本發(fā)明涉及一種植物原料藥的提取分離工藝，具體涉及一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝。

背景技術(shù)：

褐藻多糖硫酸酯（fucoidan）是一類硫酸化多糖，存在于褐藻中，首先由kylin在1913年從掌狀海帶中提取出來。kylin將提取物水解后分離出l-巖藻糖，他將這種多糖命名為fucoidin，現(xiàn)根據(jù)多糖的命名原則一般定名為fucoidan，中文名稱為墨角藻多糖、巖藻多糖、巖藻聚糖、巖藻聚糖硫酸酯、褐藻糖膠或褐藻多糖硫酸酯?，F(xiàn)在人們對(duì)褐藻多糖硫酸酯的組成有較為清晰的了解，它是一類化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜的多糖，以巖藻糖和硫酸基為主，隨著藻的種類不同還含有半乳糖、木糖、糖醛酸等其他成分。海帶fucoidan由巖藻糖、半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸、阿拉伯糖等單糖組成。以巖藻糖和半乳糖為主，巖藻糖與半乳糖大概在3:1。

關(guān)于海帶褐藻多糖硫酸酯的結(jié)構(gòu)，多數(shù)的研究資料表明海帶褐藻多糖硫酸酯主要是以α-(1→3)連接的l-巖藻糖組成，硫酸化發(fā)生在c4或c2位，而且部分研究顯示存在部分(1→2)連接的l-巖藻糖作為側(cè)鏈。與上述中繩藻褐藻多糖硫酸酯結(jié)構(gòu)有相似之處。但繩藻中有部分乙?；?。而且不同取代基團(tuán)所占的比例也不一樣。當(dāng)然分子中還存在半乳糖、木糖、鼠李糖等單糖，半乳糖可能參與了主鏈的組成，而木糖、鼠李糖等是以側(cè)鏈的形式存在。

褐藻多糖硫酸酯具有抗凝血、提高免疫力、抗腫瘤、降血糖、抗輻射、抑制腹水瘤等活性，cn1547478a則公開了其在治療粘連、關(guān)節(jié)炎和牛皮癬中的用途。已將褐藻多糖硫酸酯開發(fā)成為治療腎功能衰竭的治療藥物，褐藻多糖硫酸酯作為保健品和化妝品原料也有巨大的發(fā)展前景。已有多篇文獻(xiàn)公開了褐藻多糖硫酸酯的制備方法及其制藥用途。現(xiàn)有方法中常用電滲析工藝對(duì)海帶濾液進(jìn)行脫鹽處理，但是電滲析工藝存在以下缺陷：

（1）易發(fā)生透膜擴(kuò)散現(xiàn)象和串水現(xiàn)象：在濃水室循環(huán)增濃的濃水，與其淡水相比，兩者濃度相差很大，產(chǎn)生了很高的滲透壓，易于發(fā)生跨膜遷移，使得淡水的水質(zhì)變壞，濃水的濃度降低。電滲析器的濃淡水密封是依靠離子交換膜的彈性來密封，當(dāng)電滲析器拆洗后，再次重裝，發(fā)生離子交換膜的錯(cuò)位，使密封不嚴(yán)，易導(dǎo)致濃水和淡水串流，影響最終出水水質(zhì)。

（2）電滲析器的脫鹽率不高：以制備純水用的電滲析器為例，一般電滲析器的脫鹽率約為70％左右，近年來發(fā)明的無極水全自控電滲析器，其脫鹽率為95％以上，即電導(dǎo)率小于1000μs/cm的進(jìn)水，出水電導(dǎo)率在50μs/cm左右。

（3）發(fā)生濃差極化反應(yīng)，無法進(jìn)行深度處理：在電滲析工藝處理的水中導(dǎo)電離子很少的情況下，會(huì)在電滲析器內(nèi)發(fā)生濃差極化現(xiàn)象，水解離成h⁺和oh^-，來補(bǔ)充導(dǎo)電離子，這一來浪費(fèi)了大量的電，二來使得水質(zhì)不能得到提高。

（4）電滲析工藝排水無法得到充分利用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝，它包括以下步驟：

s1.制備濾液：將海帶加水浸泡會(huì)經(jīng)堿凝聚、酸溶、醇沉、水酸溶解后過濾，得濾液；

s2.超濾：將濾液打入超濾膜組，濾液經(jīng)超濾膜組去除雜質(zhì)鹽和水，得濃縮物；其中，

所述超濾膜組由一級(jí)超濾膜和二級(jí)超濾膜組成，所述一級(jí)超濾膜的膜孔徑為50～100nm，所述二級(jí)超濾膜的膜孔徑為20～80nm；

s3.洗濾：將濃縮物加水洗濾得洗濾液，洗濾至洗濾液的電導(dǎo)率≤1500us/cm；

s4.后處理：洗濾液進(jìn)行膜濃縮，濃縮至洗濾液原體積的5～10倍，再進(jìn)行蒸發(fā)和噴霧干燥，制得褐藻多糖硫酸酯。

進(jìn)一步地，步驟s1所述制備濾液的具體操作為：

（1）堿凝聚：干海帶切段后加水浸泡2～6h，取浸泡液并加堿調(diào)至ph值為11～12，生成堿凝聚物；

（2）酸溶：板框?yàn)V布過濾堿凝聚物，固體加酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值至3～4；二次板框過濾，取濾液，調(diào)整濾液的ph值為4～5；二次濾液進(jìn)行三次板框過濾；

（3）醇沉：經(jīng)三次板框過濾的濾液中加乙醇調(diào)至濾液中乙醇質(zhì)量百分比濃度為70%，生成沉淀，沉淀物用水和鹽酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值為2～3，攪拌7.5～8.5h，靜置10～14h，硅藻土真空轉(zhuǎn)鼓吸附過濾，得濾液。

進(jìn)一步地，所述超濾膜組的操作方式采取自動(dòng)控制連續(xù)處理方式。

進(jìn)一步地，所述洗濾為在線自動(dòng)洗濾。

進(jìn)一步地，所述堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸鉀中的任意一種。

進(jìn)一步地，所述酸溶所用酸為鹽酸、硫酸或硝酸中的任意一種。

進(jìn)一步地，步驟s4中所述膜濃縮的膜孔徑為20～80nm。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明采用超濾膜組進(jìn)行兩次超濾，克服了傳統(tǒng)采用電滲析存在的串水現(xiàn)象，一般電滲析脫鹽率為75～80%，而本發(fā)明方法脫鹽率可達(dá)95%，因此，分離精度高，且為純物理過程，無化學(xué)反應(yīng)，無二次污染。本發(fā)明方法低溫運(yùn)行，特別適合熱敏性高的成分分離；分離工藝沒有蒸汽消耗，電耗只是電滲析的二分之一，顯著降低了運(yùn)行成本；超濾膜組的操作方式采取自動(dòng)控制連續(xù)處理，洗濾為在線自動(dòng)洗濾，因此，自動(dòng)化程度高，降低了勞動(dòng)強(qiáng)度和減少勞動(dòng)成本。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于以下所述：

實(shí)施例1：一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝，它包括以下步驟：

s1.制備濾液：將海帶加水浸泡會(huì)經(jīng)堿凝聚、酸溶、醇沉、水酸溶解后過濾，得濾液；

（1）堿凝聚：干海帶切段后加水浸泡2h，取浸泡液并加氫氧化鈉調(diào)至ph值為11，生成堿凝聚物；

（2）酸溶：板框?yàn)V布過濾堿凝聚物，固體加鹽酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值至3～4；二次板框過濾，取濾液，調(diào)整濾液的ph值為4；二次濾液進(jìn)行三次板框過濾；

（3）醇沉：經(jīng)三次板框過濾的濾液中加乙醇調(diào)至濾液中乙醇質(zhì)量百分比濃度為70%，生成沉淀，沉淀物用水和鹽酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值為2，攪拌7.5h，靜置10h，硅藻土真空轉(zhuǎn)鼓吸附過濾，得濾液。

s2.超濾：將濾液打入超濾膜組，濾液經(jīng)超濾膜組去除雜質(zhì)鹽和水，得濃縮物；其中，所述超濾膜組由一級(jí)超濾膜和二級(jí)超濾膜組成，所述一級(jí)超濾膜的膜孔徑為50nm，所述二級(jí)超濾膜的膜孔徑為80nm；所述超濾膜組的操作方式采取自動(dòng)控制連續(xù)處理方式；

s3.洗濾：將濃縮物加水洗濾得洗濾液，洗濾至洗濾液的電導(dǎo)率≤1500us/cm；所述洗濾為在線自動(dòng)洗濾；

s4.后處理：洗濾液進(jìn)行膜濃縮，所述膜濃縮的膜孔徑為20nm，濃縮至洗濾液原體積的5倍，再進(jìn)行蒸發(fā)和噴霧干燥，制得褐藻多糖硫酸酯。

實(shí)施例2：一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝，它包括以下步驟：

s1.制備濾液：將海帶加水浸泡會(huì)經(jīng)堿凝聚、酸溶、醇沉、水酸溶解后過濾，得濾液；

（1）堿凝聚：干海帶切段后加水浸泡6h，取浸泡液并加氫氧化鉀調(diào)至ph值為12，生成堿凝聚物；

（2）酸溶：板框?yàn)V布過濾堿凝聚物，固體加硫酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值至3～4；二次板框過濾，取濾液，調(diào)整濾液的ph值為4～5；二次濾液進(jìn)行三次板框過濾；

（3）醇沉：經(jīng)三次板框過濾的濾液中加乙醇調(diào)至濾液中乙醇質(zhì)量百分比濃度為70%，生成沉淀，沉淀物用水和鹽酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值為3，攪拌8.5h，靜置14h，硅藻土真空轉(zhuǎn)鼓吸附過濾，得濾液。

s2.超濾：將濾液打入超濾膜組，濾液經(jīng)超濾膜組去除雜質(zhì)鹽和水，得濃縮物；其中，所述超濾膜組由一級(jí)超濾膜和二級(jí)超濾膜組成，所述一級(jí)超濾膜的膜孔徑為100nm，所述二級(jí)超濾膜的膜孔徑為20nm；所述超濾膜組的操作方式采取自動(dòng)控制連續(xù)處理方式；

s3.洗濾：將濃縮物加水洗濾得洗濾液，洗濾至洗濾液的電導(dǎo)率≤1500us/cm；所述洗濾為在線自動(dòng)洗濾；

s4.后處理：洗濾液進(jìn)行膜濃縮，所述膜濃縮的膜孔徑為80nm，濃縮至洗濾液原體積的10倍，再進(jìn)行蒸發(fā)和噴霧干燥，制得褐藻多糖硫酸酯。

實(shí)施例3：一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝，它包括以下步驟：

s1.制備濾液：將海帶加水浸泡會(huì)經(jīng)堿凝聚、酸溶、醇沉、水酸溶解后過濾，得濾液；

（1）堿凝聚：干海帶切段后加水浸泡4h，取浸泡液并加碳酸鈉調(diào)至ph值為11，生成堿凝聚物；

（2）酸溶：板框?yàn)V布過濾堿凝聚物，固體加硫酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值至3.5；二次板框過濾，取濾液，調(diào)整濾液的ph值為4；二次濾液進(jìn)行三次板框過濾；

（3）醇沉：經(jīng)三次板框過濾的濾液中加乙醇調(diào)至濾液中乙醇質(zhì)量百分比濃度為70%，生成沉淀，沉淀物用水和鹽酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值為2，攪拌8h，靜置12h，硅藻土真空轉(zhuǎn)鼓吸附過濾，得濾液。

s2.超濾：將濾液打入超濾膜組，濾液經(jīng)超濾膜組去除雜質(zhì)鹽和水，得濃縮物；其中，

所述超濾膜組由一級(jí)超濾膜和二級(jí)超濾膜組成，所述一級(jí)超濾膜的膜孔徑為60nm，所述二級(jí)超濾膜的膜孔徑為40nm；所述超濾膜組的操作方式采取自動(dòng)控制連續(xù)處理方式；

s3.洗濾：將濃縮物加水洗濾得洗濾液，洗濾至洗濾液的電導(dǎo)率≤1500us/cm；所述洗濾為在線自動(dòng)洗濾；

s4.后處理：洗濾液進(jìn)行膜濃縮，所述膜濃縮的膜孔徑為60nm，濃縮至洗濾液原體積的6.5倍，再進(jìn)行蒸發(fā)和噴霧干燥，制得褐藻多糖硫酸酯。

實(shí)施例4：一種褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝，它包括以下步驟：

s1.制備濾液：將海帶加水浸泡會(huì)經(jīng)堿凝聚、酸溶、醇沉、水酸溶解后過濾，得濾液；

（1）堿凝聚：干海帶切段后加水浸泡2～6h，取浸泡液并加碳酸鉀調(diào)至ph值為12，生成堿凝聚物；

（2）酸溶：板框?yàn)V布過濾堿凝聚物，固體加硝酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值至4；二次板框過濾，取濾液，調(diào)整濾液的ph值為5；二次濾液進(jìn)行三次板框過濾；

（3）醇沉：經(jīng)三次板框過濾的濾液中加乙醇調(diào)至濾液中乙醇質(zhì)量百分比濃度為70%，生成沉淀，沉淀物用水和鹽酸溶解，并調(diào)整溶液的ph值為3，攪拌7.5h，靜置13h，硅藻土真空轉(zhuǎn)鼓吸附過濾，得濾液。

s2.超濾：將濾液打入超濾膜組，濾液經(jīng)超濾膜組去除雜質(zhì)鹽和水，得濃縮物；其中，

所述超濾膜組由一級(jí)超濾膜和二級(jí)超濾膜組成，所述一級(jí)超濾膜的膜孔徑為80nm，所述二級(jí)超濾膜的膜孔徑為40nm；所述超濾膜組的操作方式采取自動(dòng)控制連續(xù)處理方式；

s3.洗濾：將濃縮物加水洗濾得洗濾液，洗濾至洗濾液的電導(dǎo)率≤1500us/cm；所述洗濾為在線自動(dòng)洗濾；

s4.后處理：洗濾液進(jìn)行膜濃縮，所述膜濃縮的膜孔徑為50nm，濃縮至洗濾液原體積的9倍，再進(jìn)行蒸發(fā)和噴霧干燥，制得褐藻多糖硫酸酯。