專利名稱：具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物、制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列芳基硫脲類化合物和其藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽；本發(fā)明也涉及這 一系列芳基硫脲類化合物的制備方法及生產(chǎn)方法；本發(fā)明還涉及這一系列化合物在制造抗病 毒藥物上的用途。
技術(shù)背景由于人類免疫缺陷病毒(HIV)變異快、并且目前缺乏有效的治療藥物，艾滋病在全世 界范圍內(nèi)迅速蔓延，因此，開發(fā)有效治療HIV感染藥物已成為世界范圍內(nèi)最具挑戰(zhàn)性的難題。 目前用于臨床和研究的抗HIV藥物多是以逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)、蛋白酶(PR)和整合酶(IN)等為 靶點(diǎn)的酶抑制劑藥物。由于酶結(jié)構(gòu)的突變，HIV病毒對(duì)這幾類以酶為靶點(diǎn)的藥物易產(chǎn)生耐藥性， 從而對(duì)治療措施和疾病的結(jié)果造成明顯的不良影響。這些都說明開發(fā)抗HIV藥物的新靶點(diǎn)是非 常必要的。近期研究發(fā)現(xiàn)，在人類免疫缺陷病毒(HIV)復(fù)制周期的組裝階段，幾千個(gè)病毒Gag多 聚蛋白在細(xì)胞膜聯(lián)合，出芽形成一個(gè)不成熟的、無感染力的病毒粒子。隨后Gag被蛋白酶裂 解，釋放衣殼蛋白(CA)。衣殼蛋白隨即組裝成為衣殼-成熟病毒中央核微粒的多聚蛋白殼， 從而包裹了病毒RNA。所以，衣殼的形成及穩(wěn)定性對(duì)于病毒的感染性是至關(guān)重要的，抑制衣 殼組裝的衣殼蛋白突變是致死性的，改變衣殼的穩(wěn)定性會(huì)嚴(yán)重的減弱病毒復(fù)制，這些因素都 使得衣殼蛋白成為極具吸引力的潛在抗病毒靶點(diǎn)。JE石開究(Chun Tang, Erin Loeliger， Isaac Kinde, Samson Kyere. Antiviral Inhibition of the HIV Capsid protein. J. Mol. Bio. 327, 1013 -1020 (2003))，化合物N-(3-氯-4-甲基苯基)隱N，-{2-[({5-[(二甲氨基)-甲基]-2-呋喃}-甲基)-硫基]乙基}脲(CAP-1)能與HIV-l衣殼蛋白N末端結(jié) 構(gòu)域結(jié)合，CAP-1在病毒成熟過程中抑制衣殼蛋白分子間連接從而抑制病毒衣殼的組裝，并 且影響了不成熟病毒粒子的組裝中正常的Gag-Gag的相互作用。細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)該化合物良好耐 受，CAP-1以濃度依賴的方式抑制HIV—1感染，所以對(duì)其進(jìn)行體內(nèi)抗病毒及機(jī)制研究是可行 的。。在CAP-1作用下，病毒表現(xiàn)出明顯不一致的尺寸及反常的核形態(tài)，'并且病毒組裝和成熟 階段的衣殼蛋白一衣殼蛋白作用被抑制。這些發(fā)現(xiàn)為發(fā)展組裝抑制劑成為一類新的艾滋病 (AIDS)治療制劑奠定了基礎(chǔ)。Brain和Sampson等人進(jìn)一歩闡釋CAP-l抑制活性的分子機(jī)理(Brian N. Kelly, Sampson Kyere, Isaac Kinde， Chun Tang. Structure of the Antiviral Assembly Inhibitor CAP-1 Complex with the HIV陽l C A Protein. J. Mol. Biol. (2007) 373, 355—366)。在衣殼蛋白與CAP-l作用后， 原來包埋在蛋白中心的Phe32側(cè)鏈發(fā)生翻轉(zhuǎn)，從蛋白中心移動(dòng)到蛋白表面的位置，從而暴露出 一個(gè)疏水口袋。CAP-1脲基一側(cè)的取代苯環(huán)插入到這個(gè)疏水口袋中，脲基上的氫與蛋白Va159 的羰基形成氫鍵作用，而CAP-l脲基另一側(cè)的二亞甲基與Glu28的側(cè)鏈也有相互作用，共同構(gòu) 成CAP-1與蛋白的作用模式。為此，我們根據(jù)CAP-1的結(jié)構(gòu)及與蛋白的作用模式，以計(jì)算機(jī)模擬小分子與CA結(jié)合所 得數(shù)據(jù)為依據(jù)，設(shè)計(jì)并合成了一系列芳基硫脲類化合物，并就其對(duì)衣殼蛋白的影響、對(duì)HIV病毒復(fù)制的抑制進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明該類化合物具有較明顯的抗HIV體外復(fù)制的作用。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明確切地講涉及式(I )的化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或 堿的鹽。R3 R4 式(I )其中R卜R2、 R3、 R4代表氫、烴基、鹵素、垸氧基的一種或幾種基團(tuán)，R卜R2、 R3、 R4代表 的基團(tuán)可以相同也可以不同。本專利包括以上所代表的化合物及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。 ——"烴基"被定義為Q-C6的直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的基團(tuán)；Q-C6的環(huán)狀基團(tuán)；苯環(huán)基團(tuán)?！?鹵素"被定義為氟、氯、溴、碘、砹。—一 "烷氧基"被定義為氧的末端連有烷基的基團(tuán)。這単烷基被定義為d-C6的直鏈或 支鏈的飽和的基團(tuán)?！?垸基"被定義為d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。在藥學(xué)上可接受的酸的鹽是指鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸、碳酸、甲酸、乙酸、檸檬酸、 乳酸、富馬酸、酒石酸以及葡萄糖酸形成的含結(jié)晶水或不含結(jié)晶水的鹽。在藥學(xué)上可接受的堿的鹽是指氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺形成的含結(jié)晶水或 不含結(jié)晶水的鹽。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R產(chǎn)烴基、鹵素、，Rf烴基、鹵素、垸氧 基，Rf烴基、鹵素、垸氧基，R4二烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是Q-C6的直鏈或支鏈烷 基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的烷氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取 代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的Q-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基。鹵素可以是氟、氯、 溴、碘、砹。垸氧基可以是氧的末端連有的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R產(chǎn)H， R^烴基、鹵素、垸氧基，RHS 基、鹵素、垸氧基，R4二烴基、鹵素、垸氧基。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、 Q-C6直鏈或支鏈的烷氧基、d-Q直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的Ci-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。 烷氧基可以是氧的水端連有d-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。垸基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R產(chǎn)烴基、鹵素、垸氧基，R2=H， R產(chǎn)烴基、鹵素、垸氧基，& =烴基、鹵素、垸氧基。烴基可以是CpC6的直鏈或支鏈垸基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的烷氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的Q-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。 烷氧基可以是氧的末端連有CrQ的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈 或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸烴基、鹵素、烷氧基，Rf烴基、鹵素、 烷氧基，R3=H， R4^烴基、鹵素、垸氧基。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、d-C6 直鏈或支鏈的垸氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和 取代雜環(huán)取代基的Q-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧 基可以是氧的末端連有CrC6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。垸基可以是d-C6的直鏈或支 鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸烴基、鹵素、烷氧基，Rf烴基、鹵素、 垸氧基，R產(chǎn)烴基、鹵素、烷氧基，R4=H。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C廣C6 直鏈或支鏈的烷氧基、C,-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含'雜環(huán)和 取代雜環(huán)取代基的Q-Q的直鏈或支鏈垸基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧 '基可以是氧的末端連有C,-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。垸基可以是Q-C6的直鏈或支 鏈的飽和的基團(tuán)。'作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R,=H， R2=H， R^烴基、鹵素、烷氧基， R4二烴基、鹵素、垸氧基。烴基可以是C,-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、Q-Q直鏈或支鏈的 烷氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代 基的d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有d-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸H， R產(chǎn)烴基、卣素、烷氧基，R3=H，R4二烴基、鹵素、垸氧基。烴基可以是Q-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的烷氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代 基的d-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的 末端連有Q-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。垸基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸H， R產(chǎn)烴基、鹵素、烷氧基，'Rf烴基、鹵素、垸氧基，R4=H。烴基可以是C,-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、Q-C6直鏈或支鏈 的烷氧基、C,-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取 代基的d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。垸氧基可以是氧 的末端連有d-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C,-C6的直鏈或支鏈的飽和的 基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸烴基、鹵素、烷氧基，R2=H， R3=H， &=烴基、鹵素、垸氧基。烴基可以是CrC6的直鏈或支鏈烷基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的 垸氧基、Q-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有crc6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是crc6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸烴基、鹵素、垸氧基，Rf烴基、鹵素、 烷氧基，R3=H， R4=H。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、C廣C6直鏈或支鏈的烷 氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基 的d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。垸氧基可以是氧的末端連有d-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸烴基、鹵素、垸氧基，R2=H， Rf烴基、卣素、烷氧基，R4=H。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、d-C6直鏈或支鏈 的烷氧基、d-C6直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取 代基的Q-Q的直鏈或支鏈垸基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。垸氧基可以是氧 的末端連有d-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的 基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R產(chǎn)H， R2=H， R3=H， R4二烴基、鹵素、 烷氧基。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈垸基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的烷氧基、d-C6直 鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的Q-C6的直 鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有C,-C6 的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是CrC6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R產(chǎn)H， Rf烴基、鹵素、垸氧基，R3=H，R4 = H。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的垸氧基、d-Ce直鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的d-C6的直鏈 或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。垸氧基可以是氧的末端連有CVC6的 直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R尸H， R2=H, R3=H， 114 =烴基、鹵素、 烷氧基。烴基可以是d-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、d-C6直鏈或支鏈的垸氧基、d-C6直 鏈或支鏈的氨基垸基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的d-Q的直 鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。垸氧基可以是氧的末端連有d-C6 的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是d-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。按照本發(fā)明，對(duì)于式(I )優(yōu)選的化合物是是R尸氯，溴；R2=H; R3=H; R4 = H是R^H; Rf甲基、甲氧基；R3=H; R4二H是1^=氟；R2=H; Rf氟；R4 = H是R尸甲基、甲氧基；R2=H; R3=H; R4 = H是Ra二氯；Rf甲基；R3=H; R4二H是1^=11; R2=H; R3=H; 甲基是R產(chǎn)氯；尺2=氯；R3=H; R4二氯這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。優(yōu)選化合物以及它們與藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽構(gòu)成本發(fā)明的完整內(nèi)容 的一部分。
具體實(shí)施方式
按照本發(fā)明，對(duì)于式(I )化合物的制備方法，其特征在于以式(II )的化合物和式(III) 化合物為原料該制備包括如下過程以式(IV)的化合物為原料，以二硫化碳、三乙烯二胺、三聚光氣為催化劑，制備式(II ) 的化合物。以鄰苯二甲酸酐為原料，在四氫呋喃中，在硼氫化鈉存在下，制備苯并異呋喃-l-酮。 苯并異呋喃-l-酮和硝酸鉀，在濃硫酸中，制備6-硝基苯并異呋喃-l-酮。 6-硝基苯并異呋喃-l-酮和二氯亞錫，在濃鹽酸中，制備6-氨基苯并異呋喃-l-酮。 以式(II)的化合物、6-氨基苯并異呋喃-l-酮為原料，在乙醇溶劑中，制備N-(取代苯基)-N'-(l ， 3-二氫-3-氧代-苯并異呋喃)硫脲。本發(fā)明還涉及藥物組合物，包含至少一種式(I )化合物或這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽作為活性成分，單獨(dú)或結(jié)合一種或幾種藥學(xué)上可接受的、惰性的、無毒的賦形劑或載體。在按照本發(fā)明的藥物組合物中，可以特別提到適用于口服、胃腸外(靜脈內(nèi)、肌肉或皮 下)、經(jīng)皮或透皮、經(jīng)鼻、直腸、經(jīng)舌的那些，特別是片劑或糖衣丸、膠囊劑、錠劑、栓劑、 皮膚凝膠、可注射制劑。本發(fā)明化合物具有明顯的抗病毒活性。含有至少一種式(I )化合物或這些化合物所形式(II)式(III)式(IV)成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽作為活性成分化合物的藥物組合，因此可以用于病毒的治療，特別是用于HIV病毒的治療。化合物經(jīng)體外抑制HIV-1病毒復(fù)制活性篩選試驗(yàn)，結(jié)果表明化合物具有一定的抑制HIV-1病毒復(fù)制的活性。下列實(shí)施例用來進(jìn)一步說明本發(fā)明而不是用來限制本發(fā)明。 所用原料和(或)試劑均為已知的產(chǎn)品，或者是按照已知操作制備的產(chǎn)品。 實(shí)施例和合成步驟中所述化合物的結(jié)構(gòu)是按照常規(guī)的光譜技術(shù)(NMR、 MS)測(cè)定的。 實(shí)施例l 3-溴-異硫氰酸苯酯的制備在電磁攪拌下，將1.9g的3-溴苯胺和7.3g的六水合三乙烯二胺溶于50ml乙醇中，緩慢 滴入二硫化碳2.0ml，反應(yīng)12小時(shí)，生成大量沉淀。過濾出沉淀，并紅外烘干。將烘干的沉 淀物懸浮于50ml氯仿中，冰浴條件下，緩慢滴入溶有1.0g三聚光氣的氯仿10ml，滴完后常 溫?cái)嚢?小時(shí)后，加熱回流1小時(shí)使反應(yīng)完全，冷卻至室溫，過濾除去不溶物，濾液減壓蒸 干，得3-溴-異硫氰酸苯酯粗品，然后經(jīng)減壓柱層析(石油醚乙酸乙酯=10: l洗脫)，得液 狀3-溴-異硫氰酸苯酯,收率89%， EI-MS:213(98%),215(100%)。實(shí)施例2苯并異呋喃-l-酮的制備將4.92g鄰苯二甲酸酐及2.30g硼氫化鈉溶于40ml四氫呋喃，冰鹽浴下緩慢滴加約10ml 甲醇催化反應(yīng)進(jìn)行，滴完后室溫反應(yīng)1小時(shí)，再加入40mllN鹽酸停止反應(yīng)。抽濾反應(yīng)液， 將濾液用W30ml乙酸乙酯萃取，棄去水層，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾除去硫酸鈉，溶 液減壓蒸干得到產(chǎn)物4.2g。實(shí)施例3 6-硝基-苯并異呋喃-l-酮的制備將4.2g苯并異呋喃-l-酮及5.0g硝酸鉀置于50ml圓底燒瓶，冰裕下緩慢滴加16ml濃硫 酸，常溫12h反應(yīng)，將反應(yīng)混合物傾入100ml冰水中，攪拌下出現(xiàn)大量黃色沉淀，減壓抽濾 棄去濾液，沉淀用無水乙醇童結(jié)晶得到純化產(chǎn)物l.lg。實(shí)施例4 6-氨基-苯并異呋喃-l-酮的制備電磁攪拌下，將實(shí)施例3中所得產(chǎn)物及6.25§六水合氯化亞錫溶于371111的37%鹽酸中， 再加入9ml蒸餾水，50攝氏度下反應(yīng)1.5小時(shí)，用TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)行，反應(yīng)完全后置于冰浴 l小時(shí)，析出大量沉淀，抽濾棄去濾液，反復(fù)洗滌，冷凍干燥，得到產(chǎn)物。^-NMR (300MHz, DMSO-d6) S3.962(s, 2H), 5.226(s, 2H), 6.979-7.013(d, 2H), 7.145(s, 1H), 7.240-7.276(d, lH);EI-MS(m/z):149。實(shí)施例5 N-(取代苯基)-N'-(l， 3-二氫-3-氧代-苯并異呋喃)硫脲的制備將3-溴-異硫氰酸苯酯0.213克(lmmol)和6-氨基苯并異呋喃-l-酮0.149克(lmmol)分別加 入到50ml反應(yīng)瓶中，25ml乙醇溶解，電磁攪拌下滴入0.2ml三乙胺，常溫?cái)嚢柽^夜，12小 時(shí)，析出白色沉淀，抽濾，乙醇重結(jié)品，得白色粉狀品體，收率85%，熔點(diǎn)166-168攝氏度。 'H-NMR (300MHz, DMSO-d6) 55.382(s， 2H), 7.2卯-7.321(t, 2H),7.404-7.415(m， 1H), 7.599-7.642(d, 1H), 7.757-7.767(d, 1H), 7.806-7.786(t， 1H), 7.986-7.996(t, 1H); EI陽MS(m/z):362,364。本發(fā)明化合物的藥理研究。實(shí)施例6抑制HIV-1復(fù)制體外實(shí)驗(yàn)。將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的MT4細(xì)胞配成濃度為40xl()S個(gè)/毫升的細(xì)胞懸液，每孔100微升加入 96孔板。待測(cè)藥物過濾除菌，用RPMI1640培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋(1.0 U M、 0.5 U M、 0.25 U M、 0.125 UM、 0.0625 UM、 0.03125 yM),每孔50 U L加入96孔板中。再加滴度分別是 100TCIDso和IOOOTCID50 (tissue cultured infection dose)的HIV-1 50 y L，每種藥物濃度和病 毒滴度組合做4復(fù)孔。設(shè)陽性對(duì)照(AZT+ ^1丁4細(xì)胞+ HIV-1 )、陰性對(duì)照(水+ MT4細(xì)胞+ HIV-1)、藥物毒性對(duì)照(藥物+MT4細(xì)胞)和空白對(duì)照(MT4細(xì)胞十HIV-1 )。在37。C、 5%C02 條件下培養(yǎng)7天。每天定時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，培養(yǎng)第三天每孔補(bǔ)加50"L新鮮培養(yǎng)基，第 六天觀察細(xì)胞病變(CPE)。全部實(shí)驗(yàn)按照操作規(guī)程在生物安全3級(jí)(BSL-3)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，重復(fù)兩次。計(jì)算抑制 率和IC50。
權(quán)利要求
1.具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物，其特征在于式(I)的化合物以及這些化合物在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽式(I)其中R1、R2、R3、R4代表氫、烴基、鹵素、烷氧基的一種或幾種基團(tuán)，R1、R2、R3、R4代表的基團(tuán)可以相同也可以不同；——“烴基”被定義為C1-C6的直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的基團(tuán)；C1-C6的環(huán)狀基團(tuán)；苯環(huán)基團(tuán)；——“鹵素”被定義為氟、氯、溴、碘、砹；——“烷氧基”被定義為氧的末端連有烷基的基團(tuán)。這里烷基被定義為C1-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)；——“烷基”被定義為C1-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)；所有化合物及其在藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽；藥學(xué)上可接受的酸的鹽是指鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸、碳酸、甲酸、乙酸、檸檬酸、乳酸、富馬酸、酒石酸以及葡萄糖酸形成的含結(jié)晶水或不含結(jié)晶水的鹽；藥學(xué)上可接受的堿的鹽是指氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺形成的含結(jié)晶水或不含結(jié)晶水的鹽。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物，其特征在于式(I )化合 物中R尸H; R2=H; 113=溴；R4=H。這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受 的酸或堿的鹽。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物，其特征在于式(I )化合 物中R,=氯；R2=H; Rf氯；&=氯。這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物，其特征在于式(I )化合 物中R, =H; R2=H; 113=氯；R4=H。這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
5. 根拔':權(quán)利狡:求1所述的具有抗病毒活性的芳戰(zhàn)硫脲類化合物，其特征在于式(I )化合 物中R產(chǎn)紘；R2=H; 113=氟；R4=H。這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上—。J接受的酸或慽的鹽。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物，其特征在于式(I )化合 物中&=甲基、甲氧基；R2=H; R3=H; R4=H。這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗病毒活性的芳基琉脲類化合物，其特征在于式(I )化合 物中R^H; Rz-甲基；R3-氯；R4=H。這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接 受的酸或堿的鹽。
8. 按照本發(fā)明，對(duì)于式(I )化合物的制備方法，其特征在于以式(n)的化合物和式(m)化合物為厚料<formula>formula see original document page 3</formula>式(IV)該制備包括如下過程以式(IV)的化合物為原料，以二硫化碳、三乙烯二胺、三聚光氣為催化劑，制備式 (II )的化合物。以鄰苯二甲酸酐為原料，在四氫呋喃中，在硼氫化鈉存在下，制備苯并異呋喃-l-酮。 苯并異呋喃-l-酮和硝酸鉀，在濃硫酸中，制備6-硝基苯并異呋喃-l-酮。 6-硝基苯并異呋喃-l-酮和二氯亞錫，在濃鹽酸中，制備6-氨基苯并異呋喃-l-酮。 以式(II)的化合物、6-氨基苯并異呋喃-l-酮為原料，在乙醇溶劑中，制備N-(取代苯 基)-N'-(l， 3-二氫-3-氧代-苯并異呋喃)硫脲。
9. 藥物組合物，包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至7任意一項(xiàng)的式(I)化合物或這些化合物 所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽作為活性成分，單獨(dú)或結(jié)合一種或幾種藥學(xué)上可接 受的、惰性的、無毒的賦形劑或載體。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9的藥物化合物，其特征在于是用于抗病毒治療的組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抗病毒活性的芳基硫脲類化合物、制備方法及用途。本發(fā)明提供了式(I)的化合物其中，R₁、R₂、R₃、R₄代表氫、烴基、鹵素、烷氧基的一種或幾種基團(tuán)，R₁、R₂、R₃、R₄代表的基團(tuán)可以相同也可以不同。本發(fā)明還提供了這些化合物的制備方法。這些化合物對(duì)HIV病毒具有優(yōu)良的抑制效果。
文檔編號(hào)A61P31/00GK101239958SQ20081010162
公開日2008年8月13日 申請(qǐng)日期2008年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月10日
發(fā)明者龐瑞芳, 李介博, 銘 楊, 侃 諶, 譚志武 申請(qǐng)人:北京大學(xué)