本發(fā)明涉及一種枸杞葉芽多糖的制備方法及其在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

多糖，又稱多聚糖，是一類由十個(gè)以上的單糖分子通過(guò)脫水聚合而成的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的高分子化合物。多糖是自然界中種類最豐富、含量最多的生物大分子，與蛋白質(zhì)、核酸、脂類一起被稱為生命活動(dòng)必需的四大基本物質(zhì)，廣泛存在于動(dòng)物、植物和微生物的細(xì)胞內(nèi)外。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，多糖由于其種類和生物功能的多樣性而受到越來(lái)越多的關(guān)注。研究表明，多糖有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、降血糖、防血脂和調(diào)節(jié)免疫功能等效果，有很高的利用價(jià)值及應(yīng)用前景。

枸杞葉也叫天精草，是一種重要的藥食同源植物，在寧夏、廣東等地常將枸杞葉作為春季的新鮮蔬菜食用。枸杞葉芽營(yíng)養(yǎng)豐富，有研究表明枸杞葉中含有多糖類、黃酮類、生物堿、萜類和甾醇類等多種生物活性的物質(zhì)，并含有大量的礦物質(zhì)、微量元素和豐富的蛋白質(zhì)及20多種氨基酸(包括人體必須的8種氨基酸)，且其營(yíng)養(yǎng)成分明顯優(yōu)于枸杞果。《本草綱目》中記載枸杞葉有補(bǔ)虛益精、堅(jiān)筋耐老、養(yǎng)肝明目、散瘡腫、除熱毒、去皮骨節(jié)間風(fēng)和補(bǔ)五勞七傷等功效。而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)則證明枸杞葉具有降低血糖、血壓、血脂、預(yù)防心血管疾病、白內(nèi)障，抗氧化、疲勞、癌癥、衰老，防止微生物感染，清除自由基，促進(jìn)益生菌細(xì)胞生長(zhǎng)，耐缺氧等眾多功能。

然而，由于關(guān)注度低、技術(shù)限制等原因，枸杞葉芽還沒(méi)有得到很好的利用，其深加工產(chǎn)品也較少。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種枸杞葉芽多糖的制備方法，能夠大大提高了葉芽多糖的得率和純度，所得的枸杞葉芽多糖可以用于抑制dpp4酶的活性以治療2型糖尿病，從而能夠作為保健品食用；

本發(fā)明的目的之二是提供一種上述枸杞葉芽多糖在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。

一種枸杞葉芽多糖的制備方法，其特別之處在于，包括如下步驟：

(1)取枸杞鮮葉芽烘干；

(2)粉碎至60-80目；

(3)將得到的枸杞葉芽干粉按照料液比例為1g：10ml-1g：30ml，置入提取罐中；

(4)控制提取溫度50-90℃，提取時(shí)間4h-10h；

(5)將提取液移至濃縮罐中，控制濃縮溫度50-80℃，濃縮壓力-0.08--0.09mpa，濃縮時(shí)間6-8h，濃縮至原液體積的10-40％；

(6)將濃縮液置入醇沉灌中，加入4倍濃縮液體積的濃度為95％的食用酒精，過(guò)夜醇沉；

(7)去上清液，將醇沉后的物質(zhì)速凍，然后置于冷凍干燥機(jī)干燥至恒重，即得枸杞葉芽粗多糖；

(8)初步純化，具體是將凍干后得到的枸杞葉芽粗多糖粉末溶于蒸餾水，調(diào)節(jié)ph為9-10，充分溶解后加入0.03％的堿性蛋白酶，在40-55℃酶解4-5h，得到的溶液經(jīng)微濾后進(jìn)行超濾，控制超濾膜分子截留量為10kda，收集分子量大于10kda的溶液，將該溶液采用步驟(6)的方法再次用乙醇沉淀并采用步驟(7)的方法凍干后即得枸杞葉芽多糖。

進(jìn)一步的，包括如下步驟：將步驟(8)得到的枸杞葉芽多糖，進(jìn)行如下處理：(9)取deae-cellulose52經(jīng)預(yù)處理后裝入60cm×2.6cm層析柱中，用去離子水過(guò)夜平衡，控制流速為1ml/min，將枸杞葉多糖粉末0.5g用去離子水溶解后加入到層析柱中，然后依次用去離子水、0.05mol/l的nacl溶液、0.1mol/l的nacl溶液、0.2mol/l的nacl溶液、0.4mol/l的nacl溶液洗脫2-3個(gè)柱體積，控制流速為1ml/min，分管收集，每管10ml，用苯酚硫酸法測(cè)定每管中的糖含量，并以吸光度為縱坐標(biāo)、管數(shù)為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線，將同一洗脫峰中的溶液合并，得到合并液體體積，超濾除鹽并濃縮，利用超濾的方法，加入合并液9倍體積的去離子水進(jìn)行超濾，超濾膜分子截留量為10kda，收集分子量大于10kda的溶液，然后將此部分體積濃縮為原來(lái)的20％，再次根據(jù)權(quán)利要求1中記載的步驟(6)的方法進(jìn)行醇沉，根據(jù)權(quán)利要求1中記載的步驟(7)的方法凍干得到5種多糖，分別命名為lblp-1、lblp-2、lblp-3、lblp-4、lblp-5。

進(jìn)一步的，將步驟(9)得到的5種多糖，進(jìn)行如下處理：(10)取sephadexg-100經(jīng)預(yù)處理后裝入60cm×2.6cm層析柱中，蒸餾水過(guò)夜平衡，控制流速為1ml/min，分別取5種多糖0.1g分別充分溶解于蒸餾水后加到層析柱中，以1ml/min的流速洗脫2個(gè)柱體積并分管收集，每管收集10ml，并用苯酚硫酸法測(cè)定每管的糖含量，以吸光度為縱坐標(biāo)、管數(shù)為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線，將同一洗脫峰中的溶液合并，濃縮至原體積的20％-40％后根據(jù)步驟(6)醇沉并根據(jù)步驟(7)凍干得到枸杞葉芽多糖。

步驟(1)中烘干具體是指在50-65℃烘干6-10h。

步驟(7)中具體是速凍至-40℃，然后在冷凍干燥機(jī)-40℃干燥24h-48h。

步驟(8)中微濾具體是指先過(guò)0.8μm后過(guò)0.45μm濾膜，從而將大分子物質(zhì)去除防止堵塞超濾膜；步驟(8)中用naoh溶液調(diào)節(jié)ph。

步驟(1)中的枸杞采用寧杞9號(hào)枸杞。

一種用上述任意一種制備方法制備的枸杞葉芽多糖在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的有益效果是：提供了一種利用上述制備方法所得的枸杞葉芽多糖的用途，即可以用于抑制dpp4酶的活性，以治療2型糖尿病，從而作為保健品食用。另外，本發(fā)明的制備方法通過(guò)堿性蛋白酶水解、超濾、層析柱分離等方法將枸杞葉芽多糖進(jìn)行純化，綜合考慮了枸杞葉芽多糖的得率和純度，從而大大提高了葉芽多糖的得率和純度。

附圖說(shuō)明

圖1是枸杞葉多糖經(jīng)deae-cellulose52分離的洗脫曲線(苯酚硫酸法檢測(cè))；

圖2是經(jīng)deae-cellulose52分離后得到的lblp-1的洗脫曲線(苯酚硫酸法檢測(cè))；

圖3是經(jīng)deae-cellulose52分離后得到的lblp-2的洗脫曲線(苯酚硫酸法檢測(cè))；

圖4是經(jīng)deae-cellulose52分離后得到的lblp-3的洗脫曲線(苯酚硫酸法檢測(cè))；

圖5是經(jīng)deae-cellulose52分離后得到的lblp-4的洗脫曲線(苯酚硫酸法檢測(cè))；

圖6是枸杞葉多糖lblp-1的分子量測(cè)定圖(hpsec)；

圖7是枸杞葉多糖lblp-3的分子量測(cè)定圖(hpsec)；

圖8是枸杞葉多糖lblp-5的分子量測(cè)定圖(hpsec)；

圖9是阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖7種單糖標(biāo)準(zhǔn)品的氣相色譜圖；

圖10是粗多糖經(jīng)水解和硅烷化后的氣相色譜圖(其中：1阿拉伯糖，2鼠李糖，3核糖，4木糖，5甘露糖，6半乳糖，7葡萄糖)；

圖11是lblp-1經(jīng)水解和硅烷化后的氣相色譜圖(其中：1阿拉伯糖，2核糖)；

圖12是lblp-3經(jīng)水解和硅烷化后的氣相色譜圖(其中：1阿拉伯糖，2鼠李糖，3核糖，4木糖，6半乳糖，7葡萄糖)；

圖13是lblp-5經(jīng)水解和硅烷化后的氣相色譜圖(其中：1阿拉伯糖，2鼠李糖，3核糖，4木糖，6半乳糖，7葡萄糖)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種枸杞葉芽多糖的制備方法并探究其用途。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了枸杞葉芽多糖的制備方法及其在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。包括以下步驟：

(1)原料處理：寧杞9號(hào)鮮葉芽50-65℃烘干6-10h；

(2)粉碎機(jī)粉碎：60-80目；

(3)料液：按照1g：10ml-1g：30ml的原料及純凈水比例，置入提取罐中；

(4)提取溫度：控制溫度50-90℃；

(5)提取時(shí)間:提取時(shí)間4h-10h；

(6)濃縮:將提取液轉(zhuǎn)移至濃縮罐中，濃縮溫度控制50-80℃，濃縮壓力-0.06-0.08mpa，濃縮時(shí)間6-8h，濃縮至原液體積的10-40％；

(7)將濃縮液置入醇沉灌中，用95％食用酒精調(diào)至酒精終濃度80％后過(guò)夜醇沉；

(8)去上清液后，將醇沉后的物質(zhì)速凍后，置冷凍干燥機(jī)，干燥24-48h，即得枸杞葉芽粗多糖；

(9)初步純化：將粗多糖溶于蒸餾水，naoh溶液調(diào)節(jié)ph為9-10，加入適量堿性蛋白酶，40℃酶解4h，溶液經(jīng)過(guò)濾后進(jìn)行超濾，超濾膜分子截留量為10kda，收集分子量大于10kda的溶液，再次用乙醇沉淀并干燥后得到純度較高的多糖粉末。

作為本發(fā)明—枸杞葉多糖的制備方法的改進(jìn)，將步驟(9)中得到的多糖粉末進(jìn)行以下步驟：

(10)deae-cellulose52離子交換層析柱分離：

deae-cellulose52經(jīng)預(yù)處理后裝入層析柱(60cm×2.6cm)中，用去離子水過(guò)夜平衡(流速為1ml/min)，將干燥的枸杞葉多糖粉末0.5g用去離子水溶解后加入到層析柱中，然后依次用去離子水、0.05、0.1、0.2、0.4mol/l的nacl溶液洗脫2-3個(gè)柱體積(流速為1ml/min)，分管收集，每管10ml。用苯酚硫酸法測(cè)定每管中的糖含量，并以吸光度為縱坐標(biāo)、管數(shù)為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線，將同一洗脫峰中的溶液合并，超濾除鹽并濃縮(超濾膜截留量為10kda)，再次醇沉凍干得到5種多糖，分別命名為lblp-1、lblp-2、lblp-3、lblp-4、lblp-5。

作為本發(fā)明，枸杞葉多糖制備方法的進(jìn)一步改進(jìn)，將步驟(10)中得到的各部分多糖進(jìn)行以下步驟：

(11)sephadexg-100層析柱分離：

sephadexg-100經(jīng)預(yù)處理后裝入層析柱(中60cm×2.6cm)，蒸餾水過(guò)夜平衡(流速為1ml/min)，將步驟(10)中得到的各部分多糖0.1g溶于蒸餾水后加到層析柱中，以1ml/min的流速洗脫2個(gè)柱體積并分管收集，每管收集10ml，并用苯酚硫酸法測(cè)定每管的糖含量，以吸光度為縱坐標(biāo)、管數(shù)為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線，將同一洗脫峰中的溶液合并，濃縮后醇沉并凍干得到枸杞葉芽多糖。

本發(fā)明同時(shí)還公開了利用上述制備方法所得的枸杞葉芽多糖在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用：用于抑制dpp4酶的活性，以治療2型糖尿病，從而可作為保健品食用。

本發(fā)明提供了枸杞葉芽多糖的制備方法及其治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，并通過(guò)堿性蛋白酶水解、超濾、層析柱分離等方法將枸杞葉芽多糖進(jìn)行純化，綜合考慮了枸杞葉芽多糖的得率和純度，大大提高了葉芽多糖的得率和純度。

本發(fā)明所得的枸杞葉芽多糖經(jīng)分離純化后得到5個(gè)組分(deae-cellulose52分離洗脫曲線如如圖1所示)：lblp-1、lblp-2、lblp-3、lblp-4、lblp-5。其中l(wèi)blp-2糖含量最少，且不能被乙醇沉淀；lblp-3糖含量最高，是枸杞葉多糖的主要組成成分；lblp-4在80％溶液中成膠狀物質(zhì)，質(zhì)地松散且上?。籰blp-5在80％乙醇中呈膠狀物質(zhì)，質(zhì)地緊密且下沉。枸杞葉中，粗多糖、lblp-1、lblp-3、lblp-4、lblp-5對(duì)dpp4均有抑制效果，且與其濃度成正相關(guān)，各組分的ic50分別為7.75mg/ml、0.11mg/ml、0.61mg/ml、31.94mg/ml、14.82mg/ml。

本發(fā)明同時(shí)還提供了枸杞葉芽多糖中各組分的結(jié)構(gòu)特征。經(jīng)deae-cellulose52分離后的多糖再用sephadexg-100進(jìn)行進(jìn)一步純化，其洗脫曲線如圖2所示。進(jìn)一步的，用gc、gc-ms、hpsec、nmr等分析枸杞葉多糖的結(jié)構(gòu)特征，發(fā)現(xiàn)lblp-1的重復(fù)單元為[→3)-α-d-ribf-(1→5)-α-l-arap-(1→3)-α-d-ribf-(1→]n(即由1,3鍵連接的α,d呋喃型核糖和1,5鍵連接的α,l吡喃型阿拉伯糖以2：1的比例連接而成的直鏈多糖)，其分子量為35.37kda。lblp-3由阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、木糖、半乳糖、葡萄糖6種單糖構(gòu)成，含量比為1.76:1.19:2.32:1.00:1.88:3.18，但lblp-3并不是分子量均一的多糖。經(jīng)測(cè)定，lblp-3由3個(gè)分子量的單糖構(gòu)成，其分子量分別為31.55kda、62.76kda、97.43kda。lblp-5的單糖組成與lblp-3相同，當(dāng)含量比為1.81:2.71:2.94:2.90:1.00:1.45，分子量為164.00kda。而枸杞葉粗多糖中，共檢測(cè)出7種單糖，阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖，其中含量最高的是核糖，最低的是木糖。

本發(fā)明與其他文獻(xiàn)(枸杞子和傳統(tǒng)枸杞葉)相比，首次發(fā)現(xiàn)了枸杞葉芽多糖中含有核糖，這在其他植物源多糖中還很少見，并且本發(fā)明獲得多糖中的核糖在各個(gè)組分的多糖中均占較高比例，說(shuō)明核糖在枸杞葉多糖中也是一種比較重要的成分，與其結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)。因此，本發(fā)明為植源性核糖的提取與開發(fā)利用提供了一定的理論基礎(chǔ)，具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

下面結(jié)合具體的實(shí)施案例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。

實(shí)施例1：

1)原料處理：將來(lái)自寧夏森淼集團(tuán)科技股份有限公司銀川枸杞基地的寧杞9號(hào)枸杞葉芽洗凈，然后于鼓風(fēng)干燥機(jī)中60℃烘干6h，用粉碎機(jī)將烘干后的枸杞葉芽粉碎并過(guò)60目篩。

2)料液比例按照1g：20ml，將枸杞葉芽粉按料液比例，將原料及純凈水置提取罐，機(jī)組ts-ns-300，功率為50-60kw；

3)提取溫度控制60℃，0.5h打一次循環(huán)，以便多糖更好地溶出，提取時(shí)間8h；將提取液轉(zhuǎn)移至濃縮罐中，濃縮溫度控制70℃，濃縮壓力-0.08mpa～-0.09mpa，濃縮時(shí)間5h，濃縮至原液體積的20％；

4)將濃縮液置入醇沉灌中，加入4倍濃縮液體積的濃度為95％食用酒精后過(guò)夜醇沉；

5)去上清液后，將醇沉后的物質(zhì)，放入冷凍干燥機(jī)中，-40℃，干燥至恒重，即得枸杞葉芽粗多糖粉末；

6)初步純化：將得到的粗多糖粉末充分溶于蒸餾水，用naoh(2mol/l)溶液調(diào)節(jié)ph為9，加入0.03％堿性蛋白酶(武漢剛正生物科技有限公司堿性蛋白酶)，40℃酶解4h，溶液先用0.8μm濾膜微濾，然后用0.45μm的濾膜微濾，利用超濾的方法，加入合并液9倍體積的去離子水進(jìn)行超濾，超濾膜分子截留量為10kda，收集分子量大于10kda的溶液，后將此部分體積濃縮為原來(lái)的20％，再次根據(jù)步驟4)進(jìn)行醇沉并根據(jù)步驟5)進(jìn)行冷凍干燥后得到純度較高的枸杞葉芽多糖粉末。

實(shí)施例2：

deae-cellulose52離子交換層析柱純化。

deae-cellulose52柱料經(jīng)預(yù)處理后裝入層析柱(60cm×2.6cm)中，用去離子水過(guò)夜平衡(流速為1ml/min)。

稱取實(shí)例1枸杞葉芽多糖粉末0.5g，用去離子水溶解后加入到層析柱中，然后依次用去離子水、0.05mol/l的nacl溶液、0.1mol/l的nacl溶液、0.2mol/l的nacl溶液、0.4mol/l的nacl溶液以1ml/min的流速洗脫，用自動(dòng)部分收集器分管收集，每管10ml，每種洗脫液收集50管。

從管中吸取0.2ml溶液，加水至1ml，再加入1ml質(zhì)量濃度為6％苯酚溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配)，搖勻后迅速加入3ml濃硫酸(含量95％-98％)，搖勻，室溫放置5min，然后置于沸水浴中加熱15min，冷水迅速冷卻至室溫，室溫放置20min，在波長(zhǎng)490nm處用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，并以吸光度為縱坐標(biāo)、管數(shù)為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線。

將同一洗脫峰中的溶液合并，超濾除鹽，利用超濾的方法，加入合并液9倍體積的去離子水進(jìn)行超濾，超濾膜分子截留量為10kda，收集分子量大于10kda的溶液，后將此部分體積濃縮為原來(lái)的20％，根據(jù)實(shí)例1步驟(4)進(jìn)行醇沉，實(shí)例1步驟(5)進(jìn)行凍干，凍干后得到5種多糖，分別命名為lblp-1、lblp-2、lblp-3、lblp-4、lblp-5。

實(shí)施例3：

sephadexg-100層析柱純化。

sephadexg-100經(jīng)預(yù)處理后裝入層析柱(中60cm×2.6cm)，蒸餾水過(guò)夜平衡(流速為1ml/min)。

稱取實(shí)施例2中得到的lblp-1、lblp-3、lblp-4、lblp-5各0.1mg溶于蒸餾水后分別加入層析柱中，用蒸餾水以1ml/min的流速洗脫，用自動(dòng)部分收集器分管收集，每管10ml，每種洗脫液收集50管。

從管中吸取0.2ml溶液，加水至1ml，再加入1ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6％苯酚溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配)，搖勻后迅速加入3ml濃硫酸(含量95％-98％)，搖勻，室溫放置5min，然后置于沸水浴中加熱15min，冷水迅速冷卻至室溫，室溫放置20min，在波長(zhǎng)490nm處用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，并以吸光度為縱坐標(biāo)、管數(shù)為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線。

將同一洗脫峰中的溶液合并，根據(jù)實(shí)例2步驟(4)超濾除鹽并濃縮，根據(jù)實(shí)例1步驟(4)醇沉，離心根據(jù)實(shí)例1步驟(5)凍干后得到較純的枸杞葉芽多糖。

實(shí)施例4：

枸杞葉芽多糖的單糖組分測(cè)定。

稱取20mg多糖于雞心瓶中，加入2ml的2mol/l的三氟乙酸溶液(tfa)，用漩渦混合器充分溶解后封管，并在立式滅菌鍋中120℃水解2h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將瓶?jī)?nèi)的溶液蒸干并去除三氟乙酸。

加入2ml吡啶，漩渦振蕩器充分震蕩，充分溶解水解后的單糖，加入0.4ml三甲基氯硅烷和0.8ml六甲基二硅胺烷，密封并充分震蕩，然后在恒溫水浴鍋中50℃反應(yīng)15min。

反應(yīng)結(jié)束后加入1.5ml蒸餾水并充分震蕩，靜置30min，取吡啶層于離心機(jī)中3,000r/min離心15min，進(jìn)行氣相色譜分析。

色譜條件為：shimadzugc-2010氣相色譜儀，rtx-5(30m×0.25mm×0.25um)毛細(xì)管柱，氫火焰離子檢測(cè)器(fid)；上樣量為1μl，進(jìn)樣口溫度為280℃；色譜柱溫度程序?yàn)?80℃保持20min，以20℃/min的速度上升到280℃，保持10min；氫氣和氮?dú)獾牧魉贋?0ml/min；檢測(cè)器溫度為300℃。粗多糖和個(gè)組分多糖的單糖種類及含量比如表1所示。

表1枸杞葉芽多糖的單糖組成

實(shí)驗(yàn)1、枸杞葉芽多糖的dpp4抑制活性研究：

本發(fā)明將在實(shí)施例3中得到的lblp-1、lblp-3、lblp-4、lblp-5和實(shí)例1得到的粗多糖進(jìn)行了dpp4抑制率的測(cè)定，具體結(jié)果如表2所示。

表2枸杞葉多糖dpp4抑制活性對(duì)比

本發(fā)明公開了一種枸杞葉芽多糖的制備方法及其在治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明采用多功能提取濃縮機(jī)組提取制備枸杞葉芽多糖，提取料液比1g：10ml-1g：30ml，提取機(jī)組功率40kw-50kw，提取時(shí)間4h-10h，溫度控制,60-90℃，其濃縮溫度控制，50-80℃，濃縮負(fù)壓力—0.05-0.09mpa的條件，濃縮至原液體積的10-40％。本發(fā)明同時(shí)還提供了一種枸杞葉芽(寧杞9號(hào))多糖中各組分的結(jié)構(gòu)特征。經(jīng)deae-cellulose52分離后的多糖再用sephadexg-100進(jìn)行進(jìn)一步純化，其洗脫曲線如圖2所示。進(jìn)一步用gc、gc-ms、hpsec、nmr等分析寧杞9號(hào)葉芽多糖亞結(jié)構(gòu)特征，發(fā)現(xiàn)lblp-1的重復(fù)單元為[→3)-α-d-ribf-(1→5)-α-l-arap-(1→3)-α-d-ribf-(1→]n(即由1,3鍵連接的α,d呋喃型核糖和1,5鍵連接的α,l吡喃型阿拉伯糖以2：1的比例連接而成的直鏈多糖)，其分子量為35.37kda。lblp-3由阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、木糖、半乳糖、葡萄糖6種單糖構(gòu)成，含量比為1.76:1.19:2.32:1.00:1.88:3.18，但lblp-3并不是分子量均一的多糖。經(jīng)測(cè)定，lblp-3由3個(gè)分子量的單糖構(gòu)成，其分子量分別為31.55kda、62.76kda、97.43kda。lblp-5的單糖組成與lblp-3相同，當(dāng)含量比為1.81:2.71:2.94:2.90:1.00:1.45，分子量為164.00kda。而寧杞9號(hào)葉芽粗多糖中，共檢測(cè)出7種單糖，阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖，其中含量最高的是核糖，最低的是木糖。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用多功能提取濃縮機(jī)組提取制備枸杞葉芽多糖的工藝，在枸杞葉芽提取制備多糖方面尚屬空白，其技術(shù)具有提取工藝的連續(xù)性，并有提取能耗低、有效成分得率高和批量生產(chǎn)的特點(diǎn)，尤其是本發(fā)明提取工藝可直接得到枸杞葉芽多糖，工藝步驟連續(xù)完成，具有批量規(guī)模生產(chǎn)推廣應(yīng)用的價(jià)值。

經(jīng)提取和初步純化的枸杞葉芽的粗多糖，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其中共有7種單糖，分別為阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖，核糖為含量最多的單糖組分。因此，通過(guò)與其他文獻(xiàn)(枸杞子和傳統(tǒng)枸杞葉)對(duì)比，本發(fā)明首次從寧杞9號(hào)葉芽多糖中發(fā)現(xiàn)了核糖，且核糖在各個(gè)組分的多糖中均占較高比例，說(shuō)明核糖在寧杞9號(hào)葉芽多糖中也是一種比較重要的成分，與其結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)。因此，本發(fā)明為植源性核糖的提取與開發(fā)利用提供了一定的理論基礎(chǔ)，具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

最后，還要注意的是，以上的舉例僅是本發(fā)明很少的幾個(gè)具體實(shí)施例，顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。因此，在此領(lǐng)域能從本發(fā)明的公開內(nèi)容中直接到處或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。