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一種HPV分型檢測的核酸組合及其應(yīng)用和試劑盒的制作方法

文檔序號:12413216閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種HPV分型檢測的核酸組合,其特征在于,其包括用于檢測HPV 16亞型的第一核酸組合和/或用于檢測HPV 18亞型的第二核酸組合;

所述第一核酸組合包括SEQ ID NO.1-2所示的第一引物對和SEQ ID NO.3所示的第一捕獲探針,所述第一引物對的上游引物的5’端或下游引物的5’端標(biāo)記有用于結(jié)合第一催化酶的第一親和物;

所述第二核酸組合包括SEQ ID NO.4-5所示的第二引物對和SEQ ID NO.6所示的第二捕獲探針,所述第二引物對的上游引物的5’端或下游引物的5’端標(biāo)記有用于結(jié)合第二催化酶的第二親和物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPV分型檢測的核酸組合,其特征在于,所述第一親和物為地高辛、異硫氰酸熒光素和生物素中的一種;所述第二親和物為地高辛、異硫氰酸熒光素和生物素中的一種。

3.權(quán)利要求1或2所述的HPV分型檢測的核酸組合在制備用于HPV分型檢測的試劑盒中的應(yīng)用。

4.一種試劑盒,其特征在于,其包括權(quán)利要求1或2所述的HPV分型檢測的核酸組合。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括用于將所述第一捕獲探針或所述第二捕獲探針固定至檢測孔板的固定物,所述固定物包括導(dǎo)電聚合物和離子化合物;

所述導(dǎo)電聚合物為選自吡咯、苯胺和噻吩中的任意一種;

所述離子化合物為選自氯化鈉和氯化鉀中的任意一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括所述催化酶,所述催化酶是帶有標(biāo)記物的辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶,所述標(biāo)記物用于與所述第一親和物或所述第二親和物結(jié)合,所述標(biāo)記物為地高辛抗體、異硫氰酸熒光素抗體以及鏈霉親和素中的一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括所述催化酶的底物;

當(dāng)所述催化酶為所述辣根過氧化物酶時,所述底物是TMB、ABTS和OPD中的任意一種;

當(dāng)所述催化酶為所述堿性磷酸酶時,所述底物是BCIP和NBT的組合物、對硝基苯磷酸鹽、4-硝基苯磷酸二鈉、萘酚AS-BI磷酸鹽以及萘酚-AS-MX-磷酸鹽中的任意一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括洗液A和洗液B,所述洗液A是含SDS的SSC緩沖液,所述洗液B是含Tween20的PBS緩沖液。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括PCR反應(yīng)緩沖液、dNTPs、Taq DNA聚合酶和Mg2+中的一種或多種。

10.權(quán)利要求1或2所述的HPV分型檢測的核酸組合在HPV分型檢測中的應(yīng)用。

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