min，緩慢加入200kg液體磷脂(丙酮不溶物62.3％，LPC1.12％,過(guò)氧化值0.3)，開(kāi)啟冷凝水，萃取溫度控制在15℃以?xún)?nèi)，萃取攪拌30min。靜止沉淀30min，抽取上層母液400L，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ及200g檸檬酸，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟4次。抽取上層母液400L后，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟3次。抽取上層母液400L后，下層漿料去離心分離，母液去精餾得到純度99.5％的丙酮重復(fù)使用，濾餅178kg，去旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到118kg的精制脫油磷脂，丙酮不溶物99.1％，LPC0.4％，過(guò)氧化值0.4。對(duì)比例1-3未添加檸檬酸制備精制脫油磷脂對(duì)比例1在1500L的萃取罐中，先加入800L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，攪拌速度是600r/min，緩慢加入200kg液體磷脂，開(kāi)啟冷凝水，萃取溫度控制在15℃以?xún)?nèi)，萃取攪拌30min。靜止沉淀30min，抽取上層母液400L，再加入400L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟7次。抽取上層母液400L后，下層漿料去離心分離，母液去精餾得到純度99.5％的丙酮重復(fù)使用，濾餅182kg，去旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到121kg的粉末狀脫油磷脂。對(duì)比例2在1500L的萃取罐中，先加入600L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝猓偌尤?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，攪拌速度是400r/min，緩慢加入200kg液體磷脂，開(kāi)啟冷凝水，萃取溫度控制在20℃以?xún)?nèi)，萃取攪拌40min。靜止沉淀30min，抽取上層母液400L，再加入200L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟7次。抽取上層母液400L后，下層漿料去離心分離，母液去精餾得到純度99.5％的丙酮重復(fù)使用，濾餅184kg，去旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到122kg粉末狀脫油磷脂。對(duì)比例3在1500L的萃取罐中，先加入1000L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝?，再加?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，攪拌速度是800r/min，緩慢加入200kg液體磷脂，開(kāi)啟冷凝水，萃取溫度控制在15℃以?xún)?nèi)，萃取攪拌30min。靜止沉淀30min，抽取上層母液400L，再加入600L純度99.5％的丙酮，向萃取罐中通入氮?dú)獬タ諝猓偌尤?0gTBHQ，開(kāi)啟攪拌，萃取20min。重復(fù)以上步驟7次。抽取上層母液400L后，下層漿料去離心分離，母液去精餾得到純度99.5％的丙酮重復(fù)使用，濾餅178kg，去旋轉(zhuǎn)真空干燥機(jī)干燥，干燥溫度50℃，真空度達(dá)到-0.098MPa后30min后停止干燥，通入冷卻水降溫至25℃出料，得到118kg粉末狀脫油磷脂。對(duì)脫油磷脂的組分進(jìn)行分析，脫油磷脂中丙酮不溶物含量平均為99.1％，通過(guò)HPLC分析，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)樣品的HPLC色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算各組分含量，得結(jié)果如表1所示。表1脫油磷脂的各組分含量由表1可知，脫油磷脂的主要組分為磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰膽堿(PC)和磷脂酰肌醇(PI)。實(shí)施例1-3與對(duì)比例1-3的脫油磷脂相比，實(shí)施例1-3脫油磷脂中PC含量對(duì)比例1-3脫油磷脂中PC含量高，PE含量略低，PI含量基本相當(dāng)，尤其是脫油磷脂中PC含量高達(dá)23.5％。對(duì)脫油磷脂的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析，分析結(jié)果見(jiàn)表2。表2脫油磷脂的各項(xiàng)指標(biāo)-符合GB28401-2012由表2可知，實(shí)施例中的脫油磷脂的溶血磷脂酰膽堿含量明顯比對(duì)比例中的低，說(shuō)明通過(guò)在丙酮中加入有機(jī)酸來(lái)降低脫油磷脂中的溶血磷脂酰膽堿含量的方法非常有效。丙酮不溶物值越高，說(shuō)明脫油磷脂的脫油效果越好，產(chǎn)品所含大豆油越少。實(shí)施例1-3與對(duì)比例1-3的脫油磷脂相比，實(shí)施例中的脫油磷脂的丙酮不溶物更高，酸值更低。對(duì)脫油磷脂的外觀色澤進(jìn)行分析，分析結(jié)果見(jiàn)表3。表3脫油磷脂的外觀色澤指標(biāo)顏色實(shí)施例1淡黃實(shí)施例2淡黃實(shí)施例3淡黃對(duì)比例1微黃對(duì)比例2略黃對(duì)比例3略黃由表3可知，脫油磷脂的色澤更淺，說(shuō)明其被氧化的程度更輕。實(shí)施例1-3與對(duì)比例1-3的脫油磷脂相比，脫油磷脂中色澤更淺，被氧化程度更輕。磷脂在暴露空氣中放置很易氧化變質(zhì)，特別是在溫度較高狀態(tài)下，其顏色迅速加深，因此在制備精制脫油磷脂時(shí)，應(yīng)盡可能在較低溫度下于氮?dú)鈿夥罩羞M(jìn)行。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果總結(jié)出以下結(jié)論：萃取溫度低于15℃，真空干燥溫度低于50℃，真空度-0.098MPa，通氮?dú)?、丙酮中添加有機(jī)酸及抗氧化劑是制備藥用高純磷脂酰膽堿的精制脫油磷脂的最佳條件。顯然，上述實(shí)施例中采用的有機(jī)酸的具體種類(lèi)僅僅是為清楚地說(shuō)明所作的舉例，而并非對(duì)實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)需也無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見(jiàn)的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明創(chuàng)造的保護(hù)范圍之中。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3