本發(fā)明涉及一種印楝素提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種亞臨界萃取印楝素的方法。

背景技術(shù)：

印楝是一種速生落葉喬木的名稱，種子和樹皮都可入藥。印楝是2013年世界上公認的理想的殺蟲植物。印楝素存在于印楝樹的種子、樹葉及樹皮中，正是由于它的存在，使印楝素具有驅(qū)蟲治病的神奇功能。迄今，印楝中已發(fā)現(xiàn)了100多種化合物，至少有70種化合物具有生物活性，它們?yōu)槎祁?、三萜類、戊三萜類和非萜類化合物。主要為印度苦楝子素、苦楝三醇和印楝素等，這些提取物對昆蟲有拒食、干擾產(chǎn)卵、干擾昆蟲變異，使其無法蛻變?yōu)槌上x、驅(qū)避幼蟲及抑制其生長的作用而達到殺蟲目的。印楝素是從印楝樹種里提取的一種生物殺蟲劑，可防治200多種農(nóng)、林、倉儲和室內(nèi)衛(wèi)生害蟲，是世界公認的廣譜、高效、低毒、易降解、無殘留的殺蟲劑。印楝素是一類從印楝中分離出來活性最強的化合物，它屬于四環(huán)三萜類。印楝素可以分為印楝素-a、b、c、d、e、f、g、i共8種，印楝素-a就是通常所指的印楝素。經(jīng)現(xiàn)代研究表明，從印楝果實中提取的印楝素等成分是目前世界公認的廣譜、高效、低毒、易降解、無殘留的殺蟲劑且沒有抗藥性，對幾乎所有植物害蟲，室內(nèi)臭蟲、跳蚤、蒼蠅、蚊子等都具有驅(qū)殺效果，而對人畜和周圍環(huán)境無任何污染，同時印楝對許多疾病還具有醫(yī)療作用，在醫(yī)藥中將有更廣泛的應(yīng)用。目前國內(nèi)采用都是常規(guī)提取，去油困難，由于印楝素不穩(wěn)定性易分解，對溫度要求較高，所以提取率低，有效成分損失大，后處理困難。而超臨界二氧化碳萃取因設(shè)備設(shè)計制造成本和運行費用較高，由于壓力過大，處理量小，而且二氧化碳為非極性分子，對印楝素萃取率低，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種亞臨界萃取印楝素的方法，以解決現(xiàn)有萃取技術(shù)萃取率低的技術(shù)問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：一種亞臨界萃取印楝素的方法，包括以下步驟：

步驟(1)：將印楝素種子原料進行粉碎至60～100目，并投入真空環(huán)境的萃取釜中，向釜中加入萃取劑四氟乙烷，并于溫度為30～40℃、壓強為0.8～1mpa的條件下進行第一次萃取，得到萃取液和料渣；

步驟(2)：向步驟(1)中萃取釜中注入80％乙醇，抽真空至150pa，注入氮氣至壓力達到0.8～1mpa進行第二次萃取，萃取溫度30～40℃；將步驟(1)中得到的萃取液放入分離釜中于溫度為40～60℃、壓強為0.6～0.8mpa的條件下進行升溫減壓分離得到萃取液，合并萃取釜和分離釜中萃取得到的萃取液；

步驟(3)：將步驟(2)中合并的萃取液于溫度為40～60℃、壓強為0.09～0.095mpa的條件下減壓濃縮至80％乙醇含量低于5％，再進行真空干燥至含水率小于5％，即得到印楝素i。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

(1)本發(fā)明采用亞臨界萃取技術(shù)，將萃取劑于低溫、低壓近似于真空的亞臨界流體狀態(tài)下對原料中的印楝素進行萃取，萃取率達到80％以上。

(2)本發(fā)明在提取過程中能得到兩種含量不同的印楝素(i、ii、iii)，印楝素i的含量在15以上、其含水率低于5％，印楝素ii的含量在45以上、其含水率低于5％，印楝素iii的含量在25以上、其含水率低于5％，生產(chǎn)時可滿足各種含量需求的印楝素。

(3)本發(fā)明采用沸點較低的萃取劑，易于回收，減少了后處理過程，且全程中溫度始終控制在40℃以下，極大降低了生產(chǎn)成本。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細描述，本部分的描述僅是示范性和解釋性，不應(yīng)對本發(fā)明的保護范圍有任何的限制作用。

本發(fā)明的一種亞臨界萃取印楝素的方法，包括以下步驟：

步驟(1)：將印楝素種子原料進行粉碎至60～100目，并投入真空環(huán)境的萃取釜中，向釜中加入萃取劑四氟乙烷，并于溫度為30～40℃、壓強為0.8～1mpa的條件下進行第一次萃取，得到萃取液和料渣；

步驟(2)：向步驟(1)中萃取釜中注入80％乙醇，抽真空至150pa，注入氮氣至壓力達到0.8～1mpa進行第二次萃取，萃取溫度30～40℃；將步驟(1)中得到的萃取液放入分離釜中于溫度為40～60℃、壓強為0.6～0.8mpa的條件下進行升溫減壓分離得到萃取液，合并萃取釜和分離釜中萃取得到的萃取液；

步驟(3)：將步驟(2)中合并的萃取液于溫度為40～60℃、壓強為0.09～0.095mpa的條件下減壓濃縮至80％乙醇含量低于5％，再進行真空干燥至含水率小于5％，即得到印楝素i。

進一步地，將步驟(3)中得到的印楝素i溶解于30％的乙醇水溶液中得到印楝素溶液，將印楝素溶液用吸附柱洗脫，吸附飽和后用50％的乙醇水溶液解吸直至吸附柱中印楝素含量低于40％，并于溫度為40～60℃、壓強為0.09～0.095mpa的條件下進行真空干燥至含水率小于5％，即得到印楝素ii。

進一步地，將所述解吸液繼續(xù)解吸直至印楝素完全解析，并于溫度為40～60℃、壓強為0.09～0.095mpa的條件下進行真空干燥至含水率小于5％，即得到印楝素iii。

進一步地，所述步驟(1)中，所述第一次萃取是先在萃取釜中于溫度為30～40℃、壓強為0.8～1mpa的條件下靜態(tài)萃取30～40min，再將萃取釜中減壓至0.6～0.8mpa，并采用空氣壓縮機使萃取釜中進行循環(huán)流動萃取20～30min。

進一步地，所述步驟(2)中，所述80％乙醇的用量為料渣重量的2倍。

實施例1

(1)取100kg印楝素種子進行冷壓榨去油成料餅(經(jīng)檢測印楝素的含量為0.27％)，并將料餅粉碎至60～100目，投入萃取釜中，萃取釜經(jīng)抽真空降至150pa以下，排盡釜內(nèi)空氣，然后從儲罐內(nèi)往萃取釜中打入四氟乙烷液體至淹沒原料，于溫度30℃、壓強0.8mpa下靜壓萃取30min；將萃取釜中壓強降至0.6mpa，打開空氣壓縮機進行動態(tài)萃取，使四氟乙烷液體在萃取釜及分離釜中循環(huán)流動萃取20min；將萃取釜中四氟乙烷及萃取液通入分離釜中，然后在分離釜中于溫度為40℃、壓強為0.6mpa的條件下進行升溫減壓分離得到萃取液，啟動空壓機抽取氣態(tài)四氟乙烷直至分離釜中處于接近真空狀態(tài)，回收四氟乙烷氣體，收集萃取液；(2)向萃取釜中注入料渣2倍重量的80％乙醇，抽真空至150pa，注入氮氣至壓力達到0.8mpa，進行加壓萃取，萃取2次，每次30min，萃取溫度30℃，合并步驟(1)中萃取液；(3)將步驟(2)中得到的萃取液在壓力為0.09～0.095mpa，溫度為40℃條件下真空干燥至含水率小于5％，得到塊狀物，進行粉碎即得到1.45kg印楝素i，其中印楝素含量為15.8％，提取率84.9％。

制備印楝素ii和印楝素iii：a.將印楝素i溶解于30％乙醇水溶液中，經(jīng)配成濃度2.2mg/ml的印楝素溶液；b.上柱：將a中的印楝素溶液上經(jīng)過預(yù)處理的大孔樹脂柱，上柱速度為1～2bv/h，共處理6bv印楝素溶液；c.洗脫：待b中吸附飽和后以50％乙醇溶液解吸，流速為1bv/h，hplc在線檢測，直至印楝素含量低于40％，收集洗脫液ii，繼續(xù)解吸，直至印楝素完全解吸，收集洗脫液iii；將收集的洗脫液分別得到印楝素濃縮液ii和濃縮液iii，將濃縮液ii和濃縮液iii分別置于真空干燥機內(nèi)，在壓力0.09～0.095mpa，溫度40℃條件下減壓濃縮至80％乙醇含量低于5％，再進行真空干燥至含水率4.5％，得塊狀物，進行粉碎可得到0.21kg印楝素ii和0.15kg印楝素iii，其中印楝素ii含量為47.8％，印楝素收率89.2％，其中印楝素iii含量為27.1％，含水率4.8％，印楝素收率89.2％。(其中，印楝素的收率計算公式為：印楝素收率＝(所得印楝素ii重量×ii含量+所得印楝素iii重量×iii含量)/(印楝素i重量×i含量)×100％。

實施例2

(1)取100kg印楝素種子進行冷壓榨去油成料餅(經(jīng)檢測印楝素的含量為0.27％)，并將料餅粉碎至60～100目，投入萃取釜中，萃取釜經(jīng)抽真空降至150pa以下，排盡釜內(nèi)空氣，然后從儲罐內(nèi)往萃取釜中打入四氟乙烷液體至淹沒原料，于溫度40℃、壓強1mpa下靜壓萃取30min；將萃取釜中四氟乙烷及萃取液通入分離釜中，然后在分離釜中于溫度為50℃、壓強為0.8mpa的條件下進行升溫減壓分離得到萃取液，收集萃取液；(3)將步驟(2)中得到的萃取液在壓力為0.09～0.095mpa，溫度為50℃條件下真空干燥至含水率4.5％，得到塊狀物，進行粉碎即得到1.35kg印楝素i，其中印楝素含量為16.8％，提取率84.0％。

制備印楝素ii和印楝素iii：a.將印楝素i溶解于30％乙醇水溶液中，經(jīng)配成濃度2.2mg/ml的印楝素溶液；b.上柱：將a中的印楝素溶液上經(jīng)過預(yù)處理的大孔樹脂柱，上柱速度為1～2bv/h，共處理6bv印楝素溶液；c.洗脫：待b中吸附飽和后以50％乙醇溶液解吸，流速為1bv/h，hplc在線檢測，直至印楝素含量低于40％，收集洗脫液ii，繼續(xù)解吸，直至印楝素完全解吸，收集洗脫液iii；將收集的洗脫液分別得到印楝素濃縮液ii和濃縮液iii，將濃縮液ii和濃縮液iii分別置于真空干燥機內(nèi)，在壓力0.09～0.095mpa，溫度40℃條件下減壓濃縮至80％乙醇含量低于5％，再進行真空干燥得塊狀物，進行粉碎可得到0.22kg印楝素ii和0.18kg印楝素iii，其中印楝素ii含量為45.9％，含水率4.1％，印楝素收率88.3％，其中印楝素iii含量為26.3％，含水率3.5％，印楝素收率89.0％。(其中，印楝素的收率計算公式為：印楝素收率＝(所得印楝素ii重量×ii含量+所得印楝素iii重量×iii含量)/(印楝素i重量×i含量)×100％。

實施例3

(1)取100kg印楝素種子進行冷壓榨去油成料餅(經(jīng)檢測印楝素的含量為0.27％)，并將料餅粉碎至60～100目，投入萃取釜中，萃取釜經(jīng)抽真空降至150pa以下，排盡釜內(nèi)空氣，然后從儲罐內(nèi)往萃取釜中打入四氟乙烷液體至淹沒原料，于溫度35℃、壓強1mpa下靜壓萃取30min；將萃取釜中壓強降至0.7mpa，打開空氣壓縮機進行動態(tài)萃取，使四氟乙烷液體在萃取釜及分離釜中循環(huán)流動萃取20min；將萃取釜中四氟乙烷及萃取液通入分離釜中，然后在分離釜中于溫度為60℃、壓強為0.6mpa的條件下進行升溫減壓分離得到萃取液，啟動空壓機抽取氣態(tài)四氟乙烷直至分離釜中處于接近真空狀態(tài)，回收四氟乙烷氣體，收集萃取液；(2)向萃取釜中注入料渣2倍重量的80％乙醇，抽真空至150pa，注入氮氣至壓力達到1mpa，進行加壓萃取，萃取2次，每次30min，萃取溫度40℃，合并步驟(1)中萃取液；(3)將步驟(2)中得到的萃取液在壓力為0.09～0.095mpa，溫度為60℃條件下真空干燥至含水率3.9％，得到塊狀物，進行粉碎即得到1.38kg印楝素i，其中印楝素含量為16.1％，提取率82.3％。

制備印楝素ii和印楝素iii：a.將印楝素i溶解于30％乙醇水溶液中，經(jīng)配成濃度2.2mg/ml的印楝素溶液；b.上柱：將a中的印楝素溶液上經(jīng)過預(yù)處理的大孔樹脂柱，上柱速度為1～2bv/h，共處理6bv印楝素溶液；c.洗脫：待b中吸附飽和后以50％乙醇溶液解吸，流速為1bv/h，hplc在線檢測，直至印楝素含量低于40％，收集洗脫液ii，繼續(xù)解吸，直至印楝素完全解吸，收集洗脫液iii；將收集的洗脫液分別得到印楝素濃縮液ii和濃縮液iii，將濃縮液ii和濃縮液iii分別置于真空干燥機內(nèi)，在壓力0.09～0.095mpa，溫度40℃條件下減壓濃縮至80％乙醇含量低于5％，再進行真空干燥得塊狀物，進行粉碎可得到0.19kg印楝素ii和0.17kg印楝素iii，其中印楝素ii含量為45.4％，含水率3.8％，印楝素收率83.4％，其中印楝素iii含量為28.2％，含水率4.3％，印楝素收率83.4％。(其中，印楝素的收率計算公式為：印楝素收率＝(所得印楝素ii重量×ii含量+所得印楝素iii重量×iii含量)/(印楝素i重量×i含量)×100％。

以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例，并非對本發(fā)明的技術(shù)范圍作出任何限制，故凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何細微修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明的技術(shù)方案范圍內(nèi)。